Protocol
1. Stillads Fabrication
- Grind NaCl i et laboratorium blender i 20 minutter og tør det på en varmelegeme ved 100 ° C.
- Sætte den tørrede NaCl (45 g på tidspunktet) i en sigtemaskine i 30 minutter ved den højest tilgængelige frekvens uden forekommer i resonans. Saml seks salt fraktioner, der spænder fra 500 um til 1000 um (M 500); fra 300 um til 500 um (M 300); fra 100 um til 200 um (M 100); fra 90 um til 100 (M 90); fra 45 um til 65 um (M 45) og endelig M 10 med saltpartikler størrelse mindre end 45 um som skematiseret i figur 1.
- Vakuum tørre natten alle anvendte materialer for at undgå hydrolytisk spaltning under behandlingen. For hvert materiale vælges temperaturen for at maksimere graden af tørring uden overvindelse - i tilfælde af polymerer - glasovergangstemperaturen. Vælg derfor T = 90 ° C i PLA og T = 25 ° C i PEG, T = 105 ° C i NaCl.
- FoderPLA, PEG og NaCl, med en vægtprocent sammensætning 20/5/75 henholdsvis til en batch mixer drift ved T = 190 ° C, og n = 60 rpm og derefter behandle dem indtil opnåelse af en konstant værdi af drejningsmoment, sædvanligvis efter ca. 10 minutter. Derefter hurtigt indsamle det resulterende materiale.
- Forbered mono-lag ved hjælp af et laboratorium presse arbejder ved 210 ° C, sætte blandingerne i passende cylindriske forme med en diameter på 10 mm og en højde på 3 mm og holde dem i 60 sekunder ved omgivende tryk og 3 minutter ved 180 bar . Derefter afkøles blandingerne ved stuetemperatur holde trykket på 180 bar.
- Montering af Tre lag via kompression-støbning
- Forbered hvert enkelt lag på samme måde som den beskrevet i (1.5) men ved anvendelse af forskellige forme, dvs. med en diameter på 10 mm og en højde på 1 mm. Endelig får 6 skiver med en diameter på 10 mm og en højde på 1 mm, med indhold seks forskellige partikelstørrelser: M 500, M 300, M 100,
- for samling trelags stillads A (TLS A), hober sig op M 500, M 300 og M 100 inden i cylindrisk form og kompressionstænding støbe dem i et laboratorium presse arbejder ved 210 ° C i 60 sekunder ved omgivende tryk og 3 minutter ved 180 bar og derefter afkølet ved stuetemperatur, holde trykket på 180 bar.
BEMÆRK: Forbered TSL B ved stabling på hinanden M 90, M 45 og M 10 i de samme forme og udfører kompressionsstøbning operation ved at følge den samme procedure som den, der anvendes til TLS A.
- Fjern diskene fra de cylindriske forme og sætte dem i en kogende demineraliseret vand bad, uden omrøring. 3 timer efter, fjernes de resulterende porøse konstruktioner fra badet og lad dem tørre i 12 timer ved stuetemperatur i en kemisk hætte.
2. Morfologisk analyse
- Evaluere de morfologier af strukturerne ved scanningselektronmikroskopi.
- Nedbryd prøverne under flydende nitrogen og derefter vedhæfteprøverne på en aluminium stub ved hjælp af en klæbende carbon tape. Endelig sputter-Coate med guld i 90 s under argon atmosfære før billedbehandling for at undgå elektrostatisk afladning under testen.
3. Stillads Pore størrelse
- Uddybe billeder opnået ved SEM-analyse med et billedbehandlings-software i stand til at genkende porestørrelsesfordeling stilladset.
BEMÆRK: I dette arbejde porestørrelsesfordelingen analyse blev udført under anvendelse af en MATLAB-baseret software tidligere beskrevet 33
4. Porøsitet
- Afvej prøverne før udvaskning og evaluere den teoretiske porøsitet efter følgende udtryk:
BEMÆRK: M NaCl, m PEG og m PLA, er henholdsvis den teoretiske masse af NaCl, PEG, og PLA, når der antages homogene blandinger. Than tætheder (ρ) NaCl, PEG og PLA er henholdsvis 2,16 g / cm3, 1,12 g / cm3 e 1,24 g / cm3. - Afvej prøverne efter udvaskning og tørring for at vurdere den tilsyneladende densitet af prøverne (ρ stillads), og derefter evaluere den reelle porøsitet som den reciprokke af forholdet mellem den tilsyneladende densitet af stilladset og densiteten af ikke-porøs PLA ved ud fra ligning (2).
BEMÆRK: Det udtrykker forholdet mellem det tomme volumen af stilladset og den fulde volumen af stilladset (tom + fuld).
5. Mekaniske egenskaber
- Test prøverne under kompressionskraft tilstand ved hjælp af en trækmaskine, der er udstyret med en 1 kN vejecelle. Indstil en konstant tøjningshastighed på 1 mm min-1.
- For at undersøge den mekaniske ydeevne prøverne i fysiologisk miljø, udstyre dynamometer med et bad indeholdende (PBS), (pH = 7,4) ved 37 ° C og udføre testen med samme opsætning som beskrevet i punkt 5.1.
- Før hver måling i vådt miljø, sættetid prøverne med PBS i et vakuum kolbe i 5 min for at lade PBS fylde alle porer. Derefter tillade stilladser til at forblive i PBS ved 37 ° C i 15 minutter for at nå indstillet temperatur.
- Bestem grænsefladeadhæsion styrke (IAS) mellem lagene af TL A og TL B ved anvendelse af en specialdesignet grænsefladepolymerisering styrke testudstyr, forbundet til en mekanisk Testing Machine følge en fremgangsmåde beskrevet i litteraturen 32,34.
- Fastgør stilladset på riggen og sikre den korrekte tilpasning til maskinens vejecelle og base valsen. Fastgør stilladset prøver til aluminium test stubs ved anvendelse af en klæbende høj viskositet og placere dem ind i udstyret til prøvning.
- For våd tilstand test, hydrat prøverne i PBS i 1 time prieller til testning. Brug en 1 kN vejecelle, ved en trækbelastning påføres ved en belastning på 1 mm min-1.
BEMÆRK: Tag højde for, at svigt kan forekomme enten ved maksimal trækstyrke på et af lagene eller på grund af delaminering ved grænsefladerne. Evaluere IAS som den maksimale styrke af stress-strain kurve.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Indflydelsen af NaCl partikelstørrelse på pore arkitektur skeletterne blev vurderet kvalitativt og kvantitativt ved at undersøge morfologien af prøverne og beregning porestørrelsesfordelingen ved billedanalyse henholdsvis figur 2A -. F viser SEM-mikrografer af mono-lags scaffolds resulterende fra salt-udvaskning af materialer, der indeholder forskellige NaCl-partikelstørrelser.
Mere detaljeret M 500 (figur 2a) viste porer med en gennemsnitlig diameter på 500 um, sandsynligvis på grund af brud på saltpartikler med en diameter større end 500 um under smelteblanding. Som det tydeligt ses fra den samme figur er pore arkitektur kendetegnet ved et lavt antal uregelmæssige porer, dårligt sammenkoblede, omgivet af vægge af ca. 10 um. Figur 2b rapporterer morfologien af M 300. I dennetilfælde blev porerne sig at udvise en gennemsnitlig diameter inden for det samme område af saltpartikler fyldt under smelteblanding (300-500 um), hvilket bekræfter, at ingen partikel brud forekom inden smelteblanding proces. Pore vægge viste sig at være tyndere (ca. 5 um) end dem, der observeres i M 500 lag. M 100, (figur 2C), viser en bimodal porøs struktur, kendetegnet ved en heterogen netværk bestående af store porer (100-200 um) omgivet af mindre. Denne pore arkitektur giver en bedre sammenkobling og en øget pore tæthed for volumen enhed, selv om at bestemme en drastisk udtynding af vægge tykkelse. Morfologien af M 90, tilvejebragt i figur 2d, viser groft kubiske porer, homogent fordelt gennem polymermatricen, på grund af den mindre salt størrelsesområde (90-100 um) anvendes i dette tilfælde. Mikroporer, på grund af PEG solvatisering var til stede som mikro-tunneler inde i vægge, der faktisk forekommer meget ru. SEM mikrograf af M 45, vist i figur 2e, viser en høj tæthed af porer, som diametre spænder fra 45 um til 65 um. M 10 (figur 2f) vises den højeste koncentration af porer pr volumenenhed, en gennemsnitlig porestørrelse omtrent lig med 20 um, med en høj grad af sammenkobling og meget tynde (<1 um) vægge.
Figur 3a, a ', a "viser et tværsnit af TLS A, efter udvaskningsprocessen, ved forskellige forstørrelser. I figur 3a er det muligt klart at identificere de tre lag, som hver er karakteriseret ved forskellige gennemsnitlig porestørrelse, mens paneler a 'og a "betegner M 100-M 300 og M 300-M 500 grænseflade, henholdsvis regionerne. Som klart synlige hele enheden ikke præsentere nogen interne spaltninger eller matrix diskontinuitet mellem de forskellige lag. Analogt er TLS B og relaterede grænseflader rapporteret i figur 3b, b ',b ". Billederne viste en morfologi svarende til den i TLS A. Faktisk tre lag med porer af forskellig størrelse kan uden vanskelighed (panel b), hvorimod både M 10-M 45 (panel b ') og M 45-M 90 (panel b ") grænsefladeteknik regioner udviste ingen afskalning eller diskontinuitet. Som forventet, hver enkelt lag bevarer den samme pore arkitektur efter montage og udvaskning trin.
Tabel 1 rapporterer kompressionskraft elasticitetsmoduler af materialerne, målt i luft (tør) og i PBS (våd) miljø. Denne egenskab blev fundet at følge en monoton forøgelse med middelporestørrelse. Den elastiske moduli af de endelige enheder er hovedsageligt bestemt af deres respektive svagere lag (dvs. M 100 til TLS A og M 10 for TLS B) for både TLSs undersøgt. Tabel 2 rapporter IAS for TLS A og TLS B i tørt og vådt miljø . Ingen mellemlag delaminering fænomener blev observeret, da den manglendealtid forekom i midten af de svageste lag af TLS A (M 100) og TLS B (M 10). TLS En vist bedst IAS ydeevne.
Figur 1:. Skema NaCl granulometri Granulometri af sigtede NaCl partikler og tilsvarende prøve koder.
Figur 2: Morfologi af monolag stilladser SEM-mikrografer af monolag stilladser, som har forskellige porestørrelsesfordelinger:. M 500 (a), Scale bar = 400 um; M 300 (b), Scale bar = 400 um; M 100 (c), Scale bar = 400 um; M 90 (d), Scale bar = 200 um; M 45 (e), Scale bar = 40081;. M og M 10 (f), Scale bar = 100 um Klik her for at se en større version af dette tal.
. Figur 3: Morfologi af tre-lags scaffolds (a, a ', a' ') SEM-mikrografer af trelaget stillads type A (TLS A): (a) hele tværsnittet, Scale bar = 500 um; (A ') M 100-M 300 interface, Scale bar = 250 um; (A '') M 300-M 500 interface, Scale bar = 250 um. (B, b ', b' ') SEM mikrografier af tre lag-stillads type B (TLS B): (b) hele tværsnittet, skala bar 500 um; (B ') M 10-M 45 interface, Scale bar; = 100 um; (B ') M 45-M 90 interface, Scale bar = 100 um. Klik her for at se en større version af dette tal.
| Eksempel på kode | Tør - E (MPa) | Wet - E (MPa) |
| M 500 | 40.33 ± 6,04 | 33,23 ± 4,96 |
| M 300 | 37,62 ± 6,89 | 31,42 ± 5,83 |
| M 100 | 32.12 ± 5.11 | 28.03 ± 4.04 |
| M 90 | 30,87 ± 4,93 | 26.91 ± 3,79 |
| M 45 | 25,36 ± 5,82 | 22,83 ± 5,01 |
| M 10 | 21 0,76 ± 3,91 | 19.87 ± 3,93 |
| TL A | 33.08 ± 5.21 | 29.55 ± 4,09 |
| TL B | 22,31 ± 5,46 | 20.54 ± 3.87 |
Tabel 1: kompressionskraft mekaniske resultater Trykstyrke Young modulus af mono- og trelags-skeletter med forskellige porestørrelser i vådt og tørt miljø.. Værdier er angivet som middel ± SD.
| Eksempel på kode | Tørre - IAS (kPa) | Wet - IAS (kPa) |
| TL A | 350,8 ± 51,2 | 299,6 ± 35,1 |
| TL B | 262,3 ± 62,2 | 220,5 ± 31,3 |
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Den første kritiske trin er optimering af sigtning effektivitet. Den høje styring af NaCl partikelstørrelse er grundlæggende for at forberede stillads med ønskede fordeling porestørrelse. Et andet kritisk trin er at undgå brud på de tynde PLA monolag under prøven ekstraktion fra formen. Det billedbehandling analyse måske ikke være repræsentative for hele enheden.
Under trækprøvning, kan prøven rive væk fra udstyret.
Før sigtning trin, konstatere, at saltet er blevet godt tørret for at få en højere kontrol af NaCl partikelstørrelse. Dette spørgsmål er vigtigt, især for de mindste salt partikelstørrelse, på grund af sin ekstremt høje hygroskopicitet. Før kompressionsstøbning trin, påføres et tyndt Teflon spray-coating på formene for at lette prøven fjernelse fra formene. Det billedbehandling analyse skal foretages ved at overveje forskellige billeder tagetfra forskellige regioner af stilladset for at være sikre på, at de er repræsentative for hele indretningen. Endelig før trækprøvning (især dem udført i vådt miljø), omhyggeligt kontrollere klæbemidlet til prøve adhæsion.
Den grundlæggende begrænsning af teknikken ligger i umuligheden for at opnå en kontinuert gradient af porestørrelsen. Faktisk er fremgangsmåden beskrevet heri tillader opnå en diskret gradient af porestørrelse, eftersom den er baseret på samling af forskellige lag. I de fleste tilfælde kan en veldefineret flerlags stillads foretrækkes frem for en kontinuerligt gradueret én, men ikke altid. Denne begrænsning kan delvis overskrides ved at øge antallet af lag, der på skift resulterer i tyndere lag, naturligvis mere vanskelige at håndtere.
Til forskel fra mange andre produktionsteknologier, kan den strategi her vedtaget betragtes miljøvenlige, da det ikke kræver nogen giftige opløsningsmiddel potentielt farligefor miljøet og for levende celler og væv. Endvidere partikeludludning giver en høj kontrol over både porestørrelse og porøsitet ved tuning henholdsvis størrelsen og mængden af NaCl blandes med PLA.
Fremtidige fremskridt i denne teknik er afhængige af muligheden for at samle lag udgør andre kemo-fysiske forskelle. For eksempel kan man samle forskellige biopolymerer eller styrke hvert lag med forskellige nanopartikler, såsom hydroxyapatit 28, nanocellulose 27, graphene 35 eller derivater 9,36,37 for at give endnu flere funktionaliteter 38. I virkeligheden er denne metode sikrer en høj kontrol dermed gør det muligt at nemt tune hver region af flerlagede stillads. Denne udfordring spille en afgørende rolle i ITE, idet tilstedeværelsen af multi-fasisk og / eller anisotrope bio-strukturer, der gradvist ændrer sig fra den ene væv til en anden, er typiske træk ved grænsefladen væv, såsom ligament-to-bén, sene-til-knogle og brusk-til-knogle.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Poly(lactic acid) | NatureWorks | PLA 2002D | |
| Poly(ethylene glycol) | Sigma | 83797-1KG-F | |
| Sodium Cloride | Sigma | 793566-5KG-D | |
| Phosfate Buffer Solution | Sigma | P5368-10PAK | |
| Laboratory Mixer | Brabender | PLE 330 - Plasticorder | |
| Laboratory Press | Carver | ||
| Scanning Electron Microscopy | Phenom-world | ProX | |
| Universal Testing Machine | Instron | 3365 (UK) | |
| BioPuls Bath | Instron, Norwood | ||
| Sieving Machine | Endecotts | E.V.F.1. | |
| Vacuum Oven | ISCO | NSV9035 | |
| Precision Balance | Sartorius | AX224 |
References
- Scaffaro, R., Morreale, M., Lo Re, G., Mantia, F. P. La Degradation of Mater-Bi®/wood flour biocomposites in active sewage sludge. Polymer Degradation and Stability. 94 (8), 1220-1229 (2009).
- Scaffaro, R., Botta, L., Passaglia, E., Oberhauser, W., Frediani, M., Di Landro, L. Comparison of different processing methods to prepare poly(lactid acid)-hydrotalcite composites. Polymer Engineering & Science. 54 (8), 1804-1810 (2014).
- Thakur, V. K., Thakur, M. K. Recent advances in graft copolymerization and applications of chitosan: A review. ACS Sustainable Chemistry and Engineering. 2 (12), 2637-2652 (2014).
- Thakur, V. K., Thakur, M. K. Recent advances in green hydrogels from lignin: A review. International Journal of Biological Macromolecules. 72, 834-847 (2015).
- Thakur, V. K., Kessler, M. R. Self-healing polymer nanocomposite materials: A review. Polymer. 69, 369-383 (2015).
- Thakur, V. K., Thakur, M. K. Recent trends in hydrogels based on psyllium polysaccharide: a review. Journal of Cleaner Production. 82, 1-15 (2014).
- Voicu, S. I., Condruz, R. M., et al. Sericin Covalent Immobilization onto Cellulose Acetate Membrane for Biomedical Applications. ACS Sustainable Chemistry & Engineering. 4 (3), 1765-1774 (2016).
- Scaffaro, R., Botta, L., Sanfilippo, M., Gallo, G., Palazzolo, G., Puglia, A. M. Combining in the melt physical and biological properties of poly(caprolactone) and chlorhexidine to obtain antimicrobial surgical monofilaments. Applied Microbiology and Biotechnology. 97 (1), 99-109 (2013).
- Scaffaro, R., Maio, A., et al. Synthesis and self-assembly of a PEGylated-graphene aerogel. Composites Science and Technology. 128, 193-200 (2016).
- Scaffaro, R., Botta, L., Gallo, G., Puglia, A. M. Influence of Drawing on the Antimicrobial and Physical Properties of Chlorhexidine-Compounded Poly(caprolactone) Monofilaments. Macromolecular Materials and Engineering. 12 (300), 1268-1277 (2015).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., et al. Effect of PCL/PEG-Based Membranes on Actinorhodin Production in Streptomyces coelicolor Cultivations. Macromolecular bioscience. 16 (5), 686-693 (2016).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., Botta, L., Rigogliuso, S., Ghersi, G. Melt Processed PCL/PEG Scaffold With Discrete Pore Size Gradient for Selective Cellular Infiltration. Macromolecular Materials and Engineering. 301 (2), 182-190 (2016).
- Yousefi, A. -M., Hoque, M. E., Prasad, R. G. S. V., Uth, N. Current strategies in multiphasic scaffold design for osteochondral tissue engineering: A review. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 103 (7), 2460-2481 (2015).
- Gillette, B. M., Rossen, N. S., et al. Engineering extracellular matrix structure in 3D multiphase tissues. Biomaterials. 32 (32), 8067-8076 (2011).
- Seidi, A., Ramalingam, M., Elloumi-Hannachi, I., Ostrovidov, S., Khademhosseini, A. Gradient biomaterials for soft-to-hard interface tissue engineering. Acta Biomaterialia. 7 (4), 1441-1451 (2011).
- Son, J. S., Kim, S. G., et al. Hydroxyapatite/polylactide biphasic combination scaffold loaded with dexamethasone for bone regeneration. Journal of Biomedical Materials Research - Part A. 99 (4), 638-647 (2011).
- Sundararaghavan, H. G., Burdick, J. A. Gradients with depth in electrospun fibrous scaffolds for directed cell behavior. Biomacromolecules. 12 (6), 2344-2350 (2011).
- Zou, B., Liu, Y., Luo, X., Chen, F., Guo, X., Li, X. Electrospun fibrous scaffolds with continuous gradations in mineral contents and biological cues for manipulating cellular behaviors. Acta biomaterialia. 8 (4), 1576-1585 (2012).
- Nedjari, S., Schlatter, G., Hébraud, A. Thick electrospun honeycomb scaffolds with controlled pore size. Materials Letters. 142, 180-183 (2015).
- Yusong, P., Qianqian, S., Chengling, P., Jing, W. Prediction of mechanical properties of multilayer gradient hydroxyapatite reinforced poly(vinyl alcohol) gel biomaterial. Journal of Biomedical Materials Research - Part B Applied Biomaterials. 101 (5), 729-735 (2013).
- Kim, Y. B., Kim, G. Functionally graded PCL/β-TCP biocomposites in a multilayered structure for bone tissue regeneration. Applied Physics A: Materials Science and Processing. 108 (4), 949-959 (2012).
- Sudarmadji, N., Tan, J. Y., Leong, K. F., Chua, C. K., Loh, Y. T. Investigation of the mechanical properties and porosity relationships in selective laser-sintered polyhedral for functionally graded scaffolds. Acta biomaterialia. 7 (2), 530-537 (2011).
- Molladavoodi, S., Gorbet, M., Medley, J., Kwon, H. J. Investigation of microstructure, mechanical properties and cellular viability of poly(L-lactic acid) tissue engineering scaffolds prepared by different thermally induced phase separation protocols. Journal of the mechanical behavior of biomedical materials. 17, 186-197 (2013).
- Oh, S. H., Kim, T. H., Il Im, G., Lee, J. H. Investigation of pore size effect on chondrogenic differentiation of adipose stem cells using a pore size gradient scaffold. Biomacromolecules. 11 (8), 1948-1955 (2010).
- Lin, L., Gao, H., Dong, Y. Bone regeneration using a freeze-dried 3D gradient-structured scaffold incorporating OIC-A006-loaded PLGA microspheres based on β-TCP/PLGA. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 26 (1), 3 (2015).
- Yoo, D. Heterogeneous minimal surface porous scaffold design using the distance field and radial basis functions. Medical engineering & physics. 34 (5), 625-639 (2012).
- Soon, Y. -M., Shin, K. -H., Koh, Y. -H., Lee, J. -H., Choi, W. -Y., Kim, H. -E. Fabrication and compressive strength of porous hydroxyapatite scaffolds with a functionally graded core/shell structure. Journal of the European Ceramic Society. 31 (1-2), 13-18 (2011).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., Botta, L., Maio, A. Mechanical behavior of Polylactic acid/Polycaprolactone porous layered functional composites. Composites Part B: Engineering. 98, 70-77 (2016).
- Halili, A. N., Hasirci, N., Hasirci, V. A multilayer tissue engineered meniscus substitute. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 25 (4), 1195-1209 (2014).
- Bai, H., Wang, D., et al. Biomimetic gradient scaffold from ice-templating for self-seeding of cells with capillary effect. Acta Biomaterialia. 20, 113-119 (2015).
- Algul, D., Sipahi, H., Aydin, A., Kelleci, F., Ozdatli, S., Yener, F. G. Biocompatibility of biomimetic multilayered alginate-chitosan/β-TCP scaffold for osteochondral tissue. International Journal of Biological Macromolecules. 79, 363-369 (2015).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., Botta, L., Rigogliuso, S., Ghersi, G. Preparation of three-layered porous PLA/PEG scaffold relationship between morphology , mechanical behavior and cell permeability. Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials. 54, 8-20 (2016).
- Lo Re, G., Lopresti, F., Petrucci, G., Scaffaro, R. A facile method to determine pore size distribution in porous scaffold by using image processing. Micron. 76, 37-45 (2015).
- Levingstone, T. J., Matsiko, A., Dickson, G. R., O'Brien, F. J., Gleeson, J. P. A biomimetic multi-layered collagen-based scaffold for osteochondral repair. Acta Biomaterialia. 10 (5), 1996-2004 (2014).
- Scaffaro, R., Botta, L., Maio, A., Mistretta, M. C., La Mantia, F. P. Effect of Graphene Nanoplatelets on the Physical and Antimicrobial Properties of Biopolymer-Based Nanocomposites. Materials. 9 (5), 351 (2016).
- Maio, A., Fucarino, R., Khatibi, R., Rosselli, S., Bruno, M., Scaffaro, R. A novel approach to prevent graphene oxide re-aggregation during the melt compounding with polymers. Composites Science and Technology. 119, 131-137 (2015).
- Maio, A., Agnello, S., et al. A rapid and eco-friendly route to synthesize graphene-doped silica nanohybrids. Journal of Alloys and Compounds. 664, 428-438 (2015).
- Maio, A., Giallombardo, D., Scaffaro, R., Piccionello, A. P., Pibiri, I. Synthesis of a fluorinated graphene oxide-silica nanohybrid: improving oxygen affinity. RSC Advances. 6 (52), 46037-46047 (2016).
