Quantitative and Qualitative Method for Sphingomyelin by LC-MS Using Two Stable Isotopically Labeled Sphingomyelin Species

Kotaro Hama; Yuko Fujiwara; Kazuaki Yokoyama

doi:10.3791/57293

同位体 2 つの安定を用いる液体クロマトグラフィー質量によってスフィンゴミエリンの定量的および定性的...

JoVE Journal
Biochemistry

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biochemistry

Quantitative and Qualitative Method for Sphingomyelin by LC-MS Using Two Stable Isotopically Labeled Sphingomyelin Species

同位体 2 つの安定を用いる液体クロマトグラフィー質量によってスフィンゴミエリンの定量的および定性的な方法ラベルスフィンゴミエリン種

Full Text

10,318 Views

08:53 min

May 7, 2018

DOI: 10.3791/57293-v

Kotaro Hama¹, Yuko Fujiwara¹, Kazuaki Yokoyama¹

¹Faculty of Pharmaceutical Sciences,Teikyo University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、提案する定量化および複数反応モニタリングを用いた各スフィンゴミエリン種を対象に、プロトコルと MS、MS、MS モード、それぞれ。

この手順の全体的な目標は、生体サンプル中の各スフィンゴミエリン種の量と構造を正確に分析することです。この方法は、脂質生物学と脂質に関連する脂質分野の重要な質問に答えるのに役立ちますこの技術の主な利点は、クロマトグラフィー質量分析システムによって生物学的サンプル中のさまざまなスフィンゴミエリン種を特徴付けることができることです。まず、HeLa細胞を含む10cmの組織培養皿から培地を取り出し、6ミリリットルの氷冷PBSで細胞を2回すすぎます。

次に、10cmの組織培養皿に氷冷したPBSを1ミリリットル加え、細胞スクレーパーを使用して細胞を回収します。皿の表面から取り出したら、細胞を2ミリリットルのシリコン処理プラスチックチューブに移します。遠心分離後、上清を除去し、各細胞ペレットに1ミリリットルのメタノールを加えます。

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos