Sviluppo di una rete neurale micro-tessutale utilizzando una micro-colonna basata su idrogel

Inizia con un piatto contenente una microcolonna. La microcolonna ha un guscio esterno in idrogel e una matrice extracellulare, o nucleo ECM.

Aggiungere gocce di terreno di coltura allo stesso piatto.

Trasferisci gli aggregati di cellule neuronali nel piatto, quindi posizionali in una delle goccioline medie.

Osservare al microscopio e inserire aggregati cellulari ad entrambe le estremità della microcolonna.

Quindi, trasferire la microcolonna seminata nel terreno per la vitalità cellulare.

Incubare per consentire l'adesione della cellula alla MEC.

Utilizzando lo stereomicroscopio, confermare l'attacco delle cellule. Quindi, aggiungere il terreno di coltura per coprire il piatto e incubare.

I neuroni attaccati iniziano a estendere i loro assoni attraverso la MEC.

Sostituisci regolarmente il mezzo medio con un terreno fresco per mantenere i livelli di nutrienti.

Nel tempo, gli assoni crescono e si estendono per l'intera lunghezza della microcolonna, formando reti neurali.

La rete neurale sviluppata per l'ingegneria dei microtessuti è pronta a ricostruire i circuiti neurali danneggiati.

Procedere alla semina cellulare subito dopo l'incubazione. Trasferire circa 10-20 microlitri di terreno di col