JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:25 min. • June 17th, 2025
Inizia con una camera sperimentale rivestita in elastomero siliconico contenente un muscolo di topo fissato posizionato sotto un microscopio confocale.
Il muscolo è immerso in una soluzione fisiologica contenente inibitori che bloccano le contrazioni muscolari.
Il moncone nervoso marcato con un colorante di calcio fluorescente è posizionato all'interno dell'elettrodo di aspirazione, che è collegato a uno stimolatore elettrico.
Alla giunzione neuromuscolare, il nervo periferico è collegato al muscolo.
Applicare uno stimolo elettrico al nervo usando l'elettrodo. Questo innesca un rapido afflusso di ioni calcio che si legano al colorante intracellulare di calcio.
Illuminare la giunzione neuromuscolare per eccitare il colorante di calcio, provocandone la fluorescenza.
Quindi, acquisisci immagini ad alta risoluzione per registrare rapidi transitori di calcio nelle terminazioni nervose periferiche.
Seleziona la regione di interesse e misura l'intensità della fluorescenza.
Un rapido aumento dell'intensità della fluorescenza indica un afflusso di calcio alle terminazioni nervose periferiche, mentre una diminuzione riflette la clearance del calcio.
Riempire il sistema di perfusione con la soluzione
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