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Integrazione di estrazione miniaturizzata di fase solida e rilevazione LC-MS / MS di 3-Nitrotiros...
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JoVE Journal Chemistry
Integration of Miniaturized Solid Phase Extraction and LC-MS/MS Detection of 3-Nitrotyrosine in Human Urine for Clinical Applications

Integrazione di estrazione miniaturizzata di fase solida e rilevazione LC-MS / MS di 3-Nitrotirosina nell'urina umana per applicazioni cliniche

Full Text
9,995 Views
08:41 min
July 14, 2017

DOI: 10.3791/55778-v

Xiaoguang Sunny Li1, Shu Li1, Melissa Ahrens2, Gottfried Kellermann1,2

1Pharmasan Labs, Inc., 2NeuroScience, Inc.

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Una metodica di spettrometria di massa tandem (LC-MS / MS) cromatografica a liquido selettivo e sensibile, accoppiata con un'estrazione efficiente di fase solida su una micropiastra a 96 pozzetti di MCX, è stata sviluppata per la misura della libera 3-nitrotirosina ( 3-NT) in urine umane con un elevato throughput, che è adatto per applicazioni cliniche.

L'obiettivo generale di questa estrazione miniaturizzata in fase solida combinata con il test LC-MS/MS è quello di quantificare con precisione la 3-nitrotirosina libera nelle urine umane per applicazioni cliniche. La 3-nitrotirosina libera aiuta nelle rese e un biomarcatore per lo stress ossidativo. Tuttavia, rimarrà una sfida particolare quantificare con precisione la 3-nitrotirosina nelle emergenze biologiche per applicazioni cliniche a causa dell'insufficiente sensibilità, della selettività e delle ingombranti preparazioni dei campioni.

Questa tecnica che incorpora un'efficace estrazione in fase solida in un'interazione LC-MS/MS altamente sensibile consente una determinazione rapida, specifica e accurata di bassi livelli di 3-nitrotirosina endogena nelle urine umane senza la necessità di costituzione e LC bidimensionale. Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sull'indagine sullo stress ossidativo, può essere applicato anche ad altre condizioni patologiche come disturbi infiammatori complessi e neurodegenerativi. Le implicazioni di questa tecnica potrebbero essere estese al monitoraggio dell'efficacia del trattamento antiossidante perché il livello di 3-nitrotirosina può essere ridotto dagli antiossidanti. Per iniziare questa procedura, vorticare precedentemente preparato e scongelato campioni di urina, standard e campioni di controllo qualità.

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(LC-MS / MS) estrazione a fase solida (SPE) biomarker non invasivo stress ossidativo urina sensibilità selettività (chimica numero 125 3-Nitrotirosina (3-NT)

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