5 marzo 2014
L'obiettivo generale di questo studio era di dimostrare il potenziale meccanismo di contaminazione incrociata di origine alimentare patogeni Listeria monocytogenes in un ambiente deli al dettaglio. Questo metodo può essere applicato ad una varietà di ambienti diversi per monitorare la contaminazione patogeno.
L'obiettivo generale di questa procedura è dimostrare il meccanismo di contaminazione crociata del patogeno trasmesso dagli alimenti, *Listeria monocytogenes*, in un contesto di gastronomia al dettaglio. Ciò viene realizzato innanzitutto progettando una cucina simulata per gastronomia, al fine di riprodurre l'ambiente al dettaglio.
Nel secondo passaggio, la carne da salume viene inoculata con un composto fluorescente, quindi ai volontari viene chiesto di affettare, confezionare e conservare la carne rivestita nel frigorifero. Nell'ultima fase, il potenziale rischio di contaminazione crociata verrà monitorato osservando il composto fluorescente alla luce nera. In definitiva, la spettrometria può essere utilizzata per quantificare il composto fluorescente, mostrando come avviene la contaminazione crociata nell'ambiente commerciale del salumiere.
Il principale vantaggio di questa tecnica rispetto ai metodi che utilizzano microrganismi consiste nella possibilità di quantificare rapidamente il composto fluorescente mediante fotometria spettrale. Sebbene questo metodo possa fornire informazioni utili nel settore della vendita al dettaglio, può essere applicato anche ad altri sistemi, come piccole aziende agricole, impianti di lavorazione alimentare e altre operazioni di servizio alimentare. Iniziare posizionando guanti puliti e etanolo al 70% sul bancone, pronti per l'uso durante la procedura.
Quindi utilizzare un coltello pulito e un tagliere per tagliare la carne in tre campioni di spessore approssimativo di 100 millimetri. Successivamente, utilizzare una spugna pulita leggermente umida per ricoprire uniformemente un campione con della polvere fluorescente appena preparata. Quindi, avvolgere tutti i campioni con della pellicola trasparente e utilizzare del nastro adesivo per etichettare il campione ricoperto di polvere fluorescente come a e i due campioni rimanenti come b e c.
Quindi posizionare i campioni a quattro gradi Celsius e installare luci fluorescenti compatte nere con lampadine da 13 watt intorno all'area del taglia-salumi. Ritagliare un pezzo di carta stagnola di cinque per cinque centimetri da utilizzare come modello per il prelievo con tampone e riempire in questa fase delle provette da 1315 millilitri con sei millilitri di etanolo al 95%. Quindi installare tre telecamere video in posizioni strategiche per osservare contemporaneamente tutte le aree del salmone finto.
Per monitorare la contaminazione della carne da tagliere da parte della polvere fluorescente, accendere le telecamere per riprendere i partecipanti durante la procedura e scattare una foto preliminare del banco simulato sotto luce fluorescente nera. Quindi chiedere a ciascun partecipante di eseguire le seguenti operazioni. Innanzitutto, rimuovere il campione di carne contrassegnato con la lettera A dal frigorifero.
Successivamente, svolgere la carne, conservando la pellicola di plastica, e posizionare il campione sul vassoio del carrello dell'affettatrice. Fissare il campione con la morsa per la carne, quindi accendere l'affettatrice e regolare la manopola dell'indice su due. Successivamente, affettare ed erogare cinque fette di carne sulla carta da salumeria, quindi spegnere l'alimentazione e rilasciare la morsa per la carne.
Posizionare le fette di carne in un sacchetto di plastica etichettato con A, quindi avvolgere nuovamente il campione di carne e riporlo in frigorifero dopo aver prelevato i campioni B e C come appena dimostrato, successivamente alla ripresa fotografica della cucina simulata. Per quantificare la contaminazione da polvere fluorescente, posizionare il tampone sterile in foglio di alluminio su ciascuna area indicata nell'immagine. Successivamente, tamponare ogni area con un ovulo sterile in alginato di calcio, imbevuto di Etanolo al 95%, e inserire un ovulo in ciascuna delle provette contenenti Etanolo al 95%.
Vortexare accuratamente ogni provetta, quindi trasferire il contenuto in singole cuvette di vetro. Leggere l'assorbanza di ogni campione prelevato con tampone a 370 nanometri, quindi utilizzare la formula per calcolare la quantità di polvere fluorescente prelevata da ciascuna area. Infine, guardare il video per quantificare il numero di volte in cui le diverse superfici del manichino sono state toccate.
In questo esperimento rappresentativo, i volontari sono stati ripresi in video per analizzare la frequenza media di contatto manuale con diverse superfici dell'affettatrice durante la preparazione delle fette di salumi. Successivamente, diversi osservatori hanno analizzato il video e la frequenza dei contatti manuali è stata mediata. I dati indicano che, come previsto, l'impugnatura della carne, l'involucro della carne, il salume e la carta per salumi hanno presentato i tassi più elevati di contatto manuale, con una media di otto-quattordici contatti per partecipante.
Le superfici, come il frigorifero, il tavolo di presa, la pinza per la carne, la lama dell'affettatrice e le diverse componenti del vassoio di scorrimento, sono state quindi tamponate, e la quantità di polvere fluorescente presente sulle varie componenti dell'affettatrice e della cucina simulata è stata quantificata. Come appena dimostrato, come previsto. I risultati hanno indicato che i livelli più elevati di contaminazione sono stati riscontrati sul frigorifero, la presa, la pinza per la carne e le piastre posteriori.
Nel tentativo di eseguire questa procedura, è importante ricordare di accendere contemporaneamente le telecamere video per garantire che le immagini siano sincronizzate. Questo metodo può contribuire a rispondere a domande fondamentali nel campo della sicurezza alimentare, come ad esempio come avviene la contaminazione crociata, e possono essere sviluppate pratiche di formazione efficaci basate sui nostri risultati.
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Questo studio dimostra il potenziale meccanismo di contaminazione incrociata del patogeno alimentare Listeria monocytogenes in un ambiente di gastronomia al dettaglio. Viene allestita una cucina simulata per riprodurre l'ambiente al dettaglio, consentendo il tracciamento della contaminazione da patogeni.
Il monitoraggio quantitativo della contaminazione microbica in ambienti al dettaglio simulati fornisce informazioni utili per ridurre i rischi nei protocolli di sicurezza alimentare e validare strategie di controllo della contaminazione. Questo approccio consente ai team di ricerca e sviluppo di identificare i punti di contatto ad alto rischio e ottimizzare le strategie di intervento, sostenendo una previsione affidabile nella mitigazione della contaminazione. La metodologia è direttamente pertinente per le decisioni relative al portafoglio nello sviluppo della tecnologia per la sicurezza alimentare e nella valutazione del rischio di contaminazione intersettoriale.
Questo metodo di tracciamento della contaminazione integra le fasi iniziali di scoperta dei meccanismi di contaminazione fino allo sviluppo del saggio e alla validazione traslazionale nei flussi di ricerca e sviluppo per la sicurezza alimentare.