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DOI: 10.3791/54719-v
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Questo articolo descrive la quantificazione dell'emocitometro e delle micrografie di migrazione/invasione attraverso due nuovi plugin open-source di ImageJ Cell Concentration Calculator e Migration assay Counter. Inoltre, descrive i protocolli di acquisizione e calibrazione delle immagini e discute in dettaglio i requisiti di input dei plug-in.
L'obiettivo generale di questo protocollo è quello di utilizzare strumenti di analisi digitale per effettuare rapidamente conteggi accurati delle cellule in sospensione o in migrazione in una membrana del saggio di invasione. Questo protocollo può aiutare i ricercatori a quantificare il numero di cellule necessario per le tecniche comuni e i saggi di motilità cellulare in vitro. Il vantaggio principale di questo metodo è che fornisce conteggi cellulari rapidi e accurati, includendo al contempo più filtri e strumenti di analisi.
Per iniziare, impostare l'illuminazione del microscopio al massimo. Passa all'obiettivo 4x e assicurati che i filtri di contrasto di fase siano in uso. Quindi, all'interno del software del microscopio, impostare le impostazioni di acquisizione delle immagini sui valori predefiniti.
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