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背側の毛を取り除いた麻酔をかけたマウスから始めます。
角膜の乾燥を防ぐために軟膏を塗ります。
ベタジンとエタノールを使用して皮膚を順次滅菌します。
切開部位に局所麻酔を注入します。
最後に浮いている肋骨を特定して、胸椎またはT13椎骨を見つけます。次に、椎骨 T8-T12 を特定し、正中線切開を行います。
傍脊椎筋にアクセスするために皮下脂肪組織を除去します。
これらの筋肉をクリアして椎板を露出させます。
T9-T10椎骨の椎弓板を解剖して脊髄にアクセスします。
脊髄を完全に横断して、脊髄損傷またはSCIを誘発します。
脊髄を保護するために、手術部位に皮下脂肪片を置きます。
筋肉と結合組織を縫合し、皮膚切開部を閉じます。
SCI マウス モデルは、さらなる研究の準備が整いました。
動物を麻酔し、眼科用軟膏を角膜に塗布して、外科手術中の目の乾燥を防ぎます。次に、動物の皮膚をベタジンスクラブと70%エタノールでそれぞれ3回こすります。
切開する前に、25ゲージの針が付いた注射器を使用して、鎮痛剤として切開部位の周囲に100マイクロリットルの0.125%ブピビカインを注入します。T13に対応するフローティングリブからカウントバックして、T8からT12を識別します。T8からT12椎骨のレベルで背中の正中線に沿って1〜1.5センチメートルの切開を行った後、皮下脂肪組織を取り除いて傍脊髄筋にアクセスします。そして、それらをゆっくりと解剖して、両側の棘突起と薄板を露出させます。
過度の出血や脊髄の損傷を避けるために、この手順を非常に慎重に行うことが非常に重要です。
T9 から T10 椎骨の椎弓切除術を行い、顕微解剖鉗子を使用して脊髄層をそっと剥がすことにより、脊髄を露出させます。鉗子を使用してT8で脊柱を固定して持ち上げ、脊椎の湾曲を誇張します。次に、細いはさみを使用して、T9椎骨とT10椎骨の間の脊髄を椎管の床まで切り取り、完全な切断を確実にします。
手術用顕微鏡で完全な切断を観察した後、椎弓切除部位に皮下脂肪片を塗布して、手術部位を閉鎖する前に脊髄をさらに保護します。最後に、傷を閉じ、傍脊椎筋と表在筋膜を縫合します。次に、縫合糸クリップを使用して皮膚を閉じます。
