Uso di elettroforesi del Gel di agarosio detergente semi-denaturante dimensionale due per confermare dimensioni eterogeneità delle fibre amiloidi o amiloide-come

L'obiettivo generale di questa elettroforesi su gel di agarosio detergente semi-denaturante bidimensionale è confermare l'eterogeneità delle dimensioni delle fibre amiloidi o simili all'amiloide osservate durante l'SDD-AGE tradizionale. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo dell'amiloide o dell'aggregazione proteica, ad esempio se l'eterogeneità dimensionale osservata durante l'SDD-AGE tradizionale sia lo stato nativo delle fibre in vivo o il risultato della degradazione o della dissociazione delle proteine durante l'elettroforesi su gel. Il vantaggio principale di questa tecnica è che può essere eseguita facilmente in laboratorio senza attrezzature specializzate.

Non sono necessarie apparecchiature aggiuntive oltre a quelle utilizzate nell'SDD-AGE tradizionale. Innanzitutto, semina le cellule tumorali del colon HT-29 produttrici di amiloide in un piatto di coltura tissutale di 10 centimetri. Quindi, incubare le cellule per una notte a 37 gradi Celsius con il 5% di anidride carbonica.