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DOI: 10.3791/51528-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a protocol for immunostaining Drosophila melanogaster tissues using sonication. The method allows for the visualization of specific cell types and proteins without the need for dissection, enhancing efficiency in the study of developing tissues.
면역염색은 조직 내의 특정 세포 유형과 단백질을 시각화하는 효과적인 기술입니다. 초음파 처리를 활용함으로써, 여기에 설명된 프로토콜은 면역 염색 전에 후기 단계의 배아와 유충에서 Drosophila melanogaster 조직을 해부해야 할 필요성을 완화합니다. 우리는 포름알데히드가 고정된 전체 산 유충의 면역 염색을 위한 효율적인 방법론을 제공합니다.
이 절차의 전반적인 목표는 초음파 처리 후 형광 현미경을 사용하여 C 2의 조직을 시각화하거나 채우는 것입니다. 이것은 먼저 배아 및 유충 샘플을 수집한 다음 포름알데히드, 헵탄 및 메탄올을 사용하여 고정함으로써 수행됩니다. 두 번째 단계는 항체 침투를 허용하기 위해 큐티클을 제거하기 위해 고정 샘플을 초음파 처리하는 것입니다.
다음으로, 샘플은 1차 및 형광 2차 항체를 사용한 면역 염색입니다. 마지막 단계는 글리세롤 기반 Antifa 용액에 샘플을 장착하는 것입니다. 궁극적으로, 컨포칼 또는 에피 형광 현미경은 발달 조직과 단백질 발현 및 국소화를 시각화하는 데 사용됩니다.
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