Preparazione di idrossi-PAAM idrogel per dissociare gli effetti di meccanotrasduzione Cues

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di sviluppare una strategia semplice ed efficiente per immobilizzare qualsiasi proteina di interesse su idrogel di poliacrilammide al fine di controllare in modo indipendente vari parametri del microambiente cellulare. Ciò si ottiene diffondendo prima la soluzione proteica sulla superficie del timbro PDMS. Il secondo passo consiste nell'asciugare accuratamente la superficie strutturata del timbro PDMS con un flusso costante di azoto gassoso ad alta purezza.

Successivamente, il timbro rivestito di proteine viene posizionato con una superficie strutturata a contatto con la superficie dell'idrogel essiccato e brevi punti di pressione vengono applicati sulla parte superiore del timbro PDMS per garantire un buon contatto tra le micro caratteristiche del timbro e la superficie dell'idrogel, il passaggio finale consiste nel rimuovere delicatamente il timbro PDMS dalla superficie dell'idrogel e pulire il timbro Dopo l'azione delle zone non stampate. Con BSA, le celle possono essere posizionate sulla superficie dell'idrogel con modello micro. In definitiva, un microscopio a fluorescenza invertito viene utilizzato per osservare le micro caratteristiche delle proteine.