A Sensitive and Specific Quantitation Method for Determination of Serum Cardiac Myosin Binding Protein-C by Electrochemiluminescence Immunoassay

Diederik W.D. Kuster; David Barefield; Suresh Govindan; Sakthivel Sadayappan

doi:10.3791/50786

Electrochemiluminescence의 면역에 의한 혈청 심장 마이 오신 결합 단백질-C의 결정에 대한 민감하고 ...

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

A Sensitive and Specific Quantitation Method for Determination of Serum Cardiac Myosin Binding Protein-C by Electrochemiluminescence Immunoassay

Electrochemiluminescence의 면역에 의한 혈청 심장 마이 오신 결합 단백질-C의 결정에 대한 민감하고 구체적인 정량 방법

Full Text

17,120 Views

10:12 min

August 8, 2013

DOI: 10.3791/50786-v

Diederik W.D. Kuster¹, David Barefield¹, Suresh Govindan¹, Sakthivel Sadayappan¹

¹Department of Cell and Molecular Physiology,Loyola University Chicago

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

복잡한 생물학적 시료의 측정 생체 점점 의사 결정 임상 지침입니다. 우리는 동시에 심장 미오신 결합 단백 C, 크레아틴 키나제 MB, 심근 경색 및 건강한 대조군과 과목에서 혈청 샘플에서 심장 트로포 닌 I를 측정하는 매우 민감한 방법을 설명합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 혈청 샘플에서 심장 미오신 결합 단백질 C와 심장 트로포닌 I을 동시에 정량화하는 것입니다. 이는 먼저 플렉스 분석을 위해 96웰 플레이트를 심장 미오신 결합 단백질 C 항체로 코팅하거나 사전 코딩된 threeplex 분석을 사용하여 수행됩니다. 두 번째 단계에서는 코팅된 플레이트를 캘리브레이터 및 혈청 샘플과 함께 배양합니다.

다음으로 라벨링된 검출 항체가 최종 단계에서 추가되고, 플레이트 리더에 의해 검출되는 화학발광 신호가 생성됩니다. 궁극적으로, 혈청 샘플에 존재하는 관심 심장 단백질의 수준은 단일 또는 다중 면역 분석으로 측정할 수 있습니다. 실험 전날, 30 마이크로 리터의 젤라틴이없는 마우스 단일 클론 항 심장 미오신 결합 단백질 C 항체를 96 Well 된장 스케일 발견 베어 표준 플레이트의 각 웰 하단 모서리에 피펫으로 만듭니다.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos