JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 2:52 min. • March 31st, 2026
Inizia con un vetrino sigillato contenente cellule batteriche marcate con un marcatore fluorescente rosso citoplasmatico e un marcatore fluorescente verde specifico per proteina.
Osserva il vetrino sotto un microscopio a fluorescenza.
Individua un campo contenente cellule batteriche ben isolate e concentrati sul centro di una cellula rappresentativa.
Imposta il primo canale di fluorescenza e acquisisci un'immagine z-stack a parametri specifici per catturare la forma tridimensionale della cellula rappresentativa e delle cellule vicine.
Poi, passa al secondo canale di fluorescenza e acquisisci un'altra immagine z-stack delle stesse celle con gli stessi parametri.
Cattura la distribuzione delle proteine batteriche all'interno delle cellule.
Ritaglia singole cellule da ogni z-stack per isolarle e l'analisi a singola cella.
Allinea queste immagini per visualizzare la distribuzione delle proteine batteriche rispetto alla forma cellulare, consentendo un'analisi precisa durante le interazioni ospite-patogeno.
Immediatamente dopo aver sigillato il coperchio, posizionare il vetrino su un palco del microscopio e, dopo cinque minuti di equilibrio termico, utilizzare le ruote di messa a fuoco del micro
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