Optogenetic Random Mutagenesis Using Histone-miniSOG in <em>C. elegans</em>

Kentaro Noma; Yishi Jin

doi:10.3791/54810

JoVE Journal
Genetics

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JoVE Journal Genetics

Optogenetic Random Mutagenesis Using Histone-miniSOG in C. elegans

でヒストンminiSOGを使用した光遺伝学ランダム突然変異誘発 C。エレガンス

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04:51 min

November 14, 2016

DOI: 10.3791/54810-v

Kentaro Noma¹, Yishi Jin^1,2

¹Division of Biological Sciences, Section of Neurobiology,University of California in San Diego and Howard Hughes Medical Institute, ²Department of Cellular and Molecular Medicine,University of California in San Diego School of Medicine and Howard Hughes Medical Institute

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

遺伝的にコードされたヒストンminiSOGは、青色光依存的にゲノムワイドな遺伝変異を誘発します。この突然変異誘発法は、高速で、単純な有毒化学物質の自由、およびフォワード遺伝子スクリーニングおよび導入遺伝子組込みに適しています。

この突然変異誘発プロトコルの全体的な目標は、単純なLEDセットアップを使用して、青色光依存性の活性酸素発生タンパク質を発現するC.elegansのゲノムDNAを変異誘発することです。この技術の2つの主な利点は、突然変異誘発プロトコルが非常に簡単で、有毒な化学物質を必要としないことです。そして2つ目は、突然変異発生装置が長い突然変異の後に証明されることです。

私が最初にこの方法のアイデアを思いついたのですが、ROSを生成するタンパク質が遺伝性突然変異を誘発するために使用されたことがないことがわかりました。この実験では、LEDイルミネーターデバイスのコントローラーをBNCケーブルを使用してデジタルファンクションジェネレーターに接続します。カスタムホルダーを使用して、LEDライトをステージから10センチ上に固定します。

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