Bacillus subtilis 포자 계수 및 유세포 분석의 표지 분석 개선

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2023년 6월 30일

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Késsia Caroline Alves¹^,² , Yury Oliveira Chaves¹^,³^,⁴ , Maria Edilene Almeida¹^,⁴ , Maria Gabriella Vasconcelos¹^,⁴ , Paulo Afonso Nogueira¹^,³^,⁶ , Joyce Melo¹^,⁹ , Jéssica Marques⁸ , Juliana Pavan Zuliani⁷ , Charles Nunes Boeno⁷ , Mauro Valentino Paloschi⁷ , Rachele Isticato⁵ , Ezio Ricca⁵ , Luís André Mariúba¹^,²^,³^,⁶

¹Laboratório de diagnóstico e controle de doenças infecciosas na Amazônia, Instituto Leônidas e Maria Deane - Fiocruz Amazônia, ²Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal do Amazonas (UFAM), ³Programa de Pós-Graduação em Biologia da Interação Patógeno-Hospedeiro - Fiocruz Amazônia, ⁴Programa de Pós-graduação em Ciências Aplicadas à Hematologia PPGH-UEA/HEMOAM, ⁵Department of Biology, Federico II University, ⁶Programa de Pós-Graduação em Imunologia Básica e Aplicada, Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal do Amazonas (UFAM), ⁷Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à saúde, Fundação Oswaldo Cruz, FIOCRUZ Rondônia, ⁸Centro Multiusuário para Análises de Fenômenos Biomédicos (CMABio-UEA), Universidade Estadual do Amazonas, ⁹Universidade Federal do Amazonas (UFAM)

이 프로토콜은 유세포 분석 및 카운팅 비드를 사용하여 에티듐 브로마이드로 표지된 박테리아 포자를 정량화하는 데 중점을 둡니다. 이 방법은 또한 온전한 포자의 표면에서 단백질의 공유 결합을 분석하는 데 효율적입니다.

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Bacillus Subtilis 포자

형광 항체 표지

계수용 비드

에티듐 브로마이드 염색

표면 항원 검출

형광 단백질 결합

Chapters in this video

0:00

Introduction

0:44

Flow Cytometry Setting and Preparation of Autoclaved Spores for Flow Cytometry

1:47

Analysis Using Flow Cytometry

3:27

Estimation of the Protein Coupling Index on a Spore Surface Using Flow Cytometry

4:52

Results: Fluorescence Coupling Percentage Analysis of Bacillus subtilis Spores

6:08

Conclusion