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Nanomanipolazione di Single RNA Molecole da pinzette ottiche
Nanomanipolazione di Single RNA Molecole da pinzette ottiche
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JoVE Journal Bioengineering
Nanomanipulation of Single RNA Molecules by Optical Tweezers

Nanomanipolazione di Single RNA Molecole da pinzette ottiche

Full Text
15,475 Views
06:59 min
August 20, 2014

DOI: 10.3791/51542-v

William Stephenson1, Gorby Wan2, Scott A. Tenenbaum3,4, Pan T. X. Li4,5

1Nanoscale Engineering Graduate Program, College of Nanoscale Science and Engineering,University at Albany, State University of New York, 2Nanoscale Science Undergraduate Program, College of Nanoscale Science and Engineering,University at Albany, State University of New York, 3Nanobioscience Constellation, College of Nanoscale Science and Engineering,University at Albany, State University of New York, 4The RNA Institute,University at Albany, State University of New York, 5Department of Biological Sciences,University at Albany, State University of New York

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Le pinzette ottiche sono state utilizzate per studiare il ripiegamento dell'RNA allungando le singole molecole dalle loro estremità 5' e 3'. Qui vengono descritte le procedure comuni per sintetizzare molecole di RNA per la pinzetta, la calibrazione dello strumento e i metodi per manipolare singole molecole.

L'obiettivo generale del seguente esperimento è quello di dimostrare un esperimento di dispiegamento meccanico di una singola molecola su una struttura di RNA. Nella prima fase, viene costruita una camera di flusso e montata sullo strumento. Nella seconda fase, le perle di dimensioni micron vengono mescolate con il campione di RNA di interesse, quindi le due diverse dimensioni di perle vengono caricate nella camera di flusso.

Infine, la camera di flusso e la trappola ottica possono essere utilizzate per guidare le perle in contatto l'una con l'altra per valutare una varietà di interazioni di singole molecole. In definitiva, questa tecnica di nano manipolazione può essere utilizzata per studiare il ripiegamento dell'RNA a livello strutturale secondario e terziario. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo del ripiegamento dell'RNA, ad esempio come si piega e si dispiega un RNA?

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