Quadruple Immunostaining of the Olfactory Bulb for Visualization of Olfactory Sensory Axon Molecular Identity Codes

Naoki Ihara; Yuji Ikegaya; Haruki Takeuchi

doi:10.3791/55893

JoVE Journal
Neuroscience

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JoVE Journal Neuroscience

Quadruple Immunostaining of the Olfactory Bulb for Visualization of Olfactory Sensory Axon Molecular Identity Codes

嗅覚神経軸索分子識別コードの視覚化のための嗅球の四重免疫染色

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06:32 min

June 5, 2017

DOI: 10.3791/55893-v

Naoki Ihara¹, Yuji Ikegaya^1,2, Haruki Takeuchi^1,3

¹Laboratory of Chemical Pharmacology, Graduate School of Pharmaceutical Sciences,The University of Tokyo, ²Center for Information and Neural Networks,National Institute of Information and Communications Technology, ³PRESTO,Japan Science and Technology Agency (JST)

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

嗅覚ニューロンは、種々の軸索選別分子を発現して適切な神経回路を確立する。このプロトコルは、嗅覚ニューロンの軸索末端における軸索ソーティング分子のコンビナトリアル発現を視覚化する免疫組織化学的染色方法を記載している。

この免疫組織化学染色法の全体的な目標は、嗅覚ニューロンの軸索末端における軸索選別分子の複合発現を視覚化することです。この方法は、軸索誘導、シナプス形成、嗅覚ニューロンの再生など、嗅覚発達の分野における主要なプロセスを特徴付けるのに役立ちます。この技術の主な利点は、科学者が切片間のばらつきを維持せずに、嗅球内の軸索選別分子の発現パターンを比較および分析できることです。

型内の嗅覚組織サンプルの位置と角度を言葉で説明するのが難しいため、埋め込みステップを学ぶのが難しいため、この方法を視覚的にデモンストレーションすることが重要です。4%パラホルムアルデヒドの心臓内灌流によって固定された1〜2週齢のマウスの頭部から始めます。上下の歯の隙間にハサミの刃を差し込み、水平に切って下顎の骨を取り除きます。

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