0 조회수 • 1:29 분 • March 4th, 2025
도파민성 뉴런이 풍부한 뇌 절편으로 시작하십시오.
형광 거짓 신경전달물질 또는 FFN을 함유한 aCSF에서 슬라이스를 배양합니다.
FFN은 도파민을 모방하고 산성 환경보다 중성 환경에서 더 강하게 형광을 발하는 pH 민감성 마커입니다.
이러한 FFN은 도파민 뉴런에 선택적으로 들어가 산성 시냅스 소포에 적재되며, 여기서 pH 변화는 FFN 형광을 감소시킵니다.
이 슬라이스를 이미징 챔버로 옮기고, 고정한 다음, aCSF로 지속적으로 관류하여 결합되지 않은 FFN을 제거합니다.
FFN 축적을 형광 반점으로 확인하기 위해 슬라이스를 이미지화합니다.
다음으로, 전기 자극을 전달하기 위해 자극 전극을 배치합니다.
전기 펄스는 칼슘이 뉴런으로 들어가도록 하여 뉴런 막과 시냅스 소포 융합을 촉진하고 FFN이 세포 외 시냅스 틈새로 방출되도록 합니다.
시냅스 틈새의 중성 pH 환경에서 FFN 형광이 강화됩니다.
슬라이스를 다시 이미지화하여 세포 외 공간에서 확산 형광을 관찰하고 시냅스 소포에서 FFN 방출을 확인합니다.