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간질 유체 압력(Interstitial Fluid Pressure, IFP)은 조직의 세포 사이의 공간에서 유체가 가하는 힘입니다. 먼저, 산소와 혼합된 2% 이소플루오란으로 종양이 있는 마우스를 마취하고 컴퓨터 단층 촬영 또는 CT-IFP 로봇 플랫폼에서 고정시킵니다. 이제 마우스의 측면 꼬리 정맥에 조영제로 캡슐화된 리포솜을 주입하여 종양을 시각화합니다. 동물을 우리로 되돌려 놓고 회복시키십시오.
주입 후 48시간에서 72시간 사이에 마취된 마우스를 CT-IFP 플랫폼에 고정하고 IFP를 측정하기 위해 종양에서 균일한 간격의 몇 개의 위치를 선택합니다. 다음으로, 삽입하기 전에 IFP 시스템 바늘을 헤파린 식염수로 세척합니다. 선택한 위치에 바늘을 가져와 종양 조직 내에 삽입합니다.
이제 모든 위치에서 이미지를 획득하고 소프트웨어를 사용하여 IFP를 측정합니다. 종양의 IFP는 일반적으로 밀도가 높은 특성, 비정상적인 혈관 및 림프계 결함으로 인해 높습니다. 이로 인해 종양 주변부에 리포좀이 축적될 수 있습니다. 다음 프로토콜에서는 고형 종양에서 IFP를 측정하는 기술을 시연합니다.
IFP를 측정하려면 종양이 고정되고 CT-IFP 로봇 시스템에 접근할 수 있도록 CT-IFP 로봇 플랫폼에 동물을 테이프로 붙입니다. 방금 시연한 대로 해부학적 마이크로 CT 스캔을 얻은 다음 사전 바늘 삽입 데이터를 CT-IFP 로봇 정렬 소프트웨어에 로드하고 창과 수준을 조정하여 종양을 시각화합니다. 이미지에서 종양의 가장자리를 클릭한 다음 종양의 인접한 쪽에서 두 번째 가장자리 위치를 선택합니다.
소프트웨어는 두 점 사이의 선형을 따라 일련의 위치를 계산합니다. 그런 다음 리스트에서 5개에서 8개의 균일한 간격의 위치에 대한 x, y 및 z 좌표를 선택합니다. 그런 다음 식염수 헤파린 용액으로 IFP 시스템 바늘을 세척하고 첫 번째 미리 결정된 바늘 위치를 CT-IFP 로봇 제어 소프트웨어의 XYZ 좌표 창에 입력합니다.
이동 버튼을 눌러 로봇을 원하는 위치로 이동합니다. 그런 다음 각 바늘 위치에 대해 바늘 삽입 버튼을 클릭하여 바늘을 조직에 삽입합니다. PE-20 튜브를 꼬집었다 놓아 IFP 바늘과 조직 사이의 양호한 유체 통신을 확인하고 IFP 측정이 증가하여 IFP 수집 소프트웨어의 핀치 전 값으로 돌아가는 것을 관찰합니다. 마지막으로, 바늘을 삽입한 상태에서 해부학적 CT 스캔을 획득하고 스캔 끝에 있는 Retract Needle 버튼을 클릭하여 조직에서 바늘을 제거합니다.
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