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Ricerca sul cancro
0 visualizzazioni • 3:01 min. • April 30th, 2023
La metabolomica è lo studio per identificare e quantificare i metaboliti presenti all'interno delle cellule. Per preparare il campione, iniziare seminando le cellule del cancro al seno insieme al terreno di crescita in due piastre etichettate come test e controllo. Incubare per tre giorni a 37 gradi Celsius. Ora, rimuovere il terreno e aggiungere il terreno fresco con estradiolo nella piastra di prova e il terreno semplice nella piastra di controllo.
L'estradiolo si lega al recettore alfa degli estrogeni nelle cellule del cancro al seno per indurre determinate espressioni, causando un cambiamento nella composizione del metabolita. Incubare le piastre per la durata desiderata. Sostituire il terreno con soluzione salina tamponata con fosfato ghiacciato o PBS per lavare le cellule, quindi aggiungere acetone ghiacciato. I reagenti ghiacciati bloccano l'azione delle proteasi e quindi prevengono la degradazione delle proteine.
Ora usa un raschietto per staccare le cellule dalle piastre e trasferiscile in provette con l'aiuto di una pipetta. Prelevare 20 microlitri di questa sospensione cellulare su un emocitometro e contare il numero di cellule. Conservare i campioni a meno 80 gradi Cels
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