Visualizzazione e mappatura dei percorsi neuronali in una fetta di cervello dell'amigdala

Nel cervello del topo, l'amigdala contiene neuroni che formano connessioni sinaptiche con la corteccia prefrontale mediale, o neuroni mPFC.

Prendiamo una fetta di cervello dell'amigdala in cui i neuroni mPFC esprimono un canale sensibile alla luce, la rodopsina, fusa con una proteina fluorescente.

Posiziona la fetta in una camera di registrazione e visualizzala al microscopio a fluorescenza per localizzare i neuroni mPFC.

Passa a una vista in campo chiaro e introduci una pipetta per cerotti contenente una soluzione interna.

Applicare una pressione positiva per far avanzare la pipetta verso un neurone dell'amigdala.

Al contatto neuronale, si forma una fossetta.

Applicare l'aspirazione per formare una tenuta ermetica.

Continuare l'aspirazione per rompere la membrana, stabilendo il contatto con l'interno della cellula.

Illuminare la fetta per attivare il canale neuronale mPFC, la rodopsina, innescando l'afflusso di ioni positivi, la generazione di potenziale d'azione e il rilascio di neurotrasmettitori.

I neurotrasmettitori si legano ai recettori dei neuroni dell'amigdala postsinaptica, causando l'afflusso di ioni e la generazione di corrente.

Registra la corrente neuronale postsinapt