Un test immunologico multiplex basato su microsfere per identificare gli anticorpi patogeno-specifici nella saliva

Prendi una miscela di diversi set di microsfere o perline di polistirene di dimensioni micron.

Ogni set è accoppiato a un antigene unico di un patogeno ambientale ed è marcato in modo univoco in fluorescenza.

Aggiungere il composto in una piastra filtrante contenente una membrana sul fondo.

Introdurre saliva umana contenente anticorpi contro i patogeni ambientali, che si legano ad antigeni affini sulle microsfere.

Rimuovere gli anticorpi non legati con il vuoto. Gli anticorpi legati alle microsfere vengono mantenuti a causa delle piccole dimensioni dei pori della membrana.

Aggiungere anticorpi secondari biotinilati per legarsi agli anticorpi legati alla microsfera. Rimuovere gli anticorpi non legati.

Aggiungere streptavidina coniugata a un colorante reporter fluorescente, che si lega alla biotina sugli anticorpi secondari.

Rimuovere il colorante non legato, risospendere le microsfere e passarle attraverso un analizzatore immunologico multiplex.

Un raggio laser rileva la fluorescenza della microsfera, identificando l'antigene, mentre un altro raggio rileva il segnale reporter, confermando un anticorpo legato.

Gli anticorpi antigene-specifici nella saliva indicano una precedente espo