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DOI: 10.3791/57293-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines a method for quantifying and qualifying sphingomyelin species using multiple reaction monitoring and MS/MS/MS techniques. It aims to provide insights into lipid biology through precise analysis of sphingomyelin in biological samples.
여기, 우리가 현재 계량 하 여 여러 반응 모니터링을 사용 하 여 각 sphingomyelin 종 자격 프로토콜 및 MS/MS/MS 모드, 각각.
이 절차의 전반적인 목표는 생물학적 샘플에서 각 Sphingomyelin 종의 양과 구조를 정확하게 분석하는 것입니다. 이 방법은 지질 생물학 및 지질과 관련된 지질 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.이 기술의 주요 장점은 크로마토그래피 질량 분석 시스템으로 생물학적 샘플에서 다양한 Sphingomyelin 종을 특성화할 수 있다는 것입니다. 먼저 HeLa 세포가 들어 있는 10cm 조직 배양 접시에서 배양 배지를 제거하고 6ml의 얼음처럼 차가운 PBS로 세포를 두 번 헹굽니다.
그런 다음 10cm 조직 배양 접시에 얼음처럼 차가운 PBS 1ml를 넣고 세포 스크레이퍼를 사용하여 세포를 수확합니다. 접시 표면에서 세포를 제거한 후 세포를 2밀리리터의 실리콘 플라스틱 튜브로 옮깁니다. 원심분리 후 상층액을 제거하고 각 세포 펠렛에 1밀리리터의 메탄올을 첨가합니다.
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