Preparazione di nuclei cerebrali e del midollo osseo di alta qualità per saggi multiomi a nucleo singolo

L'Unità Tecnologica di Citometria e Biomarcatori supporta progetti biomedici attraverso tecnologie e pipeline all'avanguardia per la fenotipizzazione cellulare e la profilazione molecolare con risoluzione a singola cellula. In questo contesto, utilizziamo diversi strumenti per l'analisi multiomica di singole cellule per ottenere informazioni sull'espressione genica e sulla regolazione genica in salute e malattia. La citometria a flusso identifica e individua le singole cellule in base a caratteristiche uniche.

I recenti progressi includono selezionatori spettrali ad alta produttività, basati su immagini, e queste tecnologie offrono flessibilità nella progettazione del pannello, consentono l'uso simultaneo di coloranti simili e la gestione dell'autofluorescenza. Una delle principali sfide sperimentali quando si utilizzano tecnologie all'avanguardia a cellula singola è quella di lavorare con popolazioni cellulari particolarmente fragili o rare. Ogni tessuto o tipo di cellula deve essere sottoposto a un'ottimizzazione del protocollo per ottenere un numero sufficiente di cellule altamente vitali che si traducono in dati di sequenziamento di alta qualità.

Il nostro protocollo di preparazione dei singoli nuclei modificato migliora il recupero dei nuclei e riduce al minimo lo stress sui nuclei. È specificamente ottimizzato per i tessuti cerebrali e del midollo osseo e copre tutte le fasi, dalla dissociazione del campione alla purificazione dei nuclei.