Mouse fetale Fegato Cultura di sistema per sezionare Funzioni gene bersaglio nelle fasi precoci e tardivi del Terminal eritropoiesi

L'obiettivo generale del seguente esperimento è quello di sezionare la funzione genica in diversi stadi dell'eritropoiesi terminale utilizzando un sistema di coltura epatica fetale di topo in vitro. Ciò si ottiene purificando prima TER uno eritroblasti epatici fetali di topo 19 negativi da topi embrionali del giorno 13,5 gravidi Come secondo passo, gli eritroblasti purificati vengono trasdotti con virus che codifica CD NA o S-H-R-N-A del gene di interesse per studiare rispettivamente il guadagno o la perdita di funzione del gene. Infine, le cellule TER 19 negative trasdotte vengono coltivate in una delle due diverse condizioni per sezionare la funzione del gene nelle fasi precoci e tardive dell'eritropoiesi terminale.

In definitiva, le diverse cinetiche del differenziamento e dell'enucleazione delle cellule trasdotte possono essere valutate mediante analisi citofluorimetrica. Quindi questo metodo può fornire informazioni sulla osisi atriale del topo. Può essere applicato anche ad altri sistemi HESI come la linfa, la osi e la miosi.