Isolamento delle cellule T basato sulla flottazione mediante smistamento cellulare attivato dalla galleggiabilità

Per isolare le cellule T, globuli bianchi essenziali per il sistema immunitario, utilizzando la selezione cellulare attivata dalla galleggiabilità, BACS, prendi una sospensione di cellule mononucleate del sangue periferico, PBMC. Le PBMC contengono cellule T bersaglio e cellule non bersaglio come cellule B, monociti, cellule natural killer e cellule dendritiche.

Aggiungere un tampone contenente una quantità adeguata di anticorpi anti-CD3 biotinilati e incubare per la durata richiesta. L'anticorpo si lega al complesso CD3, un complesso proteico multimerico sulla superficie cellulare, una caratteristica distintiva delle cellule T.

Aggiungere microbolle funzionalizzate - piccole particelle sferiche rivestite di streptavidina - per una selezione positiva delle cellule T legate agli anticorpi. Il nucleo di ogni microbolla è una sfera cava, che le rende particelle a bassa densità in grado di galleggiare in una soluzione acquosa.

Incubare la miscela sotto agitazione, lasciando che le microbolle e il campione si mescolino accuratamente. Durante l'incubazione, la streptavidina sulla microbolla si lega alla biotina sull'anticorpo legato alle cellule T, immobilizzando le cellule sulle microbo