Name: 開発 in vitroでモデル系エクウス caballusのIgE (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-11-01T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 31 s
Description: 学ぶ、IgE依存性メディエーター遊離を測定するアッセイ法。ラット好塩基球性白血病細胞に馬FcεRIα遺伝子を導入し、アレルギー反応のメカニズム解明と治療法開発に貢献する。

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著者は、アドバイスと実験施設を提供してくださったリンダ・パートリッジ博士に感謝します。

細胞株の1）準備： <ol><li>馬のFcεRIαを表現するRBL-2H3.1細胞株の開発： <ol><li>単層細胞株についての基本的な組織培養技術を用いて、pEE6プラスミドを使用して、親RBL-2H3.1細胞をトランスフェクト、ウマFcεRIα遺伝子（GenBank：Y18204.1）を有する28。 1.2×10 7細胞ml -1の濃度で細胞の0.8ミリリットルにプラスミドDNA2μgのμlの-1を追加します。その後すぐに氷上で10分間インキュベート0.4cmのelectrocuvetteを使用して、250V、960μFで細胞をエレクトロポ。 </li><li>その後、蛍光IgE抗体とそれらをタグ付けすることによって、FACSを通して残りの生きた細胞をソートし、ジェネティシンG418硫酸0.4グラムを含む培地を使用して形質転換細胞を選択します。捜査2、3のための馬FcεRIα細胞株を発現している結果としてRBL-2H3.1を使用してください。 </li></ol></li><li>プレ検定抗体感作性： <ol><li>5細胞mlの細胞密度に培養培地中に再懸濁細胞を、その後洗浄する-1。 </li><li> 1 ngのml -1の最終的な濃度に懸濁した細胞への関心のIgEを追加した列1-6で96ウェルプレートに100μlの細胞をプレートし、37℃+ 5％CO 2 + 90％でインキュベート16時間、相対湿度。インキュベーション時間の後、および放出アッセイを行う前に、ウェルの集密度及び細胞接着のために顕微鏡下で、ウェルをチェックしてください。 </li></ol></li></ol> 2）放出アッセイ： <ol><li>細胞を洗浄する。 <ol><li>穏やかな細胞洗浄を可能にするために、37℃の温放出緩衝液（25mMのPIPES、120mMの塩化ナトリウム、5mMの塩化カリウム、0.04 mMの塩化マグネシウム、および1mM塩化カルシウム）。 </li><li> 、細胞培地を除去するためにプレートをフリックと暖かい100μlを加えることにより、細胞を洗浄37℃で、放出緩衝液。二回繰り返します。 </li></ol></li><li>抗原チャレンジ： <ol><li> 0.1、0 ngのmlと-1の抗原の段階希釈（NIP-HSAまたはDNP-HSA）を調製NGミリリットル-1、1 ngのmlで-1、10 ngのmlを-1、100 ngのmlで-1、千ngのミリリットル-1 10,000 ngのリリース·バッファ内ミリリットル-1および37℃で温めて。 </li><li>第二の細胞の洗浄後、メディアを破棄し、抗原溶液100μlで置き換え。同じ行のウェル（例えばA1-6）が同じ抗原濃度がそれらに追加されていることを確認してください。 </li><li> 0 ngのml -1の抗原を添加することにより、行Aにおける負の制御を設定します。陽性対照として使用する細胞を溶解するために、行H細胞におけるトリトン緩衝液（5％トリトンX-100）に続く行（BG）ダウン増大抗原濃度を追加する。細胞がそのメディエーターを放出できるように20分間37℃でインキュベートする。 </li></ol></li><li>個々のウェルコントロールの設定： <ol><li>インキュベーション後、プレートのもう半分（井戸A1-6井戸A7-12へ、等）への細胞上清50μlを移す。上清の残りを50μlを破棄して、列1-6のセル内の全メディエーターの割合として列7-12に各ウェルにリリースメディエーターの量の測定を可能にするためにトリトン-X緩衝液50μlと交換。 </li></ol></li><li>酵素基質： </li><li> 50（クエン酸緩衝液に添加することにより2mMのにまで希釈されたDMSO中で調製した50 mMの4-ニトロフェニルN-アセチルβ-Dグルコサミニド0.2 Mクエン酸、0.2 M酢酸ナトリウム、pH 4.5）βヘキソサミニダーゼ基質のμlを添加するすべてのウェルにβヘキソサミニダーゼ酵素による4-ニトロフェノールへの基質の変換を容易にします。 2時間、37℃でプレートをインキュベートする。 </li></ol><img alt="図2.4.1" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/52222/52222fig241.jpg" widt><ol start="5"><li>反応を停止する。 <ol><li>各追加150μlのトリス緩衝液（1 Mトリス-HCl、pHを9）により反応を停止ならびに緩衝液の高いpHは、反応を停止させ、黄色に4-ニトロフェノールをオン。 </li></ol></li><li>結果を読み込むと分析する： <ol><li>黄色の吸光度を測定するために405nmでプレート分光光度計を用いてプレートをお読みください。以下の式を用いて放出βヘキソサミニダーゼの割合を算出した。 </li></ol></li></ol><img alt="図2.6.1" fo:content-width="1in" src="/files/ftp_upload/52222/52222fig261.jpg" width="100"><ol start="2"><li>平均値を行ごとに取得された後、各ウェルにこの数式を適用します。 A1およびA7が96ウェルプレートのウェルの位置を表す。 agai（総メディエーター放出に相当）βヘキソサミニダーゼ放出の割合のグラフをプロットします抗原濃度2,3 NST。 </li></ol>

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</ol>

著者らは、この論文に競合する金銭的利益はないことを宣言します。

要約すると、この調査の結果は、馬FcεRIαを表現するRBL-2H3.1細胞は馬のIgEで感作し、抗原によって挑戦されたとき、彼らは内部のメディエーターの合計量の4.88パーセント±36.68パーセントのピークメディエーター放出を与えることを示した馬FcεRIαを発現していないRBL-2H3.1親細胞に比べて細胞、。 したがって、このアッセイは、in vitroでの馬のアレルギー反応を調査し、研究するための有用なツールを提供します。そのことができ、従って、肥満細胞/好塩基球系統の細胞によって放出さメディエーターの量の測定は、アレルギーを引き起こす物質を評価すること、またはIgE /受容体遮断薬を研究するかどうか、馬アレルギーの研究を進めることが期待できる。 このアッセイは、同じ目的のためにヒトおよびイヌのアレルギー4529を研究するためにそれを使用して、以前の出版物からの馬のアレルギーを研究するために変更されました。操作された細胞株人間と犬のFcεRIαを表現sがこのようなIgE /受容...

アレルギーは、数千年前から知られている。喘息治療はエーベルス·パピルス（〜1550 BCE）として知られている古代エジプトの医学のテキストで説明して7を治療するための薬草療法を検討した。 今日アレルギーはTヘルパー細胞2型（TH 2）免疫系のアームはアレルゲンと呼ばれる、環境抗原に応答して、免疫グロブリンE（IgE）抗体の産生を操縦するI型過敏性反応、に分類される。 IgEの合成を高めるタバコの煙やディーゼル排気微粒子中の粒子がそうであるように、これらは9、インターロイキン-4およびインターロイキン13 8を含む一般的に免疫系の細胞と相互作用し、炎症誘発性サイトカインの合成および分泌を刺激する多様な物質である10。 過去50年間で先進国におけるアレルギー症状の上昇はの効果の組み合わせに起因している「衛生仮説」11によって提案されたように、TH 2サイトカインによって支配プロファイルに対する免疫応答をシフトするために組み合わせる環境汚染物質、より衛生的な環境へのトレンド、。 上述したように、人間がアレルギーに悩まさ唯一の哺乳類ではありません。注目すべき馬と犬はまた、古典的なアレルギー反応を開発することができますし、12の調査によると、人間のように、馬アレルギーは遺伝的要因と環境的要因に起因する、ことを示している。結果として、これらの動物は、一度臨床症状がで設定したアレルギーの遺伝的および環境的な原因、病気への感作からの進行、および可能な介入戦略との間の相互作用を研究するための優れたモデルを提示 1887年に、Stömmerは、馬の心血管系に対するヒスタミンの効果がある、人間と馬の喘息13の間の類似性を記述した最初の人だった人間14のものと非常に類似している。馬はまた、年間15米1150億ドルの賭け売上高は720億ドル、米国の価値がある競馬産業の礎である。 ほとんどの現代的な競走馬以降1878からレディアン·ブラントによって繁殖アラビア馬の数が少ないの子孫である。現代の競走馬は、一般的にパフォーマンス能力を選択するために近交系されている。彼らは、アレルギー反応をマウントするそれらの感受性であるそのうちの一つ、遺伝性疾患になりやすいです。彼らはまたも、最も深刻なアレルギー人間16よりも1000倍高い血清IgEレベルを持っている。馬アレルギー反応は、通常、虫刺され過敏症（IBH）17、18として明示されている。IBH結果は皮膚炎に起因刺されに属ヌカカで昆虫を形成する。ウマのアレルギー性​​疾患の別の形態は、これは肺と気道で明らかにされて、再発性気道閉塞（RAO）である。それは、喘鳴やラボによって特徴づけられるOR演算呼吸。 RAOは、一般的に胞子を成形することに応答して発生し、別の調査がこの20を確認していないが、高アレルゲン特異的IgEレベルは、一つの研究19にRAOに罹患している馬に記録された。 ウマアレルギーに関する研究の試みモニタリングにおける、および抗ウマのIgEモノクローナル抗体（mAb）21,22を開発することによって、馬のIgEを中和することを中心に展開し、さらに23による研究では、馬の高親和性Fc受容体のαの細胞外ドメインの生産を議論ウマ血清IgEを検出し、定量する試みで、チェーン（FcεRIα）受容体。 Ledin 24による関連研究では、自己/非自己免疫原を使用して免疫系をプライミングすることにより、血清IgEを中和することを目的とした新しいアプローチについて説明します。すべてのこれらの研究は、しかし、それらのプロトコルの安全性と有効性を試験するための効果的なアッセイを欠いていた。この記事では、我々は今そのようなアッセイsysを提示βヘキソサミニダーゼ放出馬システム、関連する診断および治療戦略の研究に適用可能なTEMは、細胞メディエーターの脱顆粒の指標として、ウマFcεRIαを表現するRBL-2H3.1細胞で評価した。このプロトコルは、異なる種由来のIgEに対する高親和性受容体のIgE結合ドメインをコードする遺伝子でトランスフェクトしたRBL細胞の工学を記述する先の刊行物25、4、5、2、3に基づいている。プロトコルは、結果は、三連の実験の平均値±標準偏差として提示されているβヘキソサミニダーゼ放出アッセイを実行する方法について説明します。 放出アッセイは、最初Siraganianによって開発され、人間のアレルギーを研究するために25をフックした。博士ルーベンSiraganian率いる研究室グループは、RBL細胞株を開発した。これらのRBL細胞は、ヒトFcεRIαを表現するために開発され、プロトコルが4によって出版された。最後のピースアッセイのハプテン4-ヒドロキシ-3-を標的IgEの可変領域をマウス遺伝子の下流に、その重鎖遺伝子をクローニングすることにより、IgE抗体の産生を記載しノイバーガー26の論文でのpSVプラスミドの開発に付属 - ニトロフェナセチル（NP）、得られたキメラ抗体は、完全に機能した。また、RBL細胞の表面上のその受容体をクローニングしながら、同じハプテンを対象とした全てのIgEを開発する能力は、好塩基球細胞の脱顆粒を測定するための有用なプロトコル作るアッセイの標準化をもたらした。 アッセイは、長所と短所を持っています。このアッセイの利点は、任意の哺乳動物系で使用される適応性である、我々の研究室は、ヒト、イヌおよびウマのシステムにおいて脱顆粒をテストするためにそれをこのように使用されており、これは、生物のIgEの合成およびその受容体をクローニングすることによって、単純に達成可能であるRBL細胞の表面上に。 一方、アッセイの短所は、RBL細胞は、それらを同じアッセイ内の脱顆粒のレベルの変化を与えること、熱的、機械とPH変化に非常に敏感であるということです。それは、このように強くアッセイは常に三重に繰り返された後、平均がそれらから取られることをお勧めします。また、RBL細胞は、彼らのメンテナンスが煩雑になっ、延長時間（&gt; 10週間）27組織培養で残っている場合、非放出表現型へシフトする傾向がある。彼らはまた、光学顕微鏡からは見えませんし、細胞の形態を変化させないマイコプラズマ細菌による感染症になりやすいですが、劇的に彼らの脱顆粒レベルを変更します。このように定期的なマイコプラズマ試験が必要とされている。

<table><tbody><tr><td>RBL-2H3.1馬Fc&epsilonを発現する;RI&alpha;</td><td>-</td><td>-</td><td>実験室で生産</td></tr>された<tr><td>馬IgEの反NIP-HSA</td><td>-</td><td>-</td><td>実験室で作り出</td></tr>された<tr><td>96の井戸の版</td><td>のΣ</td><td>CLS3595</td><td>-</td></tr><tr><td>多チャンネルのピペット</td><td>Anachem</td><td>-</td><td>-</td></tr><tr><td>インキュベータ</td><td>ーギャラクシーR</td> <td>-</td><td></td></tr><tr><td>-4Hydroxy-5-ヨード-3-ニトロフェニル酢酸</td><td>ケンブリッジの研究の生化学</td>品<td>N-1070-1</td><td>NIP-OHは、実験室でNIP-HSAを作るためにヒト血清アルブミンと結合された</td></tr><tr><td>ジニトロフェニル ヒト血清アルブミン</td><td>シグマ</td><td>A6661</td><td>略称DNP-HSA</td></tr><tr><td>プレート分光光度計</td><td>Anthos Labtec HT2</td> <td>-</td><td></td></tr> <tr><td>パイプ</td><td>シグマ</td><td>P1851</td><td>-</td></tr><tr><td>塩化ナトリウム</td>シ<td>グマ</td><td>S7653</td><td>-</td></tr><tr><td>塩化カリウム</td><td>シグマ</td><td>P9333</td><td>-</td></tr><tr><td>塩化マグネシウム</td><td>シグマ</td><td>M2670</td><td>-</td></tr><tr><td>塩化カルシウム</td><td>シグマ</td><td>C1016</td><td>-</td></tr><tr><td>トリトン x100</td><td>シグマ</td><td>X100-4</td><td></td></tr><tr><td>-ニトロフェニル N-アセチル -&β;-D-グルコサミニド</td><td>シグマ</td><td>N9376</td><td>「ヘキソサミニダーゼ」というストック溶液は、DMSO</td></tr><tr><td>ジメチル スルホキシ</td>ド <td>シグマで調製された 50mM でした</td><td>D2650</td><td>-</td></tr><tr><td>クエン酸</td><td>シグ</td><td>マ251275</td><td>-</td></tr><tr><td>酢酸ナトリウム</td><td>シグマ</td><td>S7670</td><td>-</td></tr><tr><td>トリス</td><td>シグマ</td><td>T5941</td><td>-</td></tr></tbody></table>

開発 in vitroでモデル系エクウス caballusのige

Development of an in vitro model system for studying the interaction of Equus caballus IgE with its high-affinity receptor Fc&#949;RI

IgEとその高親和性Fc受容体（FcεRI）との相互作用とそれに続く抗原性チャレンジは、IgE媒介性アレルギー反応の主要な経路です。IgEとFcεRIの間の高い親和性結合とB細胞によるIgEの連続的な産生の結果として、アレルギーは通常生涯を通じて持続し、現在のところ恒久的な治療法はありません。馬、特に競走馬は一般的に近親交配されており、哺乳類の一種であり、過敏反応を発症する傾向が非常に強く、パフォーマンスに深刻な影響を与える可能性があります。馬のアレルギー感作に対する生理学的反応は、人間と犬で観察されたものを反映しています。この論文では、ウマ系に関連するアレルギー反応のメディエーターの放出を定量的に評価するためのin situアッセイシステムの開発について説明します。この目的のために、ウマFcεRIαをコードする遺伝子を親ラット好塩基球白血病(RBL-2H3.1)細胞にトランスフェクションし、表面上に発現させました。トランスフェクションされたウマα鎖の遺伝子産物は、内因性ラットβ鎖およびγ鎖1と機能的な受容体複合体を形成した。得られたアッセイシステムは、ウマIgEによる感作および抗原チャレンジ後のウマFcεRIαトランスフェクトRBL-2H3.1細胞から分泌されるメディエーターの量の評価を容易にしましたβ-ヘキソサミニダーゼ放出を読み取り値として使用します2、3。メディエーターの放出は、抗原の100 ng ml-1で36.68%±4.88%でピークに達しました。このアッセイは、ヒトおよびイヌのアレルギー反応の研究に使用された以前のアッセイから改変されたものである4, 5。また、このタイプのアッセイシステムは、診断ツールの開発やアレルギー疾患における潜在的な治療介入戦略の安全性評価に複数の用途があることも示しました6、2、3。

親RBL-2H3.1細胞およびウマFcεRIα受容体遺伝子でトランスフェクトされたものが最初にマウスIgE抗DNP-HSAで感作し、DNP-HSA抗原でチャレンジした。マウスIgEは、両方の細胞株における内因性ラット受容体に結合し、したがってメディエーター（ 図1 A）を放出するために、両方の細胞株の放出生存度を試験するための対照として働く。これは重要な検査であり、細胞培養における延長（&gt; 10週間）経過時に、RBL-2H3.1細胞を非分泌表現型27に向かってドリフトするので、日常的に行われるべきである。馬FcεRIα受容体を発現する細胞は、5.76パーセント±45.99パーセントのピークメディエーターの放出を有していた親細胞が、4.79パーセント±51.54パーセントのピークメディエーターの放出を支持した。その後馬のIgE抗NIP-HSAで感作し、NIP-HSA抗原（ 図1B）でチャレンジし、これらの同じ細胞株。親細胞があるので、メディエーター遊離を受けなかった馬IgEは、内因性ラット受容体に結合しない。馬のIgE抗NIP-HSAで感作し、...

現在の研究は、ウマのFcεRIα遺伝子を持つラット好塩基性白血病細胞のトランスフェクションに基づく遺伝子操作アッセイシステムの開発と応用を説明しています。トランスフェクションされた細胞は、アレルギー反応のメディエーターの放出がIgEと抗原によって活性化される機能的な受容体を発現します。

開発 in vitroでモデル系エクウス caballusのIgE

The interaction of IgE with its high-affinity Fc receptor (Fc&#949;RI) followed by an antigenic challenge is the principal pathway in IgE mediated ...

次の実験の全体的な目標は、RAD 好塩基球白血病細胞からの IgE 依存性メディエーター放出の量を測定することです。アレルギー症状は、ヒスタミンなどのメディエーターの放出によって引き起こされます。さて、ヒスタミンは好塩基球によって放出される唯一のメディエーターではなく、肥満細胞です。これらの細胞によって放出されるすべてのメディエーターの合計は、即時および遅延型の過敏症の徴候と症状をもたらします。現在、アレルギーに苦しんでいる生物は人間だけでなく、犬や馬も同様に苦しんでいます。研究をさらに発展させ、ワクチンなどのアレルギーに対する治療法を見つけるためには、研究治療から放出されるメディエーターの量(存在する場合)を定量化するための放出アッセイが必要です。これが、このリリースアッセイの理由です。RBLメディエーターリリースのヒトシステム用アッセイは、1986年にIanとHookによって初めて開発され、発表されました。その後、DOCシステム用に開発され、現在は馬用システム用に開発されました。修飾は、目的のタンパク質を変更するのと同じくらい簡単です。細胞株のニュースは、ラット・バソ白血病またはRBLの2つのH 3.1細胞株で、ウマの高FNT ffcセリンR1受容体のアルファ鎖を500, 000細胞/ミリリットルの細胞密度に発現していました。目的のIgE抗体を、1ミリリットルあたり1ナノグラムの最終濃度まで添加します。100マイクロリットルの混合物を96ソイルプレートに加え、37度で16時間インキュベートします。これにより、細胞がウェル表面に接着し、抗体がその受容体洗浄に結合します。残りの未結合抗体と死細胞を含む培地の2倍に、100マイクロリットルの温かい37度の放出バッファーを加えます。最後の洗浄から緩衝液を廃棄し、目的の濃度で目的の抗原100マイクロリットルと交換します。37°Cで20分間インキュベートした後、放出メディエーターを含む50マイクロリットルのSUPナチンを新しいウェルに移し、残りの上清を50マイクロリットルのTriton Xバッファーに交換して細胞を結合し、残りのメディエーターを細胞内に放出します。200万モルベータhxの50マイクロリットルで。基質をクエン酸緩衝液に溶解する日が数日。37度で2時間のインキュベーション後、各ウェルに150マイクロリットルのトリスバッファーを加え、ウェルを黄色に変えます。16時間後に405ナノメートルで色吸光度を測定します。放出アッセイバッファー(別名Ian Buffer)を37°Cで温めます。また、放出バッファー中の抗原の濃度勾配を濃度で調製します。ゼロ0.1 1 10、100、1000および10、000ナノグラム/ミリリットル。その後、37度で温まります。皿をすばやくフリックしてメディアを取り出し、ウェルの壁に向かって100マイクロリットルの温かい放出バッファーをそっと追加して、ウェルを洗います。これは、温度差による細胞ストレスを軽減し、メディエーターを早期に放出させるためです。皿は二度洗う必要があります。最終放出バッファーを廃棄し、100マイクロリットルの抗原を洗浄して追加し、ネガティブコントロールのA列の抗原濃度ゼロから始めて、B列からG列への濃度勾配を下り、最後にTriton Xスライス、H列のバッファーH.That.That's for positive control.プレートを37度で20分間インキュベートします。これは、インキュベーション期間後に細胞がメディエーターを放出するポイントです。各ウェル内の液体50マイクロリットルをそれぞれのウェルに移します。カラム 7 から 12 で、1 から 6 の位置に残った液体を完全に排出して廃棄し、50 マイクロリットルの Triton X 溶解バッファーと交換します。準備した基質の50マイクロリットルを皿の96ウェルすべてに加えます。37度で2時間インキュベートします。ベータHは、何日も基質を4つのニトロフェノールに逆転します。インキュベーション期間後、150マイクロリットルのトリスバッファーを追加して反応を停止し、4つのニトロフェノールを黄色に変えます。405ナノメートルのプレート分光光度計を使用してプレートを読み取ります。吸光度データを測定した後、ウェル位置Aの細胞内のメディエーターの総量を1つ掛けて計算します。位置 a a に 7 x 2 で対応するウェルがあり、結果を a a 1 の値に加算します。これは、実験中に、放出メディエーターの対抗Aを含むスーピネートがあり、それを新しい井戸対抗に移したためです。7です。残りのウェルについても計算を繰り返します。坑井対抗体における放出メディエーターの割合を算出し、算出した細胞内のメディエーター総数からA7の位置値に2を乗じて算出する。繰り返しになりますが、実験中には、リースメディエーターを含むスーパーナートがあります。それを新しいものに移すと、その製品に100を掛け、その製品をその位置の細胞内のメディエーターの対応する合計値で割ります。これにより、うねりのリリースメディエーターの割合がわかります。各列の6つの膨潤は、同じ濃度の抗原平均によって挑戦されるため、残りのウェルについても計算を繰り返します。これらの値と標準偏差の計算は、次のようにこれらの値をグラフにプロットします。グラフは、抗原濃度が増加すると、1ミリリットルあたり100ナノグラムでピークに達するまでより多くのメディエーターが放出され、その後、抗原濃度の増加とともにメディエーターの放出が減少することを示しています。最終的な実験結果は、グラフB.The control release assay in light blueはIgE抗体を含んでいないため、抗原濃度の増加によるメディエーター放出の変化を示さない。これを、IgE抗体が含まれている可能性のある濃い青色の実験結果と比較してください。これは、抗IgEワクチンの安全性が試験されている例です。この赤のグラフから、抗IgE血清が細胞表面の受容体を架橋し、紫色のポジティブコントロールと灰色のネガティブコントロールが灰色で見られるように、RBL細胞を脱顆粒させることが明らかになり、このワクチンは安全でないことがわかります。このアッセイは、メディエーターの放出を測定することができるので、またはその遅延を測定することができるので、潜在的な抗アレルギー薬またはワクチンも人間の犬または馬のシステムに適応させることができる、アッセイが示されているように、抗アレルギー抗体を試験するときにメディエーターの放出の成功したブロッキングまたは失敗したブロッキングを決定することができる。

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Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学と感染症

このビデオは、ヒトナチュラルキラー細胞の治療用抗体によって開始されるFcγRIIIa駆動型イベントを示しています。この人工刺激プラットフォームは、細胞骨格の再構成、脱顆粒、ケモカイン/サイトカイン産生、および結合に関与する抗体のFcγRIIIaおよびFc部分によって媒介されるシグナル伝達経路を含む、下流のエフェクター機能の探索を容易にします。...

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学ぶ、IgE依存性メディエーター遊離を測定するアッセイ法。ラット好塩基球性白血病細胞に馬FcεRIα遺伝子を導入し、アレルギー反応のメカニズム解明と治療法開発に貢献する。

開発 in vitroでモデル系エクウス caballusのIgE

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