A Versatile Automated Platform for Micro-scale Cell Stimulation Experiments

Anupama Sinha; Mais J. Jebrail; Hanyoup Kim; Kamlesh D. Patel; Steven S. Branda

doi:10.3791/50597

JoVE Journal
Bioengineering

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Bioengineering

A Versatile Automated Platform for Micro-scale Cell Stimulation Experiments

マイクロスケール細胞刺激のための実験のための多目的自動化プラットフォーム

Full Text

11,091 Views

12:21 min

August 6, 2013

DOI: 10.3791/50597-v

Anupama Sinha¹, Mais J. Jebrail², Hanyoup Kim^2,3, Kamlesh D. Patel⁴, Steven S. Branda²

¹Department of Systems Biology,Sandia National Laboratories, ²Department of Biotechnology and Bioengineering,Sandia National Laboratories, ³Canon U.S. Life Sciences, ⁴Department of Advanced Systems Engineering and Deployment,Sandia National Laboratories

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

我々は、マイクロスケール細胞刺激実験のために自動細胞培養と尋問プラットフォームを開発した。プラットフォームは、栽培と細胞の小集団を刺激し、分子解析のための溶解物の回収で、シンプルで汎用性の高い、かつ正確なコントロールを提供しています。プラットフォームはよく貴重な細胞および/または試薬を使用した研究に適しています。

この手順の全体的な目標は、半自動のマイクロ流体ベースのプラットフォームを組み立てて使用し、細胞の小さな集団を培養および刺激し、分子分析のための細胞溶解物を回収することです。これは、まず、細胞灌流チャンバーと呼ばれるフィブロネクチン被覆マイクロキャピラリーでマイクロスケールの細胞培養を確立することによって達成されます。2番目のステップは、灌流チャンバーをデジタルマイクロ流体またはDMFモジュールに接続することで、マイクロスケールの細胞培養との間で試薬をルーティングする柔軟な手段を提供します。

次に、DMFモジュールが目的の刺激を灌流チャンバーに送達し、細胞は所定の曝露時間、刺激とともにインキュベートされます。最後に、細胞を化学的手段で溶解し、ライセートを分子分析のためにDMFモジュールに回収します。次に、回収されたライセートを定量的R-T-P-C-Rを使用して分析し、刺激に対する細胞集団の転写応答を特徴付けます。

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos