Identificazione delle coppie Kinase-substrato Usando High Throughput Screening

L'obiettivo generale di questa procedura è identificare le chinasi che fosforilano un substrato di interesse utilizzando metodi di screening ad alto rendimento. Ciò si ottiene sezionando prima le cellule con plasmidi che esprimono le chinasi FU in glutatione come transferasi o GST. Il secondo passo consiste nell'eseguire un pulldown della chinasi GST.

Successivamente, i campioni vengono caricati in gel, che vengono poi analizzati e colorati con colorante blu brillante kumasi. Il passaggio finale consiste nell'asciugare i gel ed esporli alla pellicola per autoradiografia. In definitiva, sviluppando e interpretando i film risultanti, si è in grado di identificare le coppie di substrati chinasici poiché ogni corsia è rappresentativa di un saggio chinasico distinto.