多電極アレイを用いた3D共培養球のシナプス生理機能の測定

標的細胞の電気的活動を記録するデバイスである滅菌多電極アレイ(MEA)を考えてみましょう。

MEAにポリマー溶液を加えてインキュベートします。

ポリマーはMEAの表面をコーティングし、それによって表面の吸水性を高めます。

余分なポリマーを取り除き、脱イオン水で洗浄します。

細胞外マトリックス(ECM)を加え、インキュベートしてMEAをコーティングします。余分なECMを取り除きます。

次に、ニューロンとアストロサイトを含む3D共培養球体を適切な培地に加えます。

球体がMEAの表面に付着するようにインキュベートします。

MEAをMEAシステムの温度制御されたヘッドステージに置き、電極全体の自発的な電気的活動を記録します。

測定された電気的活動は、球体内の神経接合部での通信に対応します。

まず、各多電極アレイまたはMEAの表面を1ミリメートルのポリオルニチンでコーティングして表面を親水性にし、摂氏37度で最低4時間インキュベートします。インキュベーション後、ポリオルニチンを除去し、各MEAの表面を脱イオン水で洗浄します。次に、1ミリリットルの細胞外マトリックスを加え、インキュベーターに戻して最低4時間放置します。

準備ができたら、細胞外マトリックスを取り除き、球体を 1.5 ミリリットルの培地で MEA 表面に塗布し、球体が電極アレイの上に配置されていることを確認します。2日間付着させます。神経球の電気的活動を測定するには、MEAを温度制御されたヘッドステージに置きます。