Name: Metodo ad alto rendimento per losservazione dei fenotipi di motilità in Pseudomonas aeruginosa (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-20T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 23 s
Description: Scopri un metodo ad alto rendimento per analizzare la motilità in Pseudomonas aeruginosa utilizzando librerie di mutanti transposoni. Questo protocollo consente di identificare fattori genetici coinvolti nel nuoto e nel twitching.

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<ol><li>Burrows, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudomonas+aeruginosa+twitching+motility%3A+type+IV+pili+in+action%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Pseudomonas aeruginosa twitching motility: type IV pili in action.</a> Annu Rev Microbiol. 66, 493-520 (2012).</li>
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<li>Rasmussen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+screening+assay+for+inhibitors+of+bacterial+motility+identifies+a+novel+inhibitor+of+the+Na%2B-driven+flagellar+motor+and+virulence+gene+expression+in+Vibrio+cholerae%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrob+Agents+Chemother%22%5BJournal%5D)">A high-throughput screening assay for inhibitors of bacterial motility identifies a novel inhibitor of the Na+-driven flagellar motor and virulence gene expression in Vibrio cholerae.</a> Antimicrob Agents Chemother. 55 (9), 4134-4143 (2011).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>96 piastre di pozzo&nbsp; &nbsp;</td><td>Corning&nbsp; &nbsp;</td><td>3701&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Agar&nbsp;</td><td>Fisher Scientific&nbsp; &nbsp;</td><td>BP1423-2&nbsp;</td><td>Concentrazione finale dello 0,5% per la motilità dello sciami o dell'1% per la motilità del tremolamento rispettivamente.</td></tr><tr><td>Casaminoacidi &nbsp; &nbsp;</td><td>Fisher Scientific&nbsp; &nbsp;</td><td>223050&nbsp;</td><td>Prepara una scorta al 20% in acqua. Il filtro sterilizza con 0,22 e mu; m filtrare e conservare a 4 °C. Concentrazione finale 0,5% in mezzo minimo M9.</td></tr><tr><td>Viola cristallino&nbsp;</td><td>Bio Basic&nbsp; &nbsp;</td><td>CB0331</td><td>Prepara una soluzione all'1% in acqua.</td></tr><tr><td>D-Glucosio&nbsp; &nbsp;</td><td>Bio Basic&nbsp; &nbsp;</td><td>GB0219&nbsp;</td><td>Prepara un stock al 20% (1,1 M) in acqua e sterilizza tramite autoclaving. Concentrazione finale 0,2% in M9 medium minimo. &nbsp;</td></tr><tr><td>Filtropur S 0.2&nbsp;</td><td>Sarstedt&nbsp;</td><td>83.1826.001</td><td></td></tr><tr><td>Gentamicina solfato &nbsp; &nbsp;</td><td>Bio Basic&nbsp; &nbsp;</td><td>GB0217&nbsp;</td><td>Prepara un brodo da 30 mg/ml in acqua. Il filtro sterilizza con 0,22 e mu; Filtro e conservazione a 4 gradi M; C & ndash; Concentrazione finale nelle tavole 15 & micro; g/mL.. &nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>Inoculazione dell'Ancio e dell'Ago&nbsp;</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>22363597</td><td></td></tr><tr><td>M9 Sali Minimi, 5X&nbsp;</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>248510</td><td>Prepara un stock da 1 milione in acqua e sterilizzalo con autoclave. Concentrazione finale 1 mM in mezzo minimo M9. & nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>Solfato di magnesio (MgSO4)&nbsp; &nbsp;</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>M63-500</td><td>&nbsp; Prepara un stock di MgSO4 da 1 M in acqua. Il filtro sterilizza con 0,22 e mu; Filtro M e conserva a temperatura ambiente. Concentrazione finale &nbsp;</td></tr><tr><td>PA14 Inserimento Trasposone Mutante Libreria&nbsp; &nbsp;</td><td></td><td>Liberati et al., 2006 (vedi riferimento 29)</td><td>59 lastre da 96 pozzi per l'intera collezione. Ogni pozzo contiene un singolo mutante in LB con il 25% di glicerolo.</td></tr><tr><td>Placca di Petri 92x16mm&nbsp;</td><td>Sarstedt&nbsp;</td><td>82.1473.001</td><td></td></tr><tr><td>PhenoBooth+&nbsp;</td><td>Strumenti cantanti & nbsp;</td><td>https://www.singerinstruments.com/solution/phenobooth/specification/&nbsp;</td><td>Dissolvere 11,3 g della polvere in 200 mL di acqua purificata. Autoclave a 121 & deg; C per 15 min. & nbsp;</td></tr><tr><td>Siringa di plastica 10 mL&nbsp;</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>14955459</td><td></td></tr><tr><td>Rotor+&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>Strumenti cantanti & nbsp;</td><td>https://www.singerinstruments.com/resource/rotor-had/&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Short pin RePads 384 densità&nbsp;</td><td>Strumenti cantanti & nbsp; &nbsp;</td><td>REP-004&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Short pin RePads 96 densità &nbsp; &nbsp;</td><td>Strumenti cantanti & nbsp; &nbsp;</td><td>REP-002&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro di Sodio (NaCl)&nbsp; &nbsp;</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>BP358-212&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Replicatore a molla a 96 pin</td><td>EnzyScreen&nbsp; &nbsp;</td><td>CR1000&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Lama chirurgica in acciaio inox n. 25&nbsp;</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>08-918-5F</td><td></td></tr><tr><td>Triptone & nbsp;</td><td>Oxoid&nbsp; &nbsp;</td><td>LP0042B&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Targhe Uniwell</td><td>Strumenti cantanti & nbsp; &nbsp;</td><td>Piastre Plus: PLU-003&nbsp; &nbsp;</td><td>Dimensione della placca: 54 e più volte; 34 e volte; 38 cm - senza pareti interne, che offrono dimensioni interne maggiori.&nbsp;</td></tr><tr><td>Targhe Uniwell</td><td>VWR</td><td>Piastre di coltura tissutale a pozzo singolo: 75780-348</td><td>Stesse dimensioni delle PlusPlate.</td></tr><tr><td>Estratto di lievito & nbsp;</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>248510&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

metodo ad alto rendimento per l'osservazione dei fenotipi di motilità in pseudomonas aeruginosa

High-throughput Method for Observing Motility Phenotypes in Pseudomonas aeruginosa

Metodo ad alto rendimento per l'osservazione dei fenotipi di motilità in Pseudomonas aeruginosa

Motility behaviors often play a significant role in the ability of a bacterium to exploit the resources available in its environment. This is particularly ...

high-throughput-method-for-observing-motility-phenotypes-pseudomonas

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