Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

Elisabeth M. Meulenbroek; Diana Wouters; Sacha Zeerleder

doi:10.3791/51161

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

赤血球上の抗体誘導性補体活性化の定量的検出のための方法

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06:29 min

January 29, 2014

DOI: 10.3791/51161-v

Elisabeth M. Meulenbroek¹, Diana Wouters¹, Sacha Zeerleder^1,2

¹Department of Immunopathology, Sanquin Research and Landsteiner Laboratory Academic Medical Center,University of Amsterdam, ²Department of Hematology, Academic Medical Center,University of Amsterdam

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、赤血球に対する抗体により誘導される補体活性化を測定するための2つのアッセイを記載する。現在のアッセイ以上の主要な利点は、それらの定量的かつ簡単に解釈する性質である。

次の実験の全体的な目標は、患者の血清中の赤血球または赤血球に対する抗体による補体の活性化を評価することです。これは、ブロッキング抗C 5抗体の存在下で赤血球を患者血清とインキュベートし、RBC表面にC 4およびC3の沈着を誘導することによって達成されます。次に、赤血球を蛍光標識された抗C four抗体および抗C3抗体で染色し、赤血球上の補体沈着量を別の方法でフローサイトメトリーで分析できます。

RBCは、抗C 5の非存在下で患者血清とインキュベートされ、補体媒介溶解を誘導します。溶解された赤血球の割合は、細胞から放出されるヘモグロビンの量を分光法で測定することで決定できます。溶血や日常的な診断で使用される抗グロブリン検査などの既存の方法に対するこの新しい手法の主な利点は、本質的に定量的であり、補体活性化の最適でない違いを検出できることです。

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