Monitoraggio celle in Zebrafish GFP-transgenico Utilizzo del sistema fotoconvertibile PSmOrange

L'obiettivo generale della tecnologia di conversione fotografica PSmOrange è quello di tracciare le cellule dell'animale vivente durante lo sviluppo embrionale e la malattia. Questo metodo può rispondere a domande chiave nella biologia dello sviluppo, come scoprire l'origine delle cellule che si sviluppano in tessuti e organi. Il vantaggio principale di questa tecnica è che può essere applicata in sfondi transgenici GFP.

Questo metodo può essere applicato anche in diversi campi di indagine come la rigenerazione, la progressione tumorale e l'invasione. Dopo aver generato e incorporato gli embrioni che esprimono PSmOrange e GFP secondo il protocollo di testo, posizionare l'embrione sotto il microscopio confocale e utilizzare l'obiettivo ad aria 20x e i laser a 488 e 561 nanometri per scansionare il campione per identificare un'area da fotoconvertire. Per rilevare la proteina PSmOrange prima della fotoconversione, utilizzare il laser a 561 nanometri a 0,74 milliwatt di potenza misurata sul piano di messa a fuoco sopra l'obiettivo e regolare la potenza del laser secondo necessità.