Generazione di singole cellule T CD8 positive da cellule staminali pluripotenti indotte

Cellule staminali pluripotenti indotte da coltura su uno strato di alimentazione di cellule stromali su una matrice di gelatina.

Lo strato di alimentazione imita l'ambiente extracellulare naturale, guidando la differenziazione delle cellule staminali in organoidi a forma di cupola contenenti cellule progenitrici ematopoietiche.

Aggiungere enzimi per dissociare le cellule co-coltivate.

Trasferire le cellule in un piatto fresco ricoperto di gelatina per l'adesione delle cellule stromali.

Raccogliere le cellule progenitrici ematopoietiche non aderenti in un mezzo di differenziazione.

Coltivali su uno strato di alimentazione fresco per promuovere la differenziazione delle cellule progenitrici in cellule T doppie positive con recettori CD4 e CD8 e cellule T doppie negative prive di entrambi i recettori.

Trasferire le cellule in una provetta. Incubarli con perle magnetiche che trasportano anticorpi specifici per CD4 che marcano selettivamente le cellule T doppie positive.

Utilizzare un separatore magnetico per isolare le cellule a doppia positività e coltivarle su uno strato di alimentazione fresco.

Integrare con un mix di citochine e anticorpi per stimolare le cellule, inducendo la sott