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DOI: 10.3791/62398-v
Meng Zhang1,2, Mohamed N. Seleem3, Ji-Xin Cheng1,2,4,5
1Department of Electrical and Computer Engineering,Boston University, 2Boston University Photonics Center,Boston University, 3Department of Biomedical Sciences and Pathobiology, Virginia-Maryland College of Veterinary Medicine,Virginia Polytechnic Institute and State University, 4Department of Biomedical Engineering,Boston University, 5Department of Chemistry,Boston University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study describes a rapid antimicrobial susceptibility testing (AST) assay that can be completed in 2.5 hours using single-cell-stimulated Raman scattering imaging of D2O metabolism. This protocol is significant as it allows for testing of bacterial samples from urine and whole blood, providing a transformative approach to rapid single-cell phenotypic AST in clinical settings.
このプロトコルは、D2O代謝の単一細胞刺激ラマン散乱イメージングによる2.5時間以内の迅速な抗菌剤感受性試験(AST)アッセイを提示します。この方法は、尿または全血環境の細菌に適用され、診療所での迅速な単一細胞表現型ASTに変化します。
尿や血液中で2.5時間以内に迅速な抗菌薬感受性試験が可能となり、従来のブロス微量希釈法と比較して分析時間が大幅に短縮できると考えられます。全血などの複雑な環境で細菌の代謝活動を監視できます。まず、波長600ナノメートルの光度計で光学密度を測定して、サンプルから細菌濃度を確認します。
ミリリットル当たり10〜第5コロニー形成単位(CFU)の8倍の最終細胞濃度に達するには、重水素を含まない通常のMHB培地を用いて細菌溶液を希釈する。細菌細胞をボルテックスで混合した後、7本の1.5ミリリットルマイクロチューブに300マイクロリットルの細菌溶液のアリコートを、1本の1.5ミリリットルマイクロチューブに600マイクロリットルの細菌溶液のアリコートを除去します。次に、4.8マイクロリットルの抗生物質ストック溶液を600マイクロリットルの細菌溶液を含むマイクロチューブに追加して、ミリリットルあたり8マイクログラムの最終抗生物質濃度を達成します。
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