Summary
Protocol
- قطع قطع الذيل (3mm) وآذان العلامة.
- إضافة 720 متر و 30 لتر STE م ل ك بروتين (10 ملغ / مل الأسهم).
- احتضان عند درجة حرارة 55 مئوية على كتلة التدفئة ودوامة كل ساعة لمدة 3 ساعات في سرعة قصوى لمدة 10 ثانية.
- تعطيل بروتين كاف في 70 درجة مئوية لمدة 5 دقائق.
- إخماد على الجليد لمدة 5 دقائق.
- الحمض النووي للطرد المركزي لمدة 10 دقيقة الذيل بأقصى سرعة.
- صب في أنبوب جديد يحتوي على 720 م ل الأيزوبروبانول.
- الحمض النووي يعجل بواسطة أنبوب أو عكس vortexing.
- تدور باستمرار لمدة 5 دقائق الحمض النووي بأقصى سرعة. إزالة طاف.
- غسل بيليه مع الايثانول 70 ٪.
- تدور أسفل الحمض النووي الجيني 5 دقائق بأقصى سرعة. إزالة طاف.
- الحمض النووي يسمح لتجف لمدة 1-2 دقائق.
- الحمض النووي في Resuspend ل م 100-200 اعتمادا على حجم بيليه.
- أنبوب مكان عند درجة حرارة 55 مئوية لمدة 1 ساعة لتسهيل حل من الحمض النووي.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| STE | Buffer | 100 mm Tris; pH 8.5 /5 mM EDTA /0.2% SDS /200 mM NaCl / in H2O | ||
| TE | Buffer | 100 mM Tris; pH 5.0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl |
