Microarray di anticorpi: una tecnica per studiare l'espressione proteica delle cellule di cancro del polmone trattate con miRNA

- Inizia aggiungendo una soluzione di biotina e un tampone di marcatura al campione proteico. Incubare per facilitare l'adesione della biotina alle proteine. Aggiungere un reagente di arresto e un vortice. Quindi, posizionare un vetrino per microarray di anticorpi in un piatto contenente un reagente bloccante per prevenire il legame non specifico degli anticorpi. Lavare il vetrino con acqua distillata doppia per rimuovere la soluzione bloccante. Posizionare il vetrino del microarray in una camera. Mescolare il campione di proteina biotinilata con una soluzione di accoppiamento e aggiungerlo al vetrino per facilitare il legame delle proteine bersaglio agli anticorpi corrispondenti. Trasferire il vetrino in una piastra contenente un tampone di lavaggio e sostituirlo con acqua distillata doppia. Successivamente, posizionare il vetrino in un tampone di rilevamento contenente streptavidina marcata in fluorescenza per promuoverne il legame con le proteine biotinilate.

Incubare la capsula al buio per mantenere l'intensità della fluorescenza. Rimuovere il vetrino e inserirlo in uno scanner per microarray. Lo scanner cerca segnali fluorescenti dalla streptavidina legata alla proteina bersag