Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Yağ dokusundan elde edilen Stromal vasküler kesir için potansiyel kıkırdak rejenerasyon üreten klinik protokol

Published: September 29, 2018 doi: 10.3791/58363
Automatic Translation
*1, *1,2, 1, 2, 2, 2, 2
1Mipro Medical Clinic, 2National Leading Research Laboratory, Department of Biological Sciences, Myongji University
* These authors contributed equally

Summary

Burada, bir Yağ dokusundan elde edilen stromal vasküler fraksiyonu ve osteoartrit olan insan hastalarda kıkırdak benzeri doku Yenileyici tarafından diz işlevlerini geliştirmek için uygulama üretmek için bir protokol mevcut.

Abstract

Osteoartrit (OA) en yaygın zayıflatıcı bozuklukları biridir. Son zamanlarda, sayısız girişimde mezenkimal kök hücrelerin (MSCs) farklı formları kullanarak diz fonksiyonlarını geliştirmek için yapılmıştır. Kore, kemik iliği konsantreleri ve kordon kan kaynaklı kök hücre Kore Gıda ve ilaç yönetimi (KFDA) tarafından kıkırdak rejenerasyon için onaylanmıştır. Buna ek olarak, bir Yağ dokusundan elde edilen stromal vasküler fraksiyonu (SVF) tarafından KFDA insan hastalarda eklem enjeksiyonları için izin. Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF yanı sıra mezenkimal kök hücre hücre dışı matriks (ECM) içerir. ECM, hyaluronik asit (HA) ve trombosit açısından zengin plazma kalsiyum klorür karışımından aktif (PRP) ile birlikte MSCs kıkırdak yeniden ve diz işlevlerini geliştirmek için yardımcı olabilecek çeşitli sitokinlerin excretes. Bu makalede, biz OA insan hastalarda kıkırdak benzeri doku Yenileyici tarafından diz işlevlerini geliştirmek için bir protokol sundu. Protokol sonucu ilk birkaç ek yayınları tarafından takip 2011 yılında bildirildi. Protokol collagenase ile karışık otolog lipoaspirates elde etmek için liposuction içerir. Bu lipoaspirates-collagenase karışımı daha sonra kesme ve iğne kadar enjeksiyon sırasında yapışmasına neden büyük fibröz doku kaldırmak için homojenize. Daha sonra karışımı Yağ dokusundan elde edilen SVF elde etmek için inkübe. Hem Yağ dokusundan elde edilen MSCs ve ECM, kalıntıları içeren elde edilen Yağ dokusundan elde edilen SVF diz HA ile birlikte hastaların içine enjekte edilir ve kalsiyum klorür PRP harekete geçirmek. Diz ağrısı, şişkinlik ve MRI kanıt hiyalin kıkırdak benzeri doku birlikte hareket aralığını iyileştirme sonuçlanan bizim protokolü ile tedavi edilen hastaların üç kasa bulunmaktadır.

Introduction

Mezenkimal kök hücre (MSCs) kıkırdak1,2,3,4,5,6yeniden yeteneğine sahip olduğu bilinmektedir. Onlar kolayca çeşitli kaynaklardan elde edilebilir: kemik iliği, kordon kanı ve yağ dokusu diğerleri arasında. Bu kaynaklar arasında yağ dokusu nerede MSCs yeterli sayıda klinik ayarları7,8kıkırdak yeniden oluşturmak için herhangi bir kültür genişleme olmadan elde edilebilir tek kaynağıdır. Otolog Kemik iliği stromal vasküler kesir (SVF) kolayca de elde edilebilir. Ancak, kök hücre kültürü olmayan genişletilmiş iliğinde bulunan çok düşük7,8sayısıdır. Kordon kanı MSCs yeterli sayıda içerebilir. Ancak, kordon kanı otolog SVF hazır bir kaynak değildir.

İşleme yağ dokusu SVF elde etmek için birçok yöntem klinik uygulamaları için uygundur. Bunlar MSCs collagenase, kullanarak Yağ dokusundan elde etme yöntemi arasında geliştirilen ve Zuk vd tarafından onaylandı 5 , 6, çok iyi kabul edilir. Collagenase kullanarak bu yöntem ortopedi klinik uygulamalar için değiştirildi. Klinik ayarları için uygulanması için sistemi kolaylık tutarken kısırlık korumak için kapalı bir sistem olması gerekir. Bu makalede sunulan bir belirli değişiklik lipoaspirates homojenizasyon içerir. Küçük ölçekli lipoaspirates nispeten yağ dokusu düzensiz dağılımı sonuçlanan büyük olanlar daha hızlı sindirilir. Ayrıca, bu daha büyük ölçekli lipoaspirates eklem enjeksiyonları9,10gerçekleştirirken yapışmasına neden olabilir şırınga ve iğne kadar fibröz doku üretebilir. Bu sorunları önlemek için lipoaspirates tarafından kesim ve lipoaspirates collagenase ile kuluçka önce kıyma homojenize. Elde edilen Yağ dokusundan elde edilen SVF homojenize11olmayan lipoaspirates göre daha düzgün hücre dışı matriks (ECM) içerebilir. SVF içinde bulunan kırık dökük ECM iskele12olarak çalışabilir.

2009 yılında, Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF Kore Gıda ve ilaç yönetimi (KFDA) en az işlemi olan bir tıbbi tesis içinde bir hekim13tarafından işlendiğinen tarafından izin verilmiş. Daha sonra Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF potansiyel olarak kıkırdak benzeri doku10,14,15 Yenileyici tarafından Osteoartrit (OA) hastalarda diz işlevlerini geliştirmek için potansiyel bir aracı olarak kullanılmaktadır , 16 , 17 , 18 .

2011 yılında Pak ilk kez Yağ dokusundan elde edilen kök hücreler (ASCs) Yağ dokusundan elde edilen SVF bulunan potansiyel olarak trombosit açısından zengin ile enjekte edildiğinde insan OA hastalarda kıkırdak benzeri doku Yenileyici diz işlevlerini artırabilir gösterdi plazma (PRP) 14. Buna ek olarak, Pak et al. 2013 maddelerle ilgili 91 hastalarda güvenlik veri bildirdin. Bu Emanet verilerde bildirilen kaba etkinliği oranı % 67'si15oldu. Daha sonra bir menisküs gözyaşı chondromalacia patellae10,ve16,17 olan hastalarda kıkırdak benzeri doku yenilenmesi nedeniyle potansiyel olarak geliştirilmiş diz işlevleri Pak et al. tarafından ek çalışmalar gösterdi ,18. Rapor makaleler göre bu kök hücreleri 100 gr yağ dokusu Bu makalede sunulan protokolü tarafından işlenen yer alan 1.000.000-40.000.000 bağlı olarak hastaların özellikleri8, arasında değişen bilinmektedir 19 , 20 , 21 , 22 , 23.

Burada, bir klinik protokol insan diz OA HA ve kalsiyum klorür ile aktive PRP ile Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF kullanarak mevcut. Kısırlık, korumak için kapalı, el ile bir sistem içeren bu klinik protokolünün ilk sürümünü 201114' te bildirildi. Aynı protokol optimize edildi, kısırlık, bakımı ve 2013 ve 201610,15' olduğu bildirildi. Burada, en iyi duruma getirilmiş Protokolü sundu. Protokol şematik bakış Şekil 1' de sunulmuştur.

Figure 1
Şekil 1: protokol şematik bakış. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Onay ve olgu sunumları takiben rapor için kullanıcıdan Myongji Üniversitesi Kurumsal değerlendirme komitesi Komitesi (MJUIRB) tarafından feragat. Daha fazla, bu klinik protokol KFDA Helsinki Bildirgesi ve düzenleme yönergeleri ile uyumlu oldu. Yordamlar için Hastalardan bilgilendirilmiş izinlerin elde edilmiştir.

1. liposuction

Not: steril tekniği ile gerçekleştirin.

  1. Aşağıdaki dahil ölçütleri kullanın: evre 3 (1) MRG kanıtı OA; (2) ya erkek veya kadın; (3) 18 yaşını doldurmuş; (4) yeterli (100-110 g) yağ dokusu liposuction için; (5) isteksizlik cerrahi müdahale ile devam etmek için; (6) muhafazakar yönetimi yetersizliği; ve (7) devam eden devre dışı bırakma ağrı.
  2. Aşağıdaki dışlama ölçütleri kullanın: (1) etkin enflamatuar veya bağ dokusu hastalığı düşündüm etkisi ağrı durumu (Yani,lupus romatoid artrit, fibromiyalji); (2) ağrı durumu (Yani, hipotiroidi, diyabet); etkisi olabilir aktif endokrin bozukluğu (3) ağrı durumu (Yani, periferik nöropati, multipl skleroz); etkileyebilir etkin nörolojik bozukluk (4) aktif akciğer hastalığı ilaç kullanımı gerektiren; ve (5) steroid eklem enjeksiyonları son 3 ay öyküsü.
  3. Ameliyathane biohazard sınıf A kukuleta ile hasta getirmek ve onu (ya da onu) sırtüstü pozisyonda yerleştirin.
  4. %5 betadin (povidone-iyot) ile hastanın karın bölgesi temiz ve karın liposuction için temizlenmiş alanı açığa steril tekniği kullanılarak hastanın asmak.
  5. Yaklaşık 5 cm infero yanal abdomenden anestezi kesi to-be-%2 lidokain adrenalin olmadan 2 mL 5 mL şırınga (25 ölçer, 1½ inç) iğne ile kullanılarak yapılan iki site (sol ve diğer abdomenden sağ tarafında bir) her site epidermal düzeyde enjekte edilerek.
  6. Kesi to-be-5 mL şişen çözeltisi (%2 lidokain, % 0.5 bupivacaine, 1: 1000 adrenalin 0,5 mL 20 mL normal salin, 40 mL, 500 mL) bir 10 mL şırınga bir iğneyle (25 ölçer, 1½ inç) kullanılarak yapılan sitenin anestezi.
  7. 0.5 cm yaklaşık 5 cm abdomenden aşağıda 2 insizyon yanal subkutan düzey derinliği yükseltmek için cilt pinching tarafından olun.
  8. No 11 bıçak kullanarak, yükseltilmiş deri yoluyla subkutan seviyeye nüfuz ama karın duvarı nüfuz değil poke.
  9. 20 cm 16 lik kanül kullanarak, e-be-liposuctioned, bütün alt karın alanı subkutan düzeyi 700-800 mL şişen çözeltisi ile anestezi.
  10. Sonra bütün alt karin şişen çözümle infiltrasyonu bitirme bağlı bir 3,0 mm kanül bağlanarak hazırlamak liposuction cihazları 60 mL (ya da bir 30 mL) şırınga el ile liposuction veya bağlı bir özel olarak tasarlanmış 3.0 mm kanül için bir Santrifüj kiti, kısırlık, tutmak amacıyla kapalı sistem şırınga için Vakum Yardımlı liposuction vakum makinesine bağlı.
  11. 100-110 g yağ doku şişen çözüm hariç olmak üzere elde etmek için liposuction gerçekleştirin. Liposuction işlemi sırasında Yağ dokusundan ayrılmış ve kaldırılması şişen çözüm ile birlikte elde edilir.
  12. Şişen çözüm ayırmak için ilk yerçekimi tarafından 60 mL şırınga yağ dokusu santrifüj seti transfer ve şırınga (şırınga altındaki alandıryani ) aşağı yerleştirin. 5-6 dk bekleyerek, yağ dokusu ve şişen sıvı ayrılacaktır. Sıvı şırınga dibinde şırınga pistonu üst kısmı basarak kaldırın.
  13. Birikmiş yağ dokusu diz (lipoaspirates) 100-110 g toplam kadar 1.9-1,11 yukarıdaki adımları uygulayın.

2. steril kapalı sistem ile ASC/ECM karışımı hazırlanması

  1. Ayıran sonra yerçekimi ve lipoaspirates her 60 mL santrifüj kit, steril kapalı bir sistem, başına 50-55 g biriken şişen çözüm yer bir santrifüj konteyner kova ve 1600 x g 5 min, yoğuşmalı için spin içine 2 santrifüj kitleri lipoaspirates ve sıvı yağ dokusundan ayırmak. Bu süreci daha da yoğunlaşır, lipoaspirates bazı durumlarda yağ yağ üretebilir.
  2. Salla, güvenlik kapağı ve alt santrifüj kitinin fiş kaldırmak için dikkatli olmak.
  3. Alt sıvı yavaş yavaş aşağı santrifüj kiti pistonu üstüne bastırarak çıkarın.
  4. Ayrı 60 mL şırınga üzerinde collagenase (5 mg collagenase bağ dokusu24 için belirli) ve collagenase yağ dokusu25için belirli 5 mg 10 mg 50 mL normal salin ile geçiyoruz.
  5. Yoğun lipoaspirate yaklaşık 25-30 mL çözünmüş collagenase (5 mg collagenase bağ dokusu için belirli) ve 5 mg collagenase yağ dokusu için belirli bir oranında 1:1 (v: v) kullanarak bir santrifüj teçhizat-e doğru 60 mL şırınga bağlanarak karıştırın özel bir bağlayıcı.
  6. İyice yoğun lipoaspirate ve collagenase içeriği 60 mL şırınga ve santrifüj setleri arasında bir çubuk veya bir itici kullanarak iterek karıştırın.
  7. Lipoaspirate ve collagenase karışımı 60 mL şırınga geri aktarın.
  8. Bıçaklar içeren bir doku homogenizer ile karışımı içeren her 60 mL şırınga bağlayın.
  9. Bir boş 60 mL şırınga homogenizer diğer ucunu bağlayın.
  10. 4 -6 kez için diğer 60 mL şırınga ile homogenizer karışımı itmeye kesme ve lipoaspirate kıyma ile sonuçlanan.
  11. Homojenize lipoaspirate ve collagenase karışımı geri 60 mL santrifüj kitleri özel bir bağlayıcıyla transfer
  12. Santrifüj kitleri 37 ° C'de önceden ısıtılmış olmuştur bir kuluçka yerleştirilmesi için bir kapsayıcı yerleştirin
  13. İki santrifüj kitleri 40 dk 37 ° C'de homojen karışımı ile 45 rpm'de dönen kuluçkaya.
  14. Kuluçka 40 dk sonra da kuluçka makinesine steril bir moda konteyner kaldırın. O zaman, santrifüj kitleri kaldırın ve yer onları içinde bir santrifüj makinesi.
  15. Karışımlar vasıl 800 x g Yağ dokusundan elde edilen SVF ayırmak 5 dk santrifüj kapasitesi.
  16. Santrifüj sonra (hangi collagenase içerir ve yağ dokusu sindirmek) süpernatant her santrifüj kitleri şırınga başlığını pistonu üstünde kaldırma ve üzerinden şırınga kilit açma dalgıç bir 30 mL şırınga yerleştirerek kaldırmak bağlantı.
  17. Yavaş yavaş 30 mL şırınga 30 mL şırınga doldurmak süpernatant için varil parçası aşağı tuşuna basın.
  18. 30 mL şırınga namludan sadece son 3-4 mL Yağ dokusundan elde edilen SVF bırakarak santrifüj kit alt son 3-4 mL kadar basın. Süpernatant atılır.
  19. 30 mL şırınga pistonu en baştan çıkarmak ve %5 Dekstroz lactated zil'ın çözüm (D5LR) ile şırıngaya doldur.
  20. Açılış pistonu üst kısmında D5LR ile dolu 30 mL şırınga ekleyerek, D5LR ile Yağ dokusundan elde edilen SVF 3-4 mL içeren santrifüj kitleri doldurmak kadar 55 mL.
  21. 30 mL şırınga kaldırmak, pistonu kap ve 300 x g 4 dk santrifüj kitleri tekrar santrifüj kapasitesi.
  22. 2.17-2.21 toplam 4 yıkama makinaları için yineleyin. Kullanılan collagenase xenogenic. Bu nedenle, çoğu collagenase 4 yıkama tarafından kaldırılır. Her ne kadar collagenase artıkları geçerli miktarı herhangi bir klinik var mı hastalar için önemsiz olabilir ancak, FDA onayı için protokolü ile ince ayar collagenase artıkları son hacim içinde tamamen kaldırmak gerekli olabilir yan etkileri.
  23. 4th Santrifüjü sonra enjeksiyon için son SVF elde etmek için güvenlik kapağı ve alt açıklıklı santrifüj kitinin fişini sallayarak veya santrifüj kiti dönerek kaldırın.
  24. Özel olarak tasarlanmış bir bağlayıcı kullanarak açılış santrifüj kit alt 20 mL şırınga iliştirin.
  25. Santrifüj seti altta yerleşmiş hücreleri sarsmak için birkaç kez ileri geri şırınga pompayı çek.
  26. Kaldırmak istediğiniz diğer hücre ve doku ile birlikte ASCs ve ECM içeren SVF hacmi (genellikle diz eklem enjeksiyonları için her santrifüj Takımı'ndan yaklaşık 3-4 mL).

3. PRP hazırlık steril tekniği ile

  1. ASCs ve ECM hazırlarken, otolog kan 30 mL 2.5 mL antikoagülan sitrat dekstroz çözeltisi ile çizin.
  2. Çizilmiş kan 60 mL santrifüj kitleri için transfer.
  3. 730 x g 5 min için çizilmiş kana santrifüj kapasitesi ve süpernatant yeni bir 60 mL santrifüj kiti kaldırın. 1300 x g 4 dk, 3-4 mL PRP sonuçlanan için de süpernatant santrifüj kapasitesi.
  4. Şu enjeksiyon önce 10:2 oranında % 3 (w/v) Kalsiyum klorür ekleyin (PRP: Kalsiyum klorür, v: v) etkinleştirmek için PRP için.
  5. %0,5 (w/v) HA, bir iskele olarak kalsiyum klorür ile aktive PRP ekleyin. Bu ASCs ile birlikte PRP, ECM ile kalsiyum klorür tarafından aktive ve HA stand için ASC/ECM karışımı.

4. ASC/ECM karışımı dayalı tedavi

  1. Hasta % 5 betadin ile diz temiz ve steril bir şekilde asmak.
  2. Anterior tibial ve femur kemikleri arasında ortak alanı için dizde muayene et.
  3. Deri dışında ek kapsül sadece yüzeysel olarak seyreltilmiş lidokain (4 mL normal salin ile seyreltilmiş %1 lidokain 1 mL) ile enjeksiyon izi anestezi.
  4. Seyreltilmiş ropivacaine (normal salin ile 3 mL sulandırılmış 1 mL % 0.75 ropivacaine) ile ek kapsül içine anestezi.
  5. Mix 2 mL şırınga şırınga bağlayıcı üzerinden 20 mL şırınga bulunan SVF 6-8 ml ha.
  6. Bir şırınga şırınga bağlayıcı kullanarak, 0.4 mL kalsiyum klorür otolog zaten hazırlanan PRP ve bir 5 mL şırınga hazır 3-4 mL ekleyin.
  7. 8-10 mL şırınga şırınga bağlayıcı üzerinden 20 mL şırınga HA/SVF karışımı ile 3.5-4.5 mL 5 mL şırınga PRP/kalsiyum klorür birleştirir.
  8. Hemen (yaklaşık 12-15 mL) karışımı yavaş yavaş 38 mm 18'lik iğne ile veya ultrason rehberliği olmadan kullanarak diz ön tibio-femoral eklem içine enjekte.
  9. Sonra enjeksiyon, enjeksiyon yeri basınç ile 4 x 4 pamuk gazlı bez 4 kez katlanır ve kasetleri katlanmış 4 x 4 gazlı bez yerleştirerek bandaj.
  10. Hasta hücre eki için izin vermek 60 dk için hala kalır için talimat.
  11. Hastanın aktiviteleri için sınırlamak için talimat minimum 1 hafta sonra klinik deşarj.
  12. Kalsiyum klorür tarafından 3 hafta içinde aktif PRP üç ek enjeksiyonu için klinik dönün.

5. tedavi sonrası takip

  1. 2, 4 ve 16 (18 ve 22) hafta ağrı iyileşme açısından görsel analog ölçek (VAS) ve fizik tedavi parametreleri açısından işlevi geliştirme için hasta değerlendirmek. İşlev değerlendirmesi dizin (Cuma), VAS ve sıra-in devinim (ROM) yukarıda açıklanan26,27belirleyin.
  2. Hasta tedavi sonrası MRI 3 ay tedaviden sonra izleyin.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

3 hasta (87 yaşında kadın ile sahne 3 OA, bir 68 yaşındaki erkek ile birinci aşama 3 OA ve bir 60-year-old kadınla sahne 3 OA) tıbbi geçmiş kalıcı diz ağrısı klinik için sunulan ve istenen herhangi bir önemli geçmiş potansiyel için olmadan Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF tedavi. Tüm üç hasta ortopedik cerrah tarafından muayene onların diz vardı ve total diz değiştirme (TKR) için teklif edildi ve ameliyat olmak istekli değildi. Önce yordamı, steroidler ve HA birden çok enjeksiyonlari herhangi bir uzun süreli iyileşme olmadan tüm üç hasta almıştı.

87 yaşındaki Koreli bayan hasta muayene, saatinde şiddetli ağrı şikayet (VAS skoru 8; Şekil 2A) süre kalan. O artan ağrı açıklanan ([FRI: 37; Şekil 2A) Merdivenleri inip yürürken. Fiziksel sınav üzerinde hafif ortak azalmış ROM ve hassasiyet fleksiyon (Şekil 2B) ile şişme kaydetti. Ancak, hiçbir ligament gevşekliği takdir edilmiştir. McMurray'nın ve Apley'nın testleri negatif çıktı. Bir tedavi daha önce Mr deformasyon ve maserasyon ile birlikte azalan boyutu medial menisküs gösterdi. (Şekil 2C, 2E, 2 Gve 2I).

İkinci hasta, 68 yaşındaki Koreli erkek, şiddetli sol diz ağrısı şikayet (VAS skoru: 7; Şekil 3A) süre kalan. Ağrı (FRI: 33; Şekil 3A) Merdivenleri inip yürürken artan olarak tanımlanmıştır. Fiziksel sınav üzerinde hafif ortak şişme ile hafif şekil bozukluğu vardı. ROM (Şekil 3B) azalma. Ayrıca, hiçbir ligament gevşekliği takdir edilmiştir. McMurray'nın ve Apley'nın testleri negatif çıktı. Bir tedavi daha önce Mr ile birlikte azalan bir boyutu inceltme kıkırdak gösterdi ve medial menisküs önceki Menisektomi (Şekil 3 c, 3E, 3 Gve 3I) ikincil deforme. Hasta 3 OA var sahnelemek için tanısı kondu.

Üçüncü hasta, bir 60-year-old Koreli kadın da şiddetli ağrı bildirdi (VAS skoru: 8; Şekil 4A) dinleniyor. Ağrı (FRI: 36; Şekil 4A) yürürken artan olarak tanımlanmıştır. Hasta da hafif diz şişlik vardı ve ROM (Şekil 4B) düşmüştür. Hiçbir ligament gevşekliği takdir edilmiştir. McMurray'nın ve Apley'nın testleri negatif çıktı. Bir tedavi daha önce Mr boyutu medial menisküs deformasyon ve maserasyon ile azalmış ve vardı (Şekil 4 c, 4E, 4 Gve 4I) kıkırdak inceltme gösterdi.

Tedavi planı. Tüm üç temsilcisi hastalar steroidler, aspirin, non-steroid antienflamatuar ilaçlar (NSAİİ) ve Asya bitkisel ilaçlar en az 1 hafta önce yordamı alarak sınırlı. Çalışmalar görüntüleme MRG aldıktan sonra lipoaspirates elde edilen ve yukarıda başvurulan olarak işlenir. Daha sonra Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF içeren ASCs, ECM, HA ve otolog PRP kalsiyum klorür aktif diz gün 0 enjekte edildi. Liposakşın ve eklem enjeksiyonları nedeniyle hiçbir karışıklık oldu. Daha sonra hastaların kliniğe bir hafta, sonra 2 hafta ve ek enjeksiyonlari HA ve otolog PRP kalsiyum klorür ile aktive sonra 3 hafta içinde geri döndü.

Sonuç. ASC/ECM karışımı enjeksiyon ikinci hafta sonra geliştirilmiş 87 yaşındaki kadın hastanın ağrı ve ROM (Şekil 2A ve 2B). 16 haftalık, hastanın ağrı ve ROM belirgin bir biçimde iyileştirilmiş fazla % 70 oranında (Şekil 2A ve 2B). 16 hafta sonra alınan tedavi sonrası Mr hiyalin kıkırdak benzeri doku artan kalınlığı (Şekil 2B, 2F, 2 Hve 2J) diz medial tarafında gösterdi. Bir karşılaştırma, kaba etkinliği oranı %67 klinik bu iletişim kuralını kullanan, 91 hasta içeren ve 201315dakika içinde bildirilen veri oldu.

Figure 2
Resim 2: ağrı ölçümler sonucu (A) ve dizi hasta durum 1 hareket (B); ve MRI sagittal (C-F) ve koronal (G-J) sıralı T2 sayısı dizde. * istatistiksel olarak önemli bir bulgu (p < 0,05) gösterir. Ön arıtma MRI taramaları (C: sıralı resim, 5/20; E: 6/20; G: 10/20; ve ben: 11/20) kıkırdak lezyonlar (oklar) göster. Tedavi sonrası MRI taramaları 16 hafta (D: 6/20; F: 7/20; H: 10/20; ve J: 11/20) ASC/ECM karışımı dayalı tedavi tarafından tamir kıkırdak benzeri doku rejenerasyonu (ok ucu) gösterir. Bu rakam Pak et al. önceki rapordan değiştirildi 10. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

68 yaşında erkek hastanın ağrı ve ROM ASC/ECM karışımı enjeksiyon (Şekil 3A ve 3B) ikinci hafta sonra geliştirilmiş. 18inci hafta tarafından onun acı ve ROM önemli ölçüde daha fazla % 80 (Şekil 3A ve 3B) geliştirilmiş. 18 sonra çekilen Mr tekrarlananinci hafta yüksekliği hiyalin kıkırdak benzeri doku diz (şekil 3D, 3F, 3 H ve 3J) medial ön tarafında bir artış gösterdi.

Figure 3
Şekil 3 : Ağrı ölçümler sonucu (A) ve çeşitli hareket (B); ve MRI sagittal (C-F) ve koronal (G-J) sıralı T2 sayısı dizde hasta durum 2. * istatistiksel olarak önemli bir bulgu (p < 0,05) gösterir. Ön arıtma MRI taramaları (C: sıralı resim, 6/20; E: 7/20; G: 13/20; ve ben: 14/20) kıkırdak lezyonlar (oklar) göster. Tedavi sonrası MRI taramaları 16 hafta (D: 6/20; F: 7/20; H: 13/20; ve J: 14/20) ASC/ECM karışımı dayalı tedavi tarafından tamir kıkırdak benzeri doku rejenerasyonu (ok ucu) gösterir. Bu rakam Pak et al. önceki rapordan değiştirildi 10. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

60 yaşındaki kadın hastanın ağrı ve ROM yaklaşık % 50 ASC/ECM karışımı enjeksiyon, (Şekil 4A ve 4B) ikinci haftadan sonra geliştirilmiş. 22nd haftaya belgili tanımlık ağrı ve ROM önemli ölçüde üzerinde %80 (Şekil 4A ve 4B) geliştirmek. 22nd hafta sonra tekrarlanan MRI (Şekil 4 d, 4F, 4 Hve 4J) diz medial tarafındaki hiyalin kıkırdak benzeri doku yüksekliğini artış gösterdi.

Figure 4
Şekil 4 : Ağrı ölçümler sonucu (A) ve çeşitli hareket (B); ve MRI sagittal (C-F) ve koronal (G-J) sıralı T2 sayısı dizde hasta durum 3. * istatistiksel olarak önemli bir bulgu (p < 0,05) gösterir. Ön arıtma MRI taramaları (C: sıralı görüntü, 4/20; E: 5/20; G: 10/20; ve ben: 11/20) kıkırdak lezyonlar (oklar) göster. Tedavi sonrası MRI taramaları 16 hafta (D: 4/20; F: 5/20; H: 10/20; ve J: 11/20) ASC/ECM karışımı dayalı tedavi tarafından tamir kıkırdak benzeri doku rejenerasyonu (ok ucu) gösterir. Bu rakam Pak et al. önceki rapordan değiştirildi 10. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

2001 yılında Zuk ve ark. kollajen matris collagenase6ile aşağı kırarak Yağ dokusundan izole kök hücre. Daha sonra Grup, bu kök hücre kaynaklı mezenkimal kanıtlayan bu kök hücrelerin Yağ dokusundan izole kıkırdak ve mesoderm kökenli, diğer dokuların içine dönüştürebilir gösterdi.

Aynı şekilde, yordamın bu makalede sunulan benzer yöntem insan hastalara uygulamak için değiştirilmiş bir protokoldür. Protokol ana değişiklik elde etme ve lipoaspirates yordamı gerçekleştirmeniz kolaylığı koruyarak hava teması en aza indirmek için işleme kapalı sistem şırınga birleşme olduğunu. Böyle kapalı sistem şırınga kullanarak, yağ dokusu liposuction ile elde edildi. Sonra lipoaspirates collagenase içinde kapalı sistem şırınga ile karıştırıldı. Daha sonra collagenase collagenase konsantrasyon kapalı sistem şırıngalar içinde sulandrarak karışım kaldırıldı. İşlemi kolaylıkla elde edilen steril bir Yağ dokusundan elde edilen SVF sonucudur.

Benzer yöntem kullanarak, Pak 2011 yılında, ilk kez Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF potansiyel olarak kıkırdak benzeri doku Yenileyici tarafından OA tedavisinde kullanılabileceğini gösterdi. Daha sonra Pak ve ark. Ayrıca gösterdi o Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF menisküs gözyaşı ve patellae chondromalacia fibröz kıkırdak benzeri doku ve hiyalin kıkırdak benzeri dokusu, sırasıyla Yenileyici tarafından tedavi etmek için kullanılabilir. 2013, Pak ve ark. maddelerle ilgili 91 hasta Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF ile tedavi bir emanet çalışma bildirdi. Rapor çalışma kaba etkinliği % 67, Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF uygulama imkanı yol kaldırım kıkırdak ile genel olarak hasta nüfus zarar.

Bir Pak ve arktarafından bildirilen en sık görülen yan etkiler. 2013 yılında 1) kök hücre ölüm tarafından 2) iltihabı RBCs tarafından bulunan PRP açıklanabilir, tedavi sonrası diz eklem şişlik ve/veya Yağ dokusundan elde edilen SVF son hacim içinde kalmıştır 3) kalan collagenase Emanet çalışma oldu. Ondan beri MSCs içinde yağ dokusu11,12ECM var, kök hücre kiralamak için matris kırmak için collagenase ile lipoaspirates sindirerek zorunlu işlem12olur. Ancak, kök hücre serbest bırakmak için matris kırdıktan sonra kalan kalan collagenase tamamen son birimden arta kalan collagenase28tarafından üretilen herhangi bir potansiyel inflamasyon önlemek için kaldırılması gerekir. Collagenase iltihabı neden olabilir rağmen collagenase yağ dokusu kaynaklı SVF son hacminde bir önemsiz miktarda ortak bir şişlik tetikleyebilir değil. Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF collagenase önemsiz miktarda böyle son hacim güvenli bir şekilde son birkaç yıldır OA diz kıkırdak benzeri doku Yenileyici tarafından tedavi etmek için kullanılmıştır.

Yağ dokusundan elde edilen SVF elde etme iki non-enzimatik yöntem tanıttı29,30son zamanlarda. Bu yöntemler ya da mekanik kuvvet veya ultrason (titreşim) kuvvet, collagenase yerine kullanmak. 2018, D'Ambrosi ve ark. dört osteokondral lezyon mikro çatlak, saflaştırılmış Otolog yağ arıza29matris mekanik kuvvet kullanarak elde dokusu ile ayak bileği talus, tedavi sonucu bildirdi. Hiçbir collagenase matris kırmak için kullanıldı. Dört hasta mikro çatlak yağ dokusu ile (yani, mekanik olarak kırık dökük yağ dokusu), onların talus29için tedavi edildi. Bu dört hasta altı ay sonra yordamı klinik iyileşme gösterdi. Herhangi bir komplikasyon yoktu. Ancak, bu çalışmada29, kıkırdak potansiyel rejenerasyon rapor vardı. Başka bir çalışma titreşimsel enerji içeren bu yıl yayınlanan belirli frekans titreşimsel enerji kök hücre30yalıtmak için yeterli olmadığını gösterdi.

Yukarıda gösterildiği gibi farklı grupların çeşitli dejeneratif eklem hastalıkları tedavi etmek için bir Otolog yağ dokuları kullanmak için farklı iletişim kuralları vardır. Protokol liposuction, yağ dokusu kullanılan miktarı, türü ve miktarı collagenase (varsa), enjeksiyon ve benzeri Yöntem için kullanılan kanül boyutunu farklı. Ondan beri MSCs yağ dokusu ECM içinde var, collagenase veya mekanik Kuvvetleri, kullanarak arıtma yöntemi etkisini önemli bir rol oynayabilir. Özellikle, collagenase etkinliğini boyutu yağ dokusu, fazla yağ dokusu, collagenase, zaman ve sıcaklık, kuluçka collagenase ile konsantrasyon ve artık kaldırma işlemi gibi faktörlere bağlı olabilir collagenase, hücre hasarı28neden olabilir.

Bu Yağ dokusundan elde edilen SVF içeren kök hücre üretmek için bu yordamı önemli bir bileşeni olduğu gibi bu collagenase Yağ dokusundan elde edilen SVF son hacmi üzerinde olumsuz bir etkisi olabilir unutulmamalıdır. Bu yordam, collagenase yoğun lipoaspirates ile karışık, homojen, inkübe olup sonra yıkanmış. Bu süreç boyunca, kök hücre kök hücre28yaşama üzerinde zararlı bir etkisi olabilir collagenase maruz kalır. Çok fazla konsantrasyon ya da uzun süreli maruz kalma collagenase son cilt28kök hücre canlılığı düşürebilir. Collagenase ortak enjekte28kıkırdak matris kırmak bu yana daha fazla, çok fazla son hacim yaptı collagenase eklem iltihabı neden olabilir.

Olası olumsuz etkilerini collagenase ek olarak, diğer olası komplikasyonlar liposuction taşıyabilir. Yağ dokusundan elde edilen SVF elde etmek için liposuction önce gerçekleştirilmesi gerekir. Liposakşın, diğer tıbbi prosedürler olarak gerçekleştirme cilt dağılımı, seromas, enfeksiyon, delikli karın duvarı Nekroze edici fasiit, Yağ embolisi ve pulmoner emboli, usulsüzlük gibi birkaç olası komplikasyonlar taşır. Bu komplikasyonlar arasında cilt kontur usulsüzlük küçük kanüller ve yüzeysel liposakşın31,32kaçınarak kullanılarak kolayca önlenebilir çok yaygın bir yan etkisi vardır. Periton sıvısı içindeki suctioned alan topluluğu olan Seromas, aynı zamanda agresif liposuction33bir sonucu olabilir. Enfeksiyon, Nekroze edici fasiit, delikli karın duvarları, Yağ embolisi veya pulmoner emboli gibi diğer potansiyel komplikasyonlar mümkündür. Ancak, bu komplikasyonların da sıkı steril teknikleri kullanarak ve hasta uyumu34iyileştirilmesi önlenebilir.

Ayrıca, tüm üç hasta başlangıçta bir hafif ortak efüzyon, sinovit açık bir işareti ile sunulan çalışma dahil. Yağ dokusundan elde edilen SVF, bu hastaların ortak geliştirilmiş şişme ile tedavi sonrası. Bu nedenle, ayrıca klinik belirtiler geliştirilmesi mümkün kıkırdak rejenerasyon nedeniyle değil, ama bunun yerine, kök hücre ve/veya PRP düzenleyici ve anti-inflamatuar etkisi sinovyal membran35 üzerinde nedeniyle olduğunu varsaymak makul , 36. alternatif olarak, belirti iyileştirme kıkırdak benzeri doku mümkün rejenerasyon birlikte sinovyal membran üzerinde kök hücre ve/veya PRP düzenleyici ve anti-inflamatuar etkisi için katkıda. Daha fazla araştırma belirti gelişme gerçek mekanizması betimlemek için gerekli olsa da, hücre tedavisi otolog, şeklinde bu perkütan intra artiküler enjeksiyon homojenize Yağ dokusundan elde edilen SVF harekete geçirmek ile otolog PRP ile Kalsiyum klorür ve/veya HA mevcut strateji için alternatif tedavi tedavi diz OA sunabilir.

Otolog PRP yanı sıra gelince, PRP çeşitli büyüme faktörleri içerir ve MSCs büyümeye ve37,38,39ayırt etmek için farklılaştırıcı faktör enjekte yaygın olarak kabul edilen ilgilidir. PRP de etkisi40nötralize bir collagenase olmasını göstermiştir. Hyaluronik asit ilavesi ile ilgili (HA), HA kıkırdak doku, onun yüksek ilgi nedeniyle bir iskele malzeme olarak potansiyel bir rol ve kıkırdak matris41derinlemesine kök hücre yardımcı olmak için potansiyel bir rolü var olduğu gösterilmiştir.

Yağ dokusundan elde edilen SVF elde daha fazla yeni işlemleri kullanılabilir gibi bir optimizasyon bir yöntemin lipoaspirates işleme sürecini standartlaştırmak gereklidir. Ancak, bu alma ve otolog Yağ dokusundan elde edilen SVF işleme sürecinde olası varyasyon sayısı nedeniyle zor bir görev olabilir. Örneğin, yaşlanma veya obezite, derecesi nedeniyle bireysel her hastada subkutan yağ dokusu doku farklılıkları collagenase faaliyetleri, ASCs farklı sayıda Otolog yağ içinde sonuçlanan farklı yanıt olabilir SVF42doku kaynaklı. Buna ek olarak, her gram yağ dokuları kök hücre sayısı bir hastadan diğerine bildirilen kök hücre sayıları çok sayıda yayınlar7,19,20, büyük varyasyon tarafından gösterildiği gibi farklı olabilir 21 , 22 , 23.

Bu makalede sunulan bu protokolü potansiyel olarak kıkırdak benzeri doku otolog perkütan enjeksiyonu ile Yağ dokusundan elde edilen Yenileyici tarafından insan diz OA tedavi mevcut strateji geliştirmek çalışıyor bir roman, yenilikçi bir işlemdir SVF. Collagenase doğru kullanımı bu protokol önemli ve kritik bir adımdır. Kullanarak sistem şırınga yordamı gerçekleştirmeniz kolaylığı Bakımı Zuk ve arktarafından geliştirilen iletişim kuralı büyük değişiklik ise kısırlık tutmak için kapalı. 5 Ayrıca, insan uygulama için nihai Yağ dokusundan elde edilen SVF içinde bulunan collagenase kalıntı miktarı herhangi bir eklem iltihabı engellemek önemsiz olmalıdır. Bu protokol sınırlamalar vardır: son hacim collagenase kalıntılarında (Bu ihmal edilebilir olsa da), hayır kontrol tek başına PRP ve HA, hiçbir biyopsi PRP, küçük nedeniyle klinik belirtiler geliştirilmesi hariç hiçbir kanıt enjekte grupları hasta (pilot çalışma), Yağ dokusundan elde edilen SVF yoktur hiçbir bileşen ve kök hücre her birinde 3 hasta sayısı hiçbir tayini sayısı. Yağ dokusundan elde edilen SVF menisküs gözyaşı, chondromalacia patellae, spinal disk bozuklukları gibi bozukluklar için uygulama, bir Gecikmeli şifa (veya olmayan-şifa) kemik kırığı, deri ülseri-şifa, meme yeniden ve diğer tıbbi bozukluklar olabilir klinik sonuçlar geliştirin. Bunlar Yağ dokusundan elde edilen SVF potansiyel klinik uygulamalar olmakla birlikte, daha ayrıntılı ve dinç klinik araştırmalar Yağ dokusundan elde edilen SVF gerçek klinik ayarları birleşmeyle için gereklidir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar ifşa gerek yok.

Acknowledgments

Yazar, Mipro tıbbi klinik ve Jaepil/David Lee tarafından şekil tasarım personelinden destek kabul eder. Bu eser araştırma hibe biyo & Tıbbi teknoloji geliştirme programı (sayı NMG-2017M3A9E4078014); MSIT tarafından finanse edilen NMG tarafından desteklenmiştir ve Ulusal Araştırma Vakfı, Kore (ICT (numaraları NMG-2017R1A2B4002315 ve NATO Mukabele Gücü-2016R1C1B2010308) ve Bilim Bakanlığı tarafından finanse edilen NMG).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Material
5% Betadine (povidone-iodine)  Firson Co., Ltd. 657400260
2% Lidocaine  Daehan Pharmaceutical Co. 670603480
Tumescent solution  Myungmoon Pharm. Co. Ltd. N01BB01 The solution was composed of 500 mL normal saline, 40 mL 2% lidocaine, 20 mL 0.5% marcaine, and 0.5 mL epinephrine 1:1000.
Liberase TL and TM research grade  Roche Applied Science 5401020001
D5LR Dahan Pharm. Co., Ltd. 645101072 Dextrose 5% in lactated Ringer's solution 
Anticoagulant citrate dextrose solution  Fenwal, Inc. NDC:0942-0641 The solution was composed of 0.8% citric acid,
0.22% sodium citrate, and 0.223% dextrose.
3% (w/v) Calcium chloride  Choongwae Pharmaceutical Co. 644902101
0.5% (w/v) HA (Hyaluronic acid ) Dongkwang pharm. Co., Ltd. 645902030
0.25% Ropivacaine Huons Co., Ltd. 670600150
Equipment
3.0 mm Cannula  WOOJU Medical Instruments Co. ML30200
60-mL Luer-Lock syringe BD (Becton Dickinson)  309653
Centrifuge Barrel Kit  CPL Co., Ltd. 30-0827044
Tissue homogenizer that contains blades CPL Co., Ltd. 30-0827045
Rotating incubator mixer Medikan Co., Ltd MS02060092
Centrifuge Hanil Scientific Inc. CE1133
Magnetic Resonance Imaging Philips Medical Systems Inc. 18068
Ultrasound Imaging System Samsung Medison co., Ltd CT-LK-V10-ICM-09.05.2007

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Arnoczky, S. P. Building a meniscus. Biologic considerations. Clinical Orthopaedics and Related Research. (367 Suppl), S244-S253 (1999).
  2. Barry, F. P. Mesenchymal stem cell therapy in joint disease. Novartis Foundation Symposium. 249, 86-241 (2003).
  3. Usuelli, F. G., et al. Adipose-derived stem cells in orthopaedic pathologies. British Medical Bulletin. 124 (1), 31-54 (2017).
  4. Zhang, H. N., Li, L., Leng, P., Wang, Y. Z., Lv, C. Y. Uninduced adipose-derived stem cells repair the defect of full-thickness hyaline cartilage. Chinese Journal of Traumatology. 12 (2), 92-97 (2009).
  5. Zuk, P. A., et al. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Molecular Biology of the Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).
  6. Zuk, P. A., et al. Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies. Tissue Engineering. 7 (2), 211-228 (2001).
  7. Baer, P. C., Geiger, H. Adipose-derived mesenchymal stromal/stem cells: tissue localization, characterization, and heterogeneity. Stem Cells International. 2012, 812693 (2012).
  8. Zhu, Y., et al. Adipose-derived stem cell: a better stem cell than BMSC. Cell Biochemistry and Function. 26 (6), 664-675 (2008).
  9. Bellei, B., Migliano, E., Tedesco, M., Caputo, S., Picardo, M. Maximizing non-enzymatic methods for harvesting adipose-derived stem from lipoaspirate: technical considerations and clinical implications for regenerative surgery. Scientific Reports. 7 (1), 10015 (2017).
  10. Pak, J., Lee, J. H., Park, K. S., Jeong, B. C., Lee, S. H. Regeneration of Cartilage in Human Knee Osteoarthritis with Autologous Adipose Tissue-Derived Stem Cells and Autologous Extracellular Matrix. BioResearch Open Access. 5 (1), 192-200 (2016).
  11. Alexander, R. W. Understanding Adipose-derived Stromal Vascular Fraction (AD-SVF) Cell Biology and Use on the Basis of Cellular, Chemical, Structural and Paracrine Components: A Concise Review. Journal of Prolotherapy. 4, e855-e869 (2012).
  12. Benders, K. E., et al. Extracellular matrix scaffolds for cartilage and bone regeneration. Trends in Biotechnology. 31 (3), 169-176 (2013).
  13. Korean Food and Drug Administration (KFDA). Cell therapy: Rules and Regulations. KFDA. , (2009).
  14. Pak, J. Regeneration of human bones in hip osteonecrosis and human cartilage in knee osteoarthritis with autologous adipose-tissue-derived stem cells: a case series. Journal of Medical Case Reports. 5, 296 (2011).
  15. Pak, J., Chang, J. J., Lee, J. H., Lee, S. H. Safety reporting on implantation of autologous adipose tissue-derived stem cells with platelet-rich plasma into human articular joints. BMC Musculoskeletal Disorders. 14, 337 (2013).
  16. Pak, J., Lee, J. H., Kartolo, W. A., Lee, S. H. Cartilage Regeneration in Human with Adipose Tissue-Derived Stem Cells: Current Status in Clinical Implications. BioMed Research International. 2016, 4702674 (2016).
  17. Pak, J., Lee, J. H., Lee, S. H. A novel biological approach to treat chondromalacia patellae. PLoS One. 8 (5), e64569 (2013).
  18. Pak, J., Lee, J. H., Lee, S. H. Regenerative repair of damaged meniscus with autologous adipose tissue-derived stem cells. BioMed Research International. 2014, 436029 (2014).
  19. Aust, L., et al. Yield of human adipose-derived adult stem cells from liposuction aspirates. Cytotherapy. 6 (1), 7-14 (2004).
  20. De Ugarte, D. A., et al. Comparison of multi-lineage cells from human adipose tissue and bone marrow. Cells Tissues Organs. 174 (3), 101-109 (2003).
  21. Guilak, F., et al. Clonal analysis of the differentiation potential of human adipose-derived adult stem cells. Journal of Cellular Physiology. 206 (1), 229-237 (2006).
  22. Mitchell, J. B., et al. Immunophenotype of human adipose-derived cells: temporal changes in stromal-associated and stem cell-associated markers. Stem Cells. 24 (2), 376-385 (2006).
  23. Oedayrajsingh-Varma, M. J., et al. Adipose tissue-derived mesenchymal stem cell yield and growth characteristics are affected by the tissue-harvesting procedure. Cytotherapy. 8 (2), 166-177 (2006).
  24. Liberase TL information available from Sigma Millipore online. , https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/05401020001?lang=en®ion=US (2018).
  25. Liberase TM information available from Sigma Millipore online. , https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/Libtmro?lang=en®ion=US (2018).
  26. Childs, J. D., Piva, S. R. Psychometric properties of the functional rating index in patients with low back pain. European Spine Journal. 14 (10), 1008-1012 (2005).
  27. Price, D. D., McGrath, P. A., Rafii, A., Buckingham, B. The validation of visual analogue scales as ratio scale measures for chronic and experimental pain. Pain. 17 (1), 45-56 (1983).
  28. Pilgaard, L., Lund, P., Rasmussen, J. G., Fink, T., Zachar, V. Comparative analysis of highly defined proteases for the isolation of adipose tissue-derived stem cells. Regenerative Medicine. 3 (5), 705-715 (2008).
  29. D'Ambrosi, R., Indino, C., Maccario, C., Manzi, L., Usuelli, F. G. Autologous Microfractured and Purified Adipose Tissue for Arthroscopic Management of Osteochondral Lesions of the Talus. Journal of Visualized Experiments. (131), e56395 (2018).
  30. Packer, J. D., Chang, W. T., Dragoo, J. L. The use of vibrational energy to isolate adipose-derived stem cells. Plastic Reconstructive Surgery-Global Open. 6 (1), e1620 (2018).
  31. Hanke, C. W., Bernstein, G., Bullock, S. Safety of tumescent liposuction in 15,336 patients. National survey results. Dermatologic Surgery. 21 (5), 459-462 (1995).
  32. Illouz, Y. G. Complications of liposuction. Clinics in Plastic Surgery. 33 (1), 129-163 (2006).
  33. Dixit, V. V., Wagh, M. S. Unfavourable outcomes of liposuction and their management. Indian Journal of Plastic Surgery. 46 (2), 377-392 (2013).
  34. Lehnhardt, M., et al. Major and lethal complications of liposuction: a review of 72 cases in Germany between 1998 and 2002. Plastic and Reconstructive Surgery. 121 (6), 396e-403e (2008).
  35. Iyer, S. S., Rojas, M. Anti-inflammatory effects of mesenchymal stem cells: novel concept for future therapies. Expert Opinion on Biological Therapy. 8 (5), 569-581 (2008).
  36. Zhang, J., Middleton, K. K., Fu, F. H., Im, H. J., Wang, J. H. HGF mediates the anti-inflammatory effects of PRP on injured tendons. PLoS One. 8 (6), e67303 (2013).
  37. Li, N. Y., Yuan, R. T., Chen, T., Chen, L. Q., Jin, X. M. Effect of platelet-rich plasma and latissimus dorsi muscle flap on osteogenesis and vascularization of tissue-engineered bone in dogs. Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 67 (9), 1850-1858 (2009).
  38. Parsons, P., et al. The biological effect of platelet rich-plasma on the fracture healing process. The Journal of bone and joint surgery. British volume. 91-B, 293 (2009).
  39. Wu, W., Chen, F., Liu, Y., Ma, Q., Mao, T. Autologous injectable tissue-engineered cartilage by using platelet-rich plasma: experimental study in a rabbit model. Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 65 (10), 1951-1957 (2007).
  40. Cooper, T. W., Eisen, A. Z., Stricklin, G. P., Welgus, H. G. Platelet-derived collagenase inhibitor: characterization and subcellular localization. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 82 (9), 2779-2783 (1985).
  41. Uzuki, M., Sawai, T. A. A comparison of the affinity of sodium hyaluronate of various molecular weights for degenerated cartilage: a histochemical study using hyaluronic acid binding protein. International Congress Series. 1223, 279-284 (2001).
  42. Pagano, C., et al. Molecular and morphometric description of adipose tissue during weight changes: a quantitative tool for assessment of tissue texture. International Journal of Molecular Medicine. 14 (5), 897-902 (2004).

Tags

Tıp sayı: 139 tıp Yağ dokusundan elde edilen kök hücreler hücre dışı matriks insan kıkırdak rejenerasyon osteoartrit rejeneratif tıp mezenkimal kök hücre
Yağ dokusundan elde edilen Stromal vasküler kesir için potansiyel kıkırdak rejenerasyon üreten klinik protokol
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Pak, J., Lee, J. H., Pak, N. J.,… More

Pak, J., Lee, J. H., Pak, N. J., Park, K. S., Jeon, J. H., Jeong, B. C., Lee, S. H. Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration. J. Vis. Exp. (139), e58363, doi:10.3791/58363 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter