Name: Caratterizzazione delle risposte infiammatorie durante la colonizzazione intranasale con streptococco pneumoniae (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 12 s
Description: Impara a colonizzare il nasofaringe murino con Streptococcus pneumoniae e a estrarre batteri e cellule immunitarie mediante lavaggio nasale. Questo metodo consente di quantificare il carico batterico e analizzare le risposte immunitarie in vivo.

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Gli autori ringraziano il Dr. Jeffery Weiser dell'Università della Pennsylvania per il suo dono dei ceppi clinici di Streptococcus pneumoniae. Questo lavoro è stato finanziato dal Canadian Institutes for Health Research. CV è stato finanziato da una borsa di studio M. G. DeGroote e da una borsa di studio della Canadian Thoracic Society. Questo lavoro è stato finanziato dalla Ontario Lung Association e dal Canadian Institutes of Health Research (CIHR). Il lavoro nel laboratorio bowdish è supportato in parte dal Michael G. DeGroote Centre for Infectious Disease Research e dal McMaster Immunology Research Centre.

<ol><li>Bogaert, D., de Groot, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Streptococcus+pneumoniae+colonisation%3A+the+key+to+pneumococcal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Streptococcus pneumoniae colonisation: the key to pneumococcal disease.</a> Lancet Infect. Dis. 4, 144-154 (2004).</li>
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<li>Nelson, A., Roche, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capsule+enhances+pneumococcal+colonisation+by+limiting+mucus-mediated+clearance%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Capsule enhances pneumococcal colonisation by limiting mucus-mediated clearance.</a> Infect. Immun. 75, 83-90 (2007).</li>
<li>van Rossum, A., Lysenko, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+and+bacterial+factors+contributing+to+the+clearance+of+colonisation+by+Streptococcus+pneumoniae+in+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Host and bacterial factors contributing to the clearance of colonisation by Streptococcus pneumoniae in a murine model.</a> Infect. Immun. 73, 7718-7726 (2005).</li>
<li>Barocchi, M. A., Ries, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pneumococcal+pilus+influences+virulence+and+host+inflammatory+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">A pneumococcal pilus influences virulence and host inflammatory responses.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 103, 2857-2862 (2006).</li>
<li>Malley, R., Henneke, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recognition+of+pneumolysin+by+Toll-like+receptor+4+confers+resistance+to+pneumococcal+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Recognition of pneumolysin by Toll-like receptor 4 confers resistance to pneumococcal infection.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 100, 1966-1971 (2003).</li>
<li>McCool, T. L., Weiser, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limited+role+of+antibody+in+clearance+of+Streptococcus+pneumoniae+in+a+murine+model+of+colonization%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Limited role of antibody in clearance of Streptococcus pneumoniae in a murine model of colonization.</a> Infect. Immun. 72, 5807-5813 (2004).</li>
<li>Gingles, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+genetic+resistance+in+invasive+pneumococcal+infection%3A+identification+and+study+of+susceptibility+and+resistance+in+inbred+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Role of genetic resistance in invasive pneumococcal infection: identification and study of susceptibility and resistance in inbred mouse strains.</a> Infect. Immun. 69 (1), 426-434 (2001).</li>
<li>Jeong, D., Jeong, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Difference+in+resistance+to+Streptococcus+pneumoniae+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim.+Res%22%5BJournal%5D)">Difference in resistance to Streptococcus pneumoniae infection in mice.</a> Lab Anim. Res. 27, 91-98 (2011).</li>
<li>Wu, H. Y., Virolainen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+Streptococcus+pneumoniae+nasopharyngeal+colonization+model+in+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microb.+Pathog%22%5BJournal%5D)">Establishment of a Streptococcus pneumoniae nasopharyngeal colonization model in adult mice.</a> Microb. Pathog. 23, 127-137 (1997).</li>
<li>Southam, D. S., Dolovich, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distribution+of+intranasal+instillations+in+mice%3A+effects+of+volume%2C+time%2C+body+position%5BTitle%5D)+AND+%22Lung+Physiol%22%5BJournal%5D)">Distribution of intranasal instillations in mice: effects of volume, time, body position.</a> Lung Physiol. 282, 833-839 (2002).</li>
<li>Miller, M. A., Stabenow, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+Murine+Intranasal+Dosing+Efficiency+Using+Luminescent+Francisella+tularensis%3A+Effect+of+Instillation+Volume+and+Form+of+Anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Visualization of Murine Intranasal Dosing Efficiency Using Luminescent Francisella tularensis: Effect of Instillation Volume and Form of Anesthesia.</a> PLoS ONE. 7 (2), (2012).</li>
<li>Briles, D. E., Novak, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+Colonization+with+Streptococcus+pneumoniae+includes+subpopulations+of+surface+and+invasive+pneumococci%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Nasal Colonization with Streptococcus pneumoniae includes subpopulations of surface and invasive pneumococci.</a> Infect. Immun. 73 (10), 6945-6951 (2005).</li>
<li>Wu, H. -Y., Virolainen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+Streptococcus+pneumoniae+nasopharyngeal+colonization+model+in+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microb.+Pathog%22%5BJournal%5D)">Establishment of a Streptococcus pneumoniae nasopharyngeal colonization model in adult mice.</a> Microb. Pathog. 23, 127-137 (1997).</li>
<li>Mo, Y., Wan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+reverse+transcription-PCR+and+real-time+PCR+in+nanotoxicity+research%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Application of reverse transcription-PCR and real-time PCR in nanotoxicity research.</a> Methods Mol. Biol. 926, 99-112 (2012).</li>
<li>Kuper, C. F., Koornstra, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+nasopharyngeal+lymphoid+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Immunol%22%5BJournal%5D)">The role of nasopharyngeal lymphoid tissue.</a> Trends Immunol. 13, 219-224 (1992).</li>
<li>Zhang, Q., Leong, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterisation+of+regulatory+T+cells+in+nasal+associated+lymphoid+tissue+in+children%3A+relationships+with+pneumococcal+colonization%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Characterisation of regulatory T cells in nasal associated lymphoid tissue in children: relationships with pneumococcal colonization.</a> PLoS Pathog. 7, (2011).</li>
<li>Briles, D. E., Novak, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+colonization+with+Streptococcus+pneumoniae+includes+subpopulations+of+surface+and+invasive+pneumococci%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Nasal colonization with Streptococcus pneumoniae includes subpopulations of surface and invasive pneumococci.</a> Infect. Immun. 73, 6945-6951 (2005).</li>
<li>Weinberger, D. M., Trzcinski, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pneumococcal+capsular+polysaccharide+structure+predicts+serotype+prevalence%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Pneumococcal capsular polysaccharide structure predicts serotype prevalence.</a> PLoS Pathog. 5, (2009).</li>
<li>Bryant, W. P., J,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Which+Pneumococcal+Serogroups+Cause+the+Most+Invasive+Disease%3A+Implications+for+Conjugate+Vaccine+Formulation+and+Use%2C+Part+I.%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Which Pneumococcal Serogroups Cause the Most Invasive Disease: Implications for Conjugate Vaccine Formulation and Use, Part I.</a> Clin. Infect. Dis. 30, 100-121 (2000).</li>
<li>Hausdorff, W. P., Feikin, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiological+differences+among+pneumococcal+serotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Epidemiological differences among pneumococcal serotypes.</a> Lancet Infect. Dis. 5, 83-93 (2005).</li>
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<li>Cohen, J. M., Khandavalli, S., Camberlein, E., Hyams, C., Baxendale, H. E., Brown, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+contributions+against+invasive+Streptococcus+pneumoniae+pneumonia+of+antibody+and+Th17-Cell+responses+to+nasopharyngeal+colonisation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Protective contributions against invasive Streptococcus pneumoniae pneumonia of antibody and Th17-Cell responses to nasopharyngeal colonisation.</a> PLoS One. 6 (10), (2011).</li>
<li>Cohen, J. M., Khandavalli, S., Camberlein, E., Hyams, C., Baxendale, H. E., Brown, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+contributions+against+invasive+Streptococcus+pneumoniae+pneumonia+of+antibody+and+Th17-Cell+responses+to+nasopharyngeal+colonisation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Protective contributions against invasive Streptococcus pneumoniae pneumonia of antibody and Th17-Cell responses to nasopharyngeal colonisation.</a> PLoS One. 6 (10), (2011).</li>
<li>Richards, L., Ferreira, D. M., Miyaji, E. N., Andrew, P. W., Kadioglu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+immunising+effect+of+pneumococcal+nasopharyngeal+colonisation%3B+protection+against+future+colonisation+and+fatal+invasive+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Immunobiology%22%5BJournal%5D)">The immunising effect of pneumococcal nasopharyngeal colonisation; protection against future colonisation and fatal invasive disease.</a> Immunobiology. , 215-251 (2010).</li>
<li>Lanie, J. A., Ng, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+sequence+of+Avery%27s+virulent+serotype+2+strain+D39+of+Streptococcus+pneumoniae+and+comparison+with+that+of+unencapsulated+laboratory+strain+R6%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Genome sequence of Avery's virulent serotype 2 strain D39 of Streptococcus pneumoniae and comparison with that of unencapsulated laboratory strain R6.</a> J. Bacteriol. 189, 38-51 (2007).</li>
<li>Robertson, G. T., Ng, W. L., Foley, J., Gilmour, R., Winkler, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+transcriptional+analysis+of+clpP+mutations+of+type+2+Streptococcus+pneumoniae+and+their+effects+on+physiology+and%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Global transcriptional analysis of clpP mutations of type 2 Streptococcus pneumoniae and their effects on physiology and.</a> 184, 3508-3520 (2002).</li>
<li>Orihuela, C. J., Gao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-specific+contributions+of+pneumococcal+virulence+factors+to+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Tissue-specific contributions of pneumococcal virulence factors to pathogenesis.</a> J. Infect. Dis. 190, 1661-1669 (2004).</li>
<li>Orihuela, C. J., Gao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ-specific+models+of+Streptococcus+pneumoniae+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Scand.+J.+Infect.+D%22%5BJournal%5D)">Organ-specific models of Streptococcus pneumoniae disease.</a> Scand. J. Infect. D. 35, 647-652 (2003).</li>
<li>Swirski, F. K., Nahrendorf, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+splenic+reservoir+monocytes+and+their+deployment+to+inflammatory+sites%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Identification of splenic reservoir monocytes and their deployment to inflammatory sites.</a> Science. 325, 612-616 (2009).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

In questo studio abbiamo presentato metodi dettagliati per la colonizzazione intranasale dei topi utilizzando un ceppo isolato clinico di Streptococcus pneumoniae e il successivo isolamento e caratterizzazione delle cellule immunitarie reclutate in rinofaringe in risposta ai batteri. Abbiamo dimostrato come un inoculo batterico possa essere coltivato in mezzi ricchi di nutrienti e utilizzato per stabilire un evento di colonizzazione nei topi, che è inizialmente limitato al rinofaringe. Abbiamo quindi mostrato co...

<table><tbody><tr><td>Anti-topo Ly6C FITC</td><td>BD Pharmingen</td><td>553104</td><td></td></tr><tr><td>Anti-topo Ly6G PE</td><td>BD Pharmingen</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anti-topo CD45.1 eFluor 450</td><td>eBioscience</td><td>48-0453-82</td><td></td></tr><tr><td>Anti-topo F4/80 Antigene APC</td><td>eBioscience</td><td>17-4801-82</td><td></td></tr><tr><td>Anti-topo CD11c PerCP-Cy5.5</td><td>eBioscience</td><td>45-0114-82</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Mouse CD11b PE-Cy7</td><td>eBioscience</td><td>25-0112-82</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Mouse CD3 Alexa Fluor 700</td><td>eBioscience</td><td>56-0032-82</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Mouse CD4 eFluor 605NC</td><td>eBioscience</td><td>93-0041-42</td><td></td></tr><tr><td>Tubo intramedicale in polietilene - PE20</td><td>Becton Dickinson</td><td>427406</td><td></td></tr><tr><td>BD Siringa da 1 ml</td><td>Becton Dickinson</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>BD 26 G 3/8 Smusso intradermico</td><td>Becton Dickinson</td><td>305110</td><td></td></tr><tr><td>Tampone RLT Lisi Tampone</td><td>Qiagen</td><td>79216</td><td></td></tr><tr><td>Difco Triptico Soia Agar</td><td>Becton Dickinson</td><td>236950</td><td></td></tr><tr><td>Sangue di pecora defibrinato</td><td>PML Microbiologicals</td><td>A0404</td><td></td></tr><tr><td>Kit RNAqueous-Micro</td><td>Ambion</td><td>AM1931</td><td></td></tr><tr><td>Trascrittasi</td> <td>inversa M-MuLVNew England Biolabs</td><td>M0253L</td><td></td></tr><tr><td>GoTaq qPCR Master Mix</td><td>Promega</td><td>A6001</td><td></td></tr></tbody></table>

caratterizzazione delle risposte infiammatorie durante la colonizzazione intranasale con streptococco pneumoniae

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

La colonizzazione nasofaringea da parte di Streptococcus pneumoniae è un prerequisito per l'invasione ai polmoni o al flusso sanguigno1. Questo organismo è in grado di colonizzare la superficie mucosa del rinofaringe, dove può risiedere, moltiplicarsi e infine superare le difese ospiti per invadere altri tessuti dell'ospite. L'accertamento di un'infezione nelle vie respiratorie normalmente inferiori provoca polmonite. In alternativa, i batteri possono diffondersi nel flusso sanguigno causando la batteriemia, che è associata ad alti tassi dimortalità 2, oppure portare direttamente allo sviluppo della meningite pneumococcica. Comprendere la cinetica e le risposte immunitarie alla colonizzazione nasofaringea è un aspetto importante dei modelli di infezione da S. pneumoniae.
Il nostro modello di topo di colonizzazione intranasale è adattato daimodelli umani 3 ed è stato utilizzato da più gruppi di ricerca nello studio delle risposte ospite-patogeno nel nasofaringe4-7. Nella prima parte del modello, usiamo un isolato clinico di S. pneumoniae per stabilire una colonizzazione batterica autolimitante che è simile agli eventi di trasporto negli adulti umani. La procedura qui dettagliata prevede la preparazione di un inoculo batterico, seguito dall'istituzione di un evento di colonizzazione attraverso la consegna dell'inoculo attraverso una via intranasale di somministrazione. I macrofagi residenti sono il tipo di cellula predominante nel nasofaringe durante lo stato stazionario. In genere, ci sono pochi linfociti presenti nei topi non infetti8, tuttavia la colonizzazione della mucosa porterà a infiammazioni di basso-alto grado (a seconda della virulenza delle specie batteriche e del ceppo) che si tradurrà in una risposta immunitaria e nel successivo reclutamento delle cellule immunitarie ospiti. Queste cellule possono essere isolate da un gabinetto del contenuto tracheale attraverso i narici e correlate alla densità dei batteri della colonizzazione per comprendere meglio la cinetica dell'infezione.

La figura 1 rappresenta uno schema di panoramica che riassume i passaggi principali del protocollo. Le figure 2-3 forniscono la visualizzazione della metodologia microbiologica inerente ai protocolli descritti nel presente documento. La figura 4 rappresenta il corretto posizionamento di un topo per eseguire una colonizzazione intranasale, mentre la figura 5 descrive tipicamente i cambiamenti di peso dei topi colonizzati con ceppo S. pneumoniae P...

Viene descritta la colonizzazione del nasofaringe murino con streptococco pneumoniae e la successiva estrazione di cellule aderenti o reclutate. Questa tecnica prevede il lavaggio del nasofaringe e la raccolta del fluido attraverso i nares ed è adattabile per varie letture, tra cui la quantificazione differenziale delle cellule e l'analisi dell'espressione dell'mRNA in situ.

Caratterizzazione delle risposte infiammatorie durante la colonizzazione intranasale con streptococco pneumoniae

Nasopharyngeal colonization by Streptococcus pneumoniae is a prerequisite to invasion to the lungs or bloodstream1. This organism is capable of colonizing ...

Questa procedura prevede la colonizzazione del nasofaringe murino con Streptococcus pneumoniae e il successivo isolamento dei batteri colonizzatori, nonché delle cellule aderenti o reclutate. Questo viene effettuato preparando innanzitutto un inocolo batterico della ceppo di S. pneumoniae di interesse.I batteri vivi vengono quindi somministrati per via intranasale a topi anestetizzati mentre si trovano in un apparato di contenimento. Dopo il periodo desiderato di colonizzazione, i topi vengono soppressi e vengono effettuate lavande nasali canulando le trachee esposte e lavando il contenuto attraverso il naso. Il numero di batteri presente nelle lavande nasali può essere quantificato mediante tecniche microbiologiche. In alternativa, le risposte immunitarie possono essere analizzate utilizzando tecniche di citometria a flusso per definire il fenotipo delle cellule reclutate o tecniche di PCR quantitativa.Per misurare i livelli di mRNA espressi di interesse prima di iniziare, sarà necessario preparare dei contenitori per topi per la fase di colonizzazione intranasale della procedura e aghi canulati per le lavande nasali. Un contenitore per topi può essere preparato semplicemente tagl

characterization-inflammatory-responses-during-intranasal

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Immunologia e Infezioni

Questo video dimostra l'instaurazione di un'infezione polmonare in un modello di roditore immunocompetente tramite intubazione e installazione di sospensioni batteriche nei lobi polmonari. Questo modello consente studi di efficacia antibatterica in animali immunocompetenti.

Instillazione intrabronchiale di Streptococcus pneumoniae in modelli di roditori immunocompetenti

Sperimentale trasporto pneumococcica umana offre un modello naturale di trasporto e un possibile modello per l'uso nello sviluppo dei vaccini. Questa tecnica è utile ancora complessa e comporta un rischio clinico introducendo un agente patogeno in un essere umano. Abbiamo sviluppato un protocollo dettagliato.

Sperimentale trasporto pneumococco umano

Streptococcus pneumoniae è il patogeno principale che causa una grave polmonite acquisita in comunità e responsabile per oltre 2 milioni di decessi in tutto il mondo. L'impatto dei fattori batterici implicati in palestra o virulenza può essere monitorato in tempo reale in un mouse polmonite o batteriemia modello acuta con batteri bioluminescenti.

A seguito in tempo reale l&#39;impatto dei fattori di virulenza pneumococco in un acuto mouse Polmonite modello tramite batteri bioluminescenti

La risposta immunitaria dell'ospite all'infezione patogeno è un processo strettamente regolata. Utilizzando un polmone modello di esposizione lipopolisaccaride nei topi, è possibile effettuare valutazioni ad alta risoluzione dei complessi meccanismi associati alla patogenesi della malattia.

L&#39;utilizzo di orofaringea intratracheale PAMP Amministrazione e lavaggio broncoalveolare per valutare la risposta immunitaria nei topi Host

Lo Streptococcus pneumoniae forma lesioni microscopiche discrete non purulente nel cuore. Viene delineato il protocollo per un modello murino di formazione di microlesioni cardiache. Vengono fornite istruzioni sulla visualizzazione delle microlesioni mediante microscopia, sulla discriminazione tra microlesioni precoci e tardive e sui metodi per rilevare il rimodellamento cardiaco nei cuori degli animali convalescenti.

Visualizzazione<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Entro cardiache microlesioni e successive rimodellamento cardiaco

Mentre lo studio in vitro delle interazioni ospite-patogeno consente la caratterizzazione di specifiche risposte immunitarie, sono necessari modelli in vivo per osservare gli effetti di risposte complesse. Utilizzando l'esposizione a Candida albicans seguita da un'infezione polmonare mediata da Pseudomonas aeruginosa, abbiamo stabilito un modello murino di interazioni microbiche coinvolte nella patogenicità della polmonite associata al ventilatore.

Studiare comunità microbiche<em&gt; In Vivo</em&gt;: Un modello di interazione ospite-mediata tra<em&gt; Candida Albicans</em&gt; E<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; Nei Airways

Dimostriamo la procedura per l'inoculazione intra-tracheale di Haemophilus influenzae nel tratto respiratorio inferiore dei topi. Questo è uno strumento molto utile per studiare le vie di segnalazione che regolano l'infiammazione delle vie aeree nei modelli murini.

Intra-tracheale Amministrazione<em&gt; Haemophilus influenzae</em&gt; In modelli murini per studiare infiammazione delle vie aeree

Diversi metodi sono stati descritti in letteratura per modellare la polmonite batterica nei topi. Qui, descriviamo un non invasivo, economico, rapido metodo per indurre la polmonite tramite aspirazione (vale a dire, l'inalazione) di un inoculo batterico pipettati in orofaringe. metodi di valle per la valutazione della risposta immunitaria innata polmonare sono anche dettagliata.

Un metodo non invasivo e tecnicamente non intensiva per l&#39;induzione e Fenotipizzazione Sperimentale polmonite batterica nei topi

Haemophilus influenzae induce infiammazione delle vie respiratorie. Questo articolo si concentrerà sull'uso della citometria a flusso e della microscopia confocale per definire le risposte immunitarie dei fagociti e dei linfociti in risposta a questo batterio.

Valutazione delle risposte immunitarie respiratorie all'Haemophilus influenzae

Questo manoscritto descrive la creazione di un modello infettivo di polmonite nei topi e la rispettiva caratterizzazione della risoluzione delle lesioni insieme ai metodi per la crescita dei batteri e l'instillazione intratracheale. Viene inoltre descritto un nuovo approccio che utilizza la citometria a flusso ad alta dimensione per valutare il panorama immunitario.

Modello sperimentale per valutare la risoluzione della polmonite

Questo articolo descrive un nuovo modello murino per la transizione dello pneumococco da colonizzatore asintomatico a patogeno che causa malattie durante l'infezione virale. Questo modello può essere facilmente adattato per studiare le interazioni polimicrobiche e ospite-patogeno durante le diverse fasi della progressione della malattia e tra vari ospiti.

Un modello murino per la transizione di Streptococcus pneumoniae da colonizzatore a patogeno in seguito a co-infezione virale ricapitola la malattia esacerbata dall'età

Impara a colonizzare il nasofaringe murino con Streptococcus pneumoniae e a estrarre batteri e cellule immunitarie mediante lavaggio nasale. Questo metodo consente di quantificare il carico batterico e analizzare le risposte immunitarie in vivo.

Caratterizzazione delle risposte infiammatorie durante la colonizzazione intranasale con streptococco pneumoniae

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