Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment

Nicolas Huyghe; Elena Benidovskaya; Simon Beyaert; Aur&#233;lie Daumerie; Finoula Maestre Osorio; Frank Aboubakar Nana; Caroline Bouzin; Marc Van den Eynde

doi:10.3791/65220

종양 미세 환경의 임상 및 생물학적 평가를 위한 공간 이미지 분석과 결합된 Multiplex Immunofluorescence

JoVE Journal
Cancer Research

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JoVE Journal Cancer Research

Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment

종양 미세 환경의 임상 및 생물학적 평가를 위한 공간 이미지 분석과 결합된 Multiplex Immunofluorescence

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June 2, 2023

DOI: 10.3791/65220-v

Nicolas Huyghe¹, Elena Benidovskaya¹, Simon Beyaert¹, Aurélie Daumerie⁴, Finoula Maestre Osorio¹, Frank Aboubakar Nana^2,3, Caroline Bouzin⁴, Marc Van den Eynde^1,5

¹Institut de Recherche Expérimentale et Clinique (IREC), Pôle MIRO,Université Catholique de Louvain (UCLouvain), ²Institut de Recherche Expérimentale et Clinique (IREC), Pôle de Pneumologie, ORL et Dermatologie (PNEU),Université Catholique de Louvain (UCLouvain), ³Division of Pneumology, Cliniques Universitaires St-Luc,Université Catholique de Louvain (UCLouvain), ⁴IREC Imaging Platform,Université Catholique de Louvain (UCLouvain), ⁵Institut Roi Albert II, Department of Medical Oncology and Gastroenterology,Cliniques Universitaires St-Luc

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이 기사에서는 이미지 분석 및 공간 분석과 결합된 수동 티라마이드 신호 증폭(TSA) 다중 면역형광(mIF)을 위한 프로토콜에 대해 설명합니다. 이 프로토콜은 실험실에서 사용할 수 있는 슬라이드 스캐너에 따라 슬라이드당 2-6개의 항원을 염색하기 위해 포르말린 고정 파라핀 포매(FFPE) 섹션과 함께 사용할 수 있습니다.

우리 연구실에서는 인간 대장 암을 연구하고 있습니다. 전이성 질환으로의 진행 및 면역 요법을 포함한 치료에 대한 반응. 원발성 및 전이성 질환에서 종양 면역 미세환경과 종양 내 마이크로바이옴을 조사하여 새로운 예측 및 예후 바이오마커를 찾고자 합니다.

우리 프로젝트에서 우리는 현재 RNA 시퀀싱, 전체 엑솜 시퀀싱, TCR 시퀀싱, 순환 무세포 DNA 분석, 면역형광 및 형광 연구소 하이브리드화와 같은 여러 기술을 구현하고 있습니다. 현재 우리의 주요 과제는 형광 연구소 하이브리드화 염색과 티라마이드 신호 증폭 다중 면역형광을 결합하여 마이크로바이옴과 면역 세포 간의 상호 작용을 연구하는 것입니다. 당사의 방법은 견고하고 재현 가능하며 사용하기 쉽고 비용 효율적입니다.

형광 스캐너를 소유한 모든 실험실에 설치할 수 있으며, 이 방법은 일반적으로 제한된 항원 패널에 최적화된 상업적으로 이용 가능한 키트에 반대하여 상업적으로 이용 가능한 IHC 항체와 함께 사용할 수 있습니다.

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