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DOI: 10.3791/54353-v
Yoshihiro Koya1,2, Hiroaki Kajiyama2, Wenting Liu1,2, Kiyosumi Shibata2, Takeshi Senga3, Fumitaka Kikkawa2
1Bell Research Center for Reproductive Health and Cancer, 2Department of Obstetrics and Gynecology,Nagoya University Graduate School of Medicine, 3Department of Cancer Biology,Nagoya University Graduate School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
난소 암의 복막 보급의 다단계 과정을 명확히하기 위해, 본 연구는 이러한 종양 세포와 동 소성 접종을 통해 원래의 종양 개발 및 복막 전이의 쥐 실험 모델을 제시한다.
이 절차의 전반적인 목표는 상피 난소 암종에서 원래 및 전이성 종양 형성의 발달을 관찰하는 것입니다. 이 방법은 종양 생물학 또는 복막 배변에 대한 이해와 같은 부인과 종양 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 인간 상피 난소 암종 또는 EOC 세포에 대한 구강 접종이 등쪽 옆구리로 성장한 후복막 접근법을 통해 수행된다는 것입니다. 인간 난소 투명세포암 세포주를 준비하려면 섭씨 37도에서 10% FBS 및 PenStrep, 5%CO2로 RPMI-1640 배지에 ES2 세포를 플레이트하고 유지합니다. 로그 성장 단계에서는 배양액에서 오래된 배지를 제거하고 3-4mm의 PBS를 사용하여 세포를 한 번 세척합니다. 다음으로, 1mm의 트립신/EDTA를 추가하고 혈관을 흔들어 전체 단층을 덮습니다. 트립신 용액을 제거하고 폐기한 후 3-5분 동안 세포를 인큐베이터에 다시 넣습니다. 현미경으로 세포를 검사하여 세포가 분리되어 떠다니는지 확인한 후, 5mm의 신선한 혈청 함유 성장 배지를 추가하여 트립신을 비활성화하고 세포를 다시 현탁시킨 후 15mm 원뿔형 튜브로 옮깁니다. 300배 G 및 실온에서 현탁액을 원심분리기합니다.
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