Summary
För att undersöka mus vision, genomförde vi ett hotande test. Möss placerades i en stor fyrkantig Arena med en bildskärm på taket. Den hotande visuella stimulansen konsekvent framkallat frysning eller flykt reaktioner hos möss.
Abstract
Det visuella systemet i centrala nerv systemet bearbetar olika visuella signaler. Även om den övergripande strukturen har karakteriserats från näthinnan genom den laterala geniculate kärnan till den visuella cortex, systemet är komplext. Cellulära och molekyl ära studier har genomförts för att belysa mekanismerna bakom Visuell bearbetning och, i förlängningen, sjukdomsmekanismer. Dessa studier kan bidra till utvecklingen av artificiella visuella system. För att validera resultaten av dessa studier, beteendemässiga vision testning är nödvändig. Här visar vi att den hotande stimulering experiment är en pålitlig mus vision test som kräver en relativt enkel installation. Det hotande experimentet genomfördes i en stor inhägnad med ett skydd i ett hörn och en dator skärm placerad i taket. En CCD-kamera placerad bredvid dator skärmen som serveras för att observera mus beteende. En mus placerades i höljet i 10 minuter och fick vänja sig vid och utforska omgivningarna. Sedan, bildskärmen projicerade ett program-derived hotande stimulans 10 gånger. Musen reagerade på stimuli antingen genom att frysa eller genom att fly till gömstället. Musens beteende före och efter de hotande stimuli spelades in, och videon analyserades med hjälp av rörelse spårnings program. Mus rörelsens hastighet förändrades markant efter de hotande stimuli. Däremot observerades ingen reaktion hos blinda möss. Våra resultat visar att den enkla hotande experiment är en pålitlig test av mus vision.
Introduction
Det visuella systemet börjar vid näthinnan, där visuella signaler fångas av foto receptorer, kanaliseras till bipolär celler (2nd-ordning neuroner), och slutligen skickas till ganglion celler (3RD-order nerv celler). Retinal 2nd-och 3RD-order neuroner tros bilda flera neurala vägar som förmedlar särskilda aspekter av visuell signalering såsom färg, rörelse, eller form. Dessa olika visuella egenskaper förmedlas till den laterala geniculate kärnan och den visuella cortex. I kontrast, visuella signaler som leder till ögonrörelser skickas till den överlägsna colliculus. Klassiskt, två retino-kortikal vägar har identifierats: den magnocellulära och parvocellulära vägar. Dessa vägar koda rörliga och Station ära objekt, respektive, och deras existens förkroppsligar den grundläggande begreppet parallell bearbetning1,2,3,4,5, och 6. Nyligen har mer än 15 typer av bipolära celler7,8,9,10,11 och ganglion celler12,13,14 ,15,16 har rapporter ATS i näthinnan av många arter, inklusive primat näthinnan. Dessa celler kännetecknas inte bara av morfologiska aspekter, utan också av uttrycket av distinkta markörer och gener8,10,17,18, vilket tyder på att olika egenskaper hos visuella signaler bearbetas parallellt, vilket är mer komplicerat än vad som ursprungligen förväntades.
Cellulär och molekylär teknik har bidragit till vår förståelse av visuell bearbetning och potentiella sjukdomsmekanismer som kan uppstå från avvikande Visuell bearbetning. En sådan förståelse kan bidra till utvecklingen av konstgjorda ögon. Även cellulära undersökningar och analyser erbjuder djupgående kunskap på cellulär nivå, en kombination av beteendemässiga experiment och cellulära experiment skulle avsevärt öka vår nuvarande förståelse för minut visuella processer. Till exempel, Yoshida et al.19 fann att starburst amakrina celler är de viktigaste neuronerna för rörelse detektering i musens näthinnan. Efter cellulära experiment, utförde de optokinetic nys tag mus (okn) beteendemässiga experiment för att visa att muterade möss där starburst amakrina celler var dysfunktionella inte svarar på rörliga objekt, vilket bekräftar deras cellulära Utredningar. Dessutom genomförde Pearson et al.20 foto receptor transplantation i musens näthinnan för att återställa synen hos sjuka möss. De genomförde inte bara cellulära experiment, men också mätt mus beteende genom användning av optomotor respons inspelningar och vatten-labyrint uppgifter vilket gör att Pearson et al. att kontrol lera att transplanterade foto receptorer återställas vision i den tidigare blinda Möss. Sammantaget beteende experiment är starka verktyg för att bedöma mus vision.
Det finns flera metoder för att mäta mus vision. Dessa metoder har fördelar och begränsningar. In vivo tillhandahåller ERG information om huruvida musens näthinna, särskilt foto receptorer och på bipolär celler, på lämpligt sätt reagerar på ljus stimuli. ERG kan provas antingen enligt normerat valens system eller fotopiskt villkor21,22. Dock kräver ERG anestesi, vilket kan påverka utgångs mätningen23. Den optokinetiska reflexen (OKR) eller optomotorresponsen (OMR) är en robust metod för att bedöma kontrast känslighet och rumslig upplösning, båda funktionella komponenter i mus seendet. OKR kräver dock kirurgi för att fästa en fixeringsenhet till muskallen24. OMR kräver varken kirurgi eller mus utbildning; men det kräver utbildning för att möjliggöra en experimenterare att subjektivt upptäcka subtila mus huvud rörelser som svar på en rörlig gallerdurk i en optisk trumma 25,26. Elev ljus reflex åtgärder elev sammandragning som svar på ljus stimuli, som inte kräver anestesi och uppvisar objektiva och robusta svar 19. Även om eleven reflex simulerar retinal ljus svar in vivo, reflex medieras främst av de inneboende ljus känsliga retinala ganglion celler (ipRGCs) 27. Eftersom ipRGCs representerar en liten minoritet av RGCs och inte fungerar som konventionella bildbildande ganglionceller, denna mätning ger inte information som hänför sig till de flesta ganglionceller.
Det hotande ljuset experiment har inte tidigare ansetts vara ett stort test för att mäta mus vision. Det är dock också en robust och pålitlig vision test över olika arter, såsom mus28,29, zebra fiskar30, Locust31,32, och mänskliga33,34, 35. viktigt, det hotande experimentet är en av endast ett fåtal metoder för att testa bild-Forming vägen-det är inte en reflex väg-med tanke på det visuella och de limbiska systemen i centrala nerv systemet är inblandade i denna krets36, 37,38. Vi har etablerat en hotande visuella stimulans system och har visat sin förmåga att framkalla rörelse detektering i musen, som vi använder som en proxy för att bedöma orördhet av mus visuella systemet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla experiment och djur skötsel utfördes i enlighet med protokoll som godkänts av de institutionella djur omsorgs-och användnings kommittéerna vid Wayne State University (protokoll nr 17-11-0399).
1. förberedelse för experimentet
- Bygg ett rektangulärt öppet lock hölje för att hysa musen under hotande visuella stimuli presentation. Vi konstruerade en 40 cm x 50 cm x 33 cm kapsling med aluminium inramning och PVC-paneler (figur 1a, B). Lägg ett pappersark för att täcka hela golvet i höljet för att säkerställa enkel rensning mellan försöken. Lägg till ett ogenomskinligt skydd i ett hörn av höljet med en entré mot mitten av arenan för enkel ingång och utgång.
- Ställ in en kamera med ett vid vinkel objektiv för att fånga musens beteende. Fäst kameran på ett bordmonterat stativ i anslutning till höljet. För bästa kvalitet video fånga, använda en kamera bild hastighet på 60 FPS eller högre.
- Ställ in en dator skärm ovanpå höljet. Eftersom bildskärmen inte kunde ses från utsidan, var en andra bildskärm för beredd, som duplicerade bilderna som visas på den primära bildskärmen.
- Förbered ett hotande mönster för projektion. Ett sätt att göra detta är att använda PsychToolbox3 i MatLab program vara för att koda för en expanderande svart cirkel (figur 1C). Ställ stimulans att börja vid en visuell vinkel på 2 ° och expandera till 50 ° över 250 MS; dessa parametrar bestämmer stimulansen hastighet (se figur 1D för visuell vinkel beräkning). Ställ in koden för att upprepa stimulansen 10 gånger med ett intervall på 1 s.
Obs: stimulansen började varje upprepning omedelbart vid uppsägning av den tidigare presentationen. För ytterligare information om stimulans presentationen, se avsnitt 3. - Välj möss av intresse för den hotande stimuli. Här, använda 32 friska ögon möss av en C57 bakgrund, manliga och kvinnliga, 4 till 14 veckor gamla. Också, använda 3 blinda möss (svår katarakt i båda ögonen) för att bedöma om svaret på hotande stimulans var verkligen en visuellt guidad beteende. Dessa blinda möss hade ingen pupill ljus reflex och ingen optomotor svar.
2. mus acklimatisering
- Placera en mus i höljet och låt den fritt utforska omgivningen. Om möjligt, försök att minimera stressen under djur överföringen genom att använda bak sidan av din fria hand som en vilo plats för musen i stället för att låta den hänga utan stöd. Musen bör hitta hela höljet för att vara säker och bör upptäcka gömstället. Släpp några mat pellets i hörnet mittemot tillflykt för att uppmuntra musen att stanna utanför tillflykt.
- Låt musen för att vänja någonstans från 7 till 15 min29,39. Vi tillät 10 min av acklimatisering före stimulans debut. Dessutom, 10 min acklimatisering en dag före experimentet kan lindra mössen.
3. hotande visuella stimuli projektion
- Innan du sätter in musen i arenan, se till att stimulans koden är redo att köra för att under lätta så få ljus förändringar som möjligt medan musen är i höljet. När program varan är klar att köra, försiktigt placera musen i höljet.
- 10 sekunder före stimuleringen, starta video inspelningen.
- Starta den hotande visuella stimuli när musen är borta från skydd och röra sig fritt i den öppna arenan. Vänta 10 sekunder efter den sista stimulans presentationen för att avsluta inspelningen.
- Börja stimulans presentationen när musen är i hörnet längst bort från tillflykt. Men när möss verkar ovilliga att utforska det avlägsna hörnet, presentera stimulans när musen är i ett annat hörn av arenan. Detta verkar inte göra någon skillnad i djurens beteendemässiga svar.
- Flytta musen tillbaka till sin ursprungliga bur. Rengör höljet för nästa mus genom att spraya väggarna och fri staden med 70% etanol och torka ner den. Byt ut pappers golvet om det är smutsigt och flytta fri staden till samma ursprungliga plats om den flyttas under djur förflyttningens och omslutnings rengöringen.
4. video analys
- Spara videoklippet för varje mus i. avi-format utan fil komprimering för att säkerställa att inga data går förlorade under överföringen till analys programmet.
Anmärkning: brist på kompression kommer att leda till större fil storlek; Använd därför extern hård disk för lagring. - Använd analys program vara för att spåra djurets rörelse runt arenan före, under och efter stimulans presentation. Använd kommersiellt tillgänglig program vara (se tabell över material) med en manuell spårning förmåga att spåra placeringen av mus huvudet i varje video bild ruta, som genererade X och Y samordning varje 1/60 MS. andra rörelse-tracking program vara inkluderar Fiji (NIH )40 och EthoVision (noldus).
- Beräkna hastigheten och avståndet för musen från fri staden. Om bilden av arenan är förvrängd på grund av video vinkeln, korrigera X-och Y-koordinationen före beräkningen (figur 2).
- Jämför parametrarna före och efter hotande stimulans debut för att avgöra hur musen reagerade på stimuli, antingen genom frysning, flyr, eller visar någon förändring i beteende29. Definiera frysning som episoder där hastigheten var mindre än 20 mm/s för 0,5 s eller längre. Definiera flygning som episoder där hastigheten ökade till 400 mm/s eller större och slutade med musen i fri staden. Definitionerna för frysning och flygning baserades på de som fastställts av Franceschi et al.29
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
En mus med friska ögon placerades i inne slutningen och får vänja sig vid 10 min. Arenan med bildskärmen i taket hölls under mesopiskt ljus förhållanden (7 x 105 fotoner/μm2/s). Under acklimatisering perioden utforskade musen utrymmet och fann den ogenomskinliga kupolen som en fristad. När musen flyttade bort från tillflykt, video fånga igång, följt av initiering av den visuella stimulans. Som svar på den hotande stimulans, de flesta möss sprang in i kupolen (flyg svar), som observerades i 30 av 31 möss (97%). Några av mössen uppvisade frys svar innan de flydde (19/31 möss, 61%). Den hotande stimulans minskade ljus villkoret 1 log (6 x 105 fotoner/μm2/s).
Tagna videoklipp analyserades med hjälp av antingen ett kommersiellt analys program med en manuell spårnings funktion (Image Pro plus) eller FIJI (NIH). Med hjälp av spårnings funktionen, var musens position identifierades i varje bild ruta av videon (60 frames/s) före, under och efter hotande stimuli. Vi analyserade hastighets förändringarna över tid och avståndet till skydds rummet (figur 3). När flygningen inträffade ökade hastigheten abrupt och avståndet till skydds rummet minskade därefter. Däremot var hastigheten nära 0 mm/s när möss frös. Fördröjningen från uppkomsten av de hotande stimuli till flygning varierade från 0,1 till 6,0 sekunder (genomsnitt 2,2 s, 30 möss). Intervallet för maximal hastighet för flyg respons var 500-3000 mm/s (30 möss).
Figur 1 : Experimentellt system. (A) Schematisk av det hotande stimuli höljet. En dator skärm (21 ") täcker taket. Det finns en ogenomskinlig kupol i ett hörn av höljet där en mus kan ta skydd. En video monitor med ett vid vinkel objektiv fångar musens beteende. (B) helhets syn på hela vår uppställning. Den sekundära bildskärmen duplicerar bilden som visas på stimulansen. (C) diagram över den hotande stimulansen. Den hotande stimulans börjar vid 2 ° (1.15 cm) och håller på denna storlek för 250 MS. den expanderar sedan till 50 ° (30,8 cm) under loppet av 250 MS och förblir 50 ° för ytterligare 500 MS. detta 1s sekvens upprepar sedan 9 fler gånger innan avslutande. (D) diagram över stimulans beräkningar. Höjden på buren dikterar den nödvändiga start och storlek (i centimeter) av stimulansen för att producera en stimulans som expanderar från 2 ° till 50 ° när direkt ovanför musen. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2 : Analys beräkningar. Beräkningar för att korrigera skeva från vid vinkel objektiv. På grund av placeringen av kameran, golvet i arenan visas som en parallelltrapets i stället för en rektangel (vänster). Därför måste X-och Y-koordinaterna för musen korrigeras för att exakt analysera mus positionen (mitten). Med hjälp av geometri kongruenta trianglar, är det möjligt att hitta hur mycket x-koordinaten måste skifta för att korrekt representera musens rörelse i 3-dimensionell rymd (höger). Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3 : Representativa svar på hotande stimuli. (A) ett exempel på en mus rörelse spåras inom arenan. En röd cirkel visar kupolen där musen flydde till och stannade tills de hotande försvann. 1 = mus positionsens start punkt när video inspelningen startade. 2 = rörelse före stimulans debut när musen utforskade arenan. 3 = hotande stimulans igång. Musen streckad till kupolen (visas av en röd streckad linje). 4 = musen stannade i kupolen fram till och efter att stimulansen avslut ATS. (B) hastighets förändringar som en funktion av tiden för denna mus. Den streckade linjen visar när den hotande stimuleringen påbörjades. Stimulus varaktighet indikeras av den gula bakgrunden. Hela 10 sekunders cykel visas inte här eftersom mössen förblev stillastående i tillflykt för hela stimulans varaktighet. (C) avstånd från kupolen över tiden för samma mus i (a) och (b). (D) och (E) hastighet och avstånd till kupolen för en mus som uppvisade frys reaktionen (frys tid visad av den röda Dubbels idig pilen) före flygning. Hastigheten reducerades jämfört med kontrollen (före hotande). Avståndet till kupolen har inte ändrats under denna period. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Med det hotande visuella stimuli systemet, en majoritet (97%) av friska ögonmöss visade flygrespons. En av 29 möss visade ingen uppenbar flyg respons. Men musen gick mot kupolen och förblev nära den tills hotande försvann, vilket tyder på att musen var åtminstone försiktig när hotande stimuli inträffade. Därför, den hotande stimuli konsekvent framkallade medfödda rädsla svar på friska ögon möss. Å andra sidan visade tre blinda möss inte några svar på den hotande (preliminära resultat). Sammantaget visar vi att hotande experiment är ett användbart och konsekvent syn test för möss.
Vi ställer in hastigheten på den hotande stimuli vid 192 grad/s. Franceschi et al.29 undersökte de hotande Svaren vid varierande hastigheter, 5 till 84 grad/s och observerade frysa svar företrädes vis på lägre hastighets nivåer. Yilmaz och Meister28 observerade flyg svar vid 35 till 350 grad/s; flyg fördröjningen var dock längre vid högre hastigheter. Därför att framkalla konsekventa flykt svar, hotande bör vara i en hastighet av 50 grad/s eller högre. Hotande stimuli kan genereras enkelt även med standard presentationsprogram. Emellertid, sådan program vara kan inte skapa högre hastigheter hotande stimuli. Istället använde vi MatLab och PsychToolbox3 för att skapa visuella stimuli på 192 grader/s.
Vi acklimatiserade mössen för 10-15 min före den hotande stimuli, som är acklimatisering tid tidigare forskare som beskrivs 28,29,39. Vi testade dessutom om acklimatisering dagen innan förändrade det hotande beteendet. Vi placerade mössen i kammaren i 10 min utan hotande stimuli dagen före de hotande stimuli. Denna acklimatisering betydligt förkortade flyg latens (p < 0,01, n = 7 möss, data visas inte). Även om 10 min av acklimatisering på dagen för hotande konsekvent orsakat flyg svar, 1 dag tidigare acklimatisering minskade latens av flykt svar.
Det finns vissa begränsningar för att använda hotande stimuli som en vision test. För det första är det svårt att testa ett öga i taget. Om inte suturering det ena ögat, båda ögonen testas tillsammans. För det andra, mekanismerna för beteendemässiga hotande svar har inte helt fastställts. I näthinnan föreslog Yilmaz och Meister 28 att ventrala off-dsgcs (Direction-selektiva ganglionceller), men inte på dsgcs, förmedlar de hotande signalerna för att ge svar. Denna slutsats uppstod från deras resultat att möss svarade på mörka hotande stimuli, men inte vita hotande. I hjärnan, Wei et al.36 och Shang et al.37 visade att vägarna från den överlägsna colliculus genom amygdala och periaqueductal grå är ansvariga för den hotande. Emellertid, fler studier bör genomföras för att bekräfta dessa utredningar.
Även om vissa begränsningar finns när det gäller det hotande experimentet, genererar den hotande visuella stimulansen konsekvent och robust rädsla svar hos möss och bör vara ett användbart test av mus vision som kräver minimal utbildning av försöks ledaren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inget att avslöja.
Acknowledgments
Detta arbete stöddes av NIH r01 EY028915 (TI) och RPB bidrag.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10.1" monitor (2° display) | Elecrow | Elecrow 10.1 Inch Raspberry Pi 1920x1080p Resolution Display | |
| 14" Business Class Laptop 5490 | Dell | 84 / rcrc961481-4860836 | |
| 20" x 50" Absorbant Liners | Fisher Scientific | AL2050 | works well to protect floor of arena, could use any type of liner |
| 21.5" monitor (1° display) | Acer | Acer R221Q bid 21.5-inch IPS Full HD Display | |
| CCD Camera | Lumenera Corporation | Infiniyy3S-1UR | excellent for behavioral studies due to high fps rate (60 fps) |
| Enclosure (alminum frames and PVC panels) | 80/20 Inc. | 4x cat.#9010, 4x cat.#9005, 1x cat.#9000, 5x cat.#65-2616 | excellent, used quick build tab to find PVC, joints, and frame |
| Ethanol | Fisher Scientific | 22-032-601 | |
| Excel Spreadsheet Software | Microsoft Office | user friendly and widespread knowledge of Microsoft Office software | |
| Freearm | Amazon | used to mount camera to the table, could use any mountable extendable arm | |
| ImagePro Premiere 3D | Media Cybernetics | version 9.3 | good program, could use some updating with the automated tracking feature |
| Matlab software (Psychotoolbox 3) | MathWorks | Matlab R2018b 64-bit (9.5.0.944444) | excellent software to generate pattern stimuli of any conditions |
| SteamPix sorftware | Norpix | StreamPix 7 64-bit Single Camera | works well, a few problems with frame dropping but good customer service |
| WD My Book External Hard Drive | Western Digital | WDBBGB0080HBK hard drive 8 TB USB 3.0 | necessary if using .avi files with no compression codec due to large size of files |
| Wide angle lens | Navitar | NMV-5M23 | excellent and necessary to capture entire arena |
References
- Enroth-Cugell, C., Robson, J. G. The contrast sensitivity of retinal ganglion cells of the cat. The Journal of Physiology. 187 (3), 517-552 (1966).
- Boycott, B. B., Wässle, H. The morphological types of ganglion cells of the domestic cat's retina. The Journal of Physiology. 240 (2), 397-419 (1974).
- Livingstone, M. S., Hubel, D. H. Segregation of form, color, movement, and depth: anatomy, physiology, and perception. Science. 240 (4853), 740-749 (1988).
- Livingstone, M. S., Hubel, D. H. Psychophysical evidence for separate channels for the perception of form, color, movement, and depth. The Journal of Neuroscience. 7 (11), 3416-3468 (1987).
- Wässle, H.
- Awatramani, G. B., Slaughter, M. M. Origin of transient and sustained responses in ganglion cells of the retina. The Journal of Neuroscience. 20 (18), 7087-7095 (2000).
- Ghosh, K. K., Bujan, S., Haverkamp, S., Feigenspan, A., Wässle, H. Types of bipolar cells in the mouse retina. The Journal of Comparative Neuroscience. 469 (1), 70-82 (2004).
- Wässle, H., Puller, C., Muller, F., Haverkamp, S. Cone contacts, mosaics, and territories of bipolar cells in the mouse retina. The Journal of Neuroscience. 29 (1), 106-117 (2009).
- Helmstaedter, M., et al. Connectomic reconstruction of the inner plexiform layer in the mouse retina. Nature. 500 (7461), 168-174 (2013).
- Shekhar, K., et al. Comprehensive Classification of Retinal Bipolar Neurons by Single-Cell Transcriptomics. Cell. 166 (5), 1308-1323 (2016).
- Wu, S. M., Gao, F., Maple, B. R. Functional architecture of synapses in the inner retina: segregation of visual signals by stratification of bipolar cell axon terminals. The Journal of Neuroscience. 20 (12), 4462-4470 (2000).
- Sun, W., Li, N., He, S. Large-scale morphological survey of mouse retinal ganglion cells. The Journal of Comparative Neuroscience. 451 (2), 115-126 (2002).
- Volgyi, B., Chheda, S., Bloomfield, S. A. Tracer coupling patterns of the ganglion cell subtypes in the mouse retina. The Journal of Comparative Neuroscience. 512 (5), 664-687 (2009).
- Kong, J. H., Fish, D. R., Rockhill, R. L., Masland, R. H. Diversity of ganglion cells in the mouse retina: Unsupervised morphological classification and its limits. The Journal of Comparative Neuroscience. 489 (3), 293-310 (2005).
- Sumbul, U., et al. A genetic and computational approach to structurally classify neuronal types. Nature Communications. 5, 3512 (2014).
- Baden, T., et al. The functional diversity of retinal ganglion cells in the mouse. Nature. 529 (7586), 345-350 (2016).
- Lindstrom, S. H., Ryan, D. G., Shi, J., DeVries, S. H. Kainate receptor subunit diversity underlying response diversity in retinal Off bipolar cells. The Journal of Physiology. 592, Pt 7 1457-1477 (2014).
- Euler, T., Haverkamp, S., Schubert, T., Baden, T. Retinal bipolar cells: elementary building blocks of vision. Nature Reviews Neuroscience. 15 (8), 507-519 (2014).
- Yoshida, K., et al. A key role of starburst amacrine cells in originating retinal directional selectivity and optokinetic eye movement. Neuron. 30 (3), 771-780 (2001).
- Pearson, R. A., et al. Restoration of vision after transplantation of photoreceptors. Nature. 485 (7396), 99-103 (2012).
- Saszik, S. M., Robson, J. G., Frishman, L. J. The scotopic threshold response of the dark-adapted electroretinogram of the mouse. The Journal of Physiology. 543, Pt 3 899-916 (2002).
- Reuter, J. H., Sanyal, S. Development and degeneration of retina in rds mutant mice: the electroretinogram. Neuroscience Letters. 48 (2), 231-237 (1984).
- Woodward, W. R., et al. Isoflurane is an effective alternative to ketamine/xylazine/acepromazine as an anesthetic agent for the mouse electroretinogram. Documenta Ophthalmologica. 115 (3), 187-201 (2007).
- Cahill, H., Nathans, J. The optokinetic reflex as a tool for quantitative analyses of nervous system function in mice: application to genetic and drug-induced variation. PLoS One. 3 (4), 2055 (2008).
- Prusky, G. T., Alam, N. M., Beekman, S., Douglas, R. M. Rapid quantification of adult and developing mouse spatial vision using a virtual optomotor system. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 45 (12), 4611-4616 (2004).
- Lu, Q., Ganjawala, T. H., Hattar, S., Abrams, G. W., Pan, Z. H. A Robust Optomotor Assay for Assessing the Efficacy of Optogenetic Tools for Vision Restoration. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 59 (3), 1288-1294 (2018).
- Xue, T., et al. Melanopsin signalling in mammalian iris and retina. Nature. 479 (7371), 67-73 (2011).
- Yilmaz, M., Meister, M. Rapid innate defensive responses of mice to looming visual stimuli. Current Biology. 23 (20), 2011-2015 (2013).
- De Franceschi, G., Vivattanasarn, T., Saleem, A. B., Solomon, S. G. Vision Guides Selection of Freeze or Flight Defense Strategies in Mice. Current Biology. 26 (16), 2150-2154 (2016).
- Temizer, I., Donovan, J. C., Baier, H., Semmelhack, J. L. A Visual Pathway for Looming-Evoked Escape in Larval Zebrafish. Current Biology. 25 (14), 1823-1834 (2015).
- Guest, B. B., Gray, J. R. Responses of a looming-sensitive neuron to compound and paired object approaches. Journal of Neurophysiology. 95 (3), 1428-1441 (2006).
- McMillan, G. A., Gray, J. R. A looming-sensitive pathway responds to changes in the trajectory of object motion. Journal of Neurophysiology. 108 (4), 1052-1068 (2012).
- Vagnoni, E., Lourenco, S. F., Longo, M. R. Threat modulates neural responses to looming visual stimuli. Eur The Journal of Neuroscience. 42 (5), 2190-2202 (2015).
- Coker-Appiah, D. S., et al. Looming animate and inanimate threats: the response of the amygdala and periaqueductal gray. Social Neuroscience. 8 (6), 621-630 (2013).
- Tyll, S., et al. Neural basis of multisensory looming signals. Neuroimage. 65, 13-22 (2013).
- Wei, P., et al. Processing of visually evoked innate fear by a non-canonical thalamic pathway. Nature Communications. 6, 6756 (2015).
- Shang, C., et al. Divergent midbrain circuits orchestrate escape and freezing responses to looming stimuli in mice. Nature Communications. 9 (1), 1232 (2018).
- Salay, L. D., Ishiko, N., Huberman, A. D. A midline thalamic circuit determines reactions to visual threat. Nature. 557 (7704), 183-189 (2018).
- Vale, R., Evans, D., Branco, T. A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice. Journal of Visualized Experiments. (137), 56988 (2018).
- Tungtur, S. K., Nishimune, N., Radel, J., Nishimune, H. Mouse Behavior Tracker: An economical method for tracking behavior in home cages. Biotechniques. 63 (5), 215-220 (2017).
