Name: Een efficiënt protocol om ERK-activiteitsmodulatie te beoordelen in vroege zebravismodellen van het Noonan-syndroom via live FRET-microscopie en immunofluorescentie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-02T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 58 s
Description: Leer een FRET-imagingprotocol om ERK-activatie in zebravisembryo's te detecteren voor onderzoek naar RASopathieën en farmacologische modulatie. Deze methode ondersteunt variantvalidatie en preklinische geneesmiddelentesten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Iroegbu, J. D., Ijomone, O. K., Femi-Akinlosotu, O. M., Ijomone, O. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ERK%2FMAPK+signalling+in+the+developing+brain%3A+Perturbations+and+consequences%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">ERK/MAPK signalling in the developing brain: Perturbations and consequences.</a> Neurosci Biobehav Rev. 131, 792-805 (2021).</li>
<li>Tartaglia, M., Aoki, Y., Gelb, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+genetics+of+RASopathies%3A+An+update+on+novel+disease+genes+and+new+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Med+Genet+C+Semin+Med+Genet%22%5BJournal%5D)">The molecular genetics of RASopathies: An update on novel disease genes and new disorders.</a> Am J Med Genet C Semin Med Genet. 190 (4), 425-439 (2022).</li>
<li>Tate, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((COSMIC%3A+the+catalogue+of+somatic+mutations+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">COSMIC: the catalogue of somatic mutations in cancer.</a> Nucleic Acids Res. 47 (D1), D941-D947 (2019).</li>
<li>Tartaglia, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutations+in+PTPN11%2C+encoding+the+protein+tyrosine+phosphatase+SHP-2%2C+cause+Noonan+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Mutations in PTPN11, encoding the protein tyrosine phosphatase SHP-2, cause Noonan syndrome.</a> Nat Genet. 29 (4), 465-468 (2001).</li>
<li>Jopling, C., van Geemen, D., den Hertog, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shp2+knockdown+and+Noonan%2FLEOPARD+mutant+Shp2-induced+gastrulation+defects%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">Shp2 knockdown and Noonan/LEOPARD mutant Shp2-induced gastrulation defects.</a> PLoS Genet. 3 (12), e225(2007).</li>
<li>Wong, K. -L., Akiyama, R., Bessho, Y., Matsui, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ERK+activity+dynamics+during+zebrafish+embryonic+development%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">ERK activity dynamics during zebrafish embryonic development.</a> Int J Mol Sci. 20 (1), 109(2019).</li>
<li>Fasano, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+the+FRET-based+Teen+sensor+to+monitor+ERK+activation+changes+preceding+morphological+defects+in+a+RASopathy+zebrafish+model+and+phenotypic+rescue+by+MEK+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Assessment of the FRET-based Teen sensor to monitor ERK activation changes preceding morphological defects in a RASopathy zebrafish model and phenotypic rescue by MEK inhibitor.</a> Mol Med. 30 (1), 47(2024).</li>
<li>Zimmermann, T., Rietdorf, J., Girod, A., Georget, V., Pepperkok, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spectral+imaging+and+linear+un-mixing+enables+improved+FRET+efficiency+with+a+novel+GFP2-YFP+FRET+pair%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+Lett%22%5BJournal%5D)">Spectral imaging and linear un-mixing enables improved FRET efficiency with a novel GFP2-YFP FRET pair.</a> FEBS Lett. 531 (2), 245-249 (2002).</li>
<li>Sari, D. W. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-lapse+observation+of+stepwise+regression+of+Erk+activity+in+zebrafish+presomitic+mesoderm%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Time-lapse observation of stepwise regression of Erk activity in zebrafish presomitic mesoderm.</a> Sci Rep. 8 (1), 4335(2018).</li>
<li>Wang, H., Li, J., Xue, T., Cheng, N., Du, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Construction+of+a+series+of+pCS2%2B+backbone-based+Gateway+vectors+for+overexpressing+various+tagged+proteins+in+vertebrates%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biochim+Biophys+Sin+%28Shanghai%29%22%5BJournal%5D)">Construction of a series of pCS2+ backbone-based Gateway vectors for overexpressing various tagged proteins in vertebrates.</a> Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). 48 (12), 1128-1134 (2016).</li>
<li>Abdelrahman, D., Hasan, W., Da'as, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microinjection+quality+control+in+zebrafish+model+for+genetic+manipulations%5BTitle%5D)+AND+%22MethodsX%22%5BJournal%5D)">Microinjection quality control in zebrafish model for genetic manipulations.</a> MethodsX. 8, 101418(2021).</li>
<li>Yuan, S., Sun, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microinjection+of+mRNA+and+morpholino+antisense+oligonucleotides+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Microinjection of mRNA and morpholino antisense oligonucleotides in zebrafish embryos.</a> J Vis Exp. (27), e1113(2009).</li>
<li>Rossant, J., Nutter, L. M. J., Gertsenstein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+the+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Engineering the embryo.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 108 (19), 7659-7660 (2011).</li>
<li>Jindal, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+severity+ranking+of+Ras+pathway+mutations+associated+with+developmental+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">In vivo severity ranking of Ras pathway mutations associated with developmental disorders.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 114 (3), 510-515 (2017).</li>
<li>Leavesley, S. J., Rich, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overcoming+lmitations+of+FRET+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">Overcoming lmitations of FRET measurements.</a> Cytometry A. 89 (4), 325-327 (2016).</li>
<li>Mascha, E., Vetter, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Significance%2C+errors%2C+power%2C+and+sample+size%3A+Theblocking+and+tackling+of+statistics%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">Significance, errors, power, and sample size: Theblocking and tackling of statistics.</a> Anesth Analg. 126 (2), 691-698 (2018).</li>
<li>Faul, F., Erdfelder, E., Lang, A. -G., Buchner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((G%2APower+3%3A+a+flexible+statistical+power+analysis+program+for+the+social%2C+behavioral%2C+and+biomedical+sciences%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Res+Methods%22%5BJournal%5D)">G*Power 3: a flexible statistical power analysis program for the social, behavioral, and biomedical sciences.</a> Behav Res Methods. 39 (2), 175-191 (2007).</li>
<li>Cohen, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCohen%2C+J+%22Statistical+power+analysis+for+the+behavioral+sciences%22">Statistical power analysis for the behavioral sciences</a>. , Routledge. New York. (1988).</li>
<li>Anastasaki, C., Rauen, K. A., Patton, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continual+low-level+MEK+inhibition+ameliorates+cardio-facio-cutaneous+phenotypes+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Model+Mech%22%5BJournal%5D)">Continual low-level MEK inhibition ameliorates cardio-facio-cutaneous phenotypes in zebrafish.</a> Dis Model Mech. 5 (4), 546-552 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Plasticwares</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1.7 L Breeding Tank - Beach style Design</td><td>Tecniplast</td><td>1.7L SLOPED</td><td>Breeding tank</td></tr><tr><td>Capillaries GC100F-10</td><td>Harvard apparatus</td><td>30-0019</td><td>One-cell stage embryo microinjection</td></tr><tr><td>Cell and Tissue Culture Plates - 12 well</td><td>BIOFIL</td><td>TCP011012</td><td>Embryo collection and treatment</td></tr><tr><td>Cell and Tissue Culture Plates - 6 well</td><td>BIOFIL</td><td>TCP011006</td><td>Embryo collection and treatment</td></tr><tr><td>Cell Culture Dish</td><td>SPL Life Sciences</td><td>20100</td><td>Embryo collection&nbsp;</td></tr><tr><td>Nunc Glass Dishes 12mm</td><td>Thermo Fisher</td><td>150680</td><td>Embryo FRET spectral imaging</td></tr><tr><td>Pipette Pasteur</td><td>Corning</td><td>357524</td><td>Embryo transfer</td></tr><tr><td>Protein Lobind Tubes 2ml</td><td>Eppendorf</td><td>30108450</td><td>IHC assay</td></tr><tr><td>Reagents and others</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Caviar 500-800 &micro;m</td><td>Rettenmaier Italia</td><td>BE2269 (500-800)</td><td>Dry fish food</td></tr><tr><td>Great Salt Lake Blue Artemia Cysts</td><td>Sanders</td><td>00004727</td><td>Live fish food</td></tr><tr><td>Instant Ocean salt</td><td>Tecniplast</td><td>XPSIO25R</td><td>Dehydrated sea salt for live food preparation</td></tr><tr><td>Tg(EF1a:ERK Biosensor-nes) (Teen)</td><td>Contacts for ordering*: National BioResource Project Zebrafish, Support Unit for Animal Resources Development, RRD, RIKEN Center for Brain Science, Japan. https://shigen.nig.ac.jp/zebra/index_en.html *upon MTA signature. </td><td>-</td><td>Supplier of ERK Reporter zebrafish line. Fish embryos can be obtained upon MTA signature from National BioResource Project of Japan for Zebrafish (RIKEN, Japan). The zebrafish line is deposited by Nara Institute of Science and Technology (Takaaki Matsui) and the National Institute of Genetics (NIG/ROIS) (Koichi Kawakami, patent for Tol2 system) (Wong et al., 2018, Urasaki et al., 2006, Okamoto and Ishioka, 2010).</td></tr><tr><td>6x loading dye</td><td>Cell Signaling</td><td>B7024S</td><td>Gel Elecrophoresis</td></tr><tr><td>100 bp DNA ladder</td><td>NEB</td><td>N3231S</td><td>Gel Elecrophoresis</td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1,01,236</td><td>Gel Elecrophoresis</td></tr><tr><td>Agarose, low gelling temperature</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9414-10G</td><td>Embryo mounting for FRET spectral imaging and IHC assay</td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumin (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A8022</td><td>IHC assay</td></tr><tr><td>Calcium chloride</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>223506</td><td>E3 medium component</td></tr><tr><td>Calcium nitrate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>237124</td><td>Danieau stock solution component</td></tr><tr><td>Dimethyl Sulfoxide (DMSO)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D8418-100ML</td><td>IHC assay</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E9884</td><td>TBE buffer component for gel preparation</td></tr><tr><td>Ethanol 99%+</td><td>Fisher Scientific</td><td>10048291</td><td>In vitro RNA purification</td></tr><tr><td>Formaldeide 16%</td><td>Thermo Fisher</td><td>28908</td><td>Embryo fixation</td></tr><tr><td>Formamide&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F9037</td><td>Gel Elecrophoresis</td></tr><tr><td>Gel Loading Buffer II (Denaturing PAGE)</td><td>Thermo Fisher</td><td>AM8546G</td><td>In vitro RNA transcription</td></tr><tr><td>Glacial Acetic Acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>695092</td><td>TBE buffer component for gel preparation</td></tr><tr><td>Glycerol&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G6279-1L</td><td>IHC assay</td></tr><tr><td>Goat anti-mouse Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fisher</td><td>A11001</td><td>IHC assay</td></tr><tr><td>Goat anti-rabbit Alexa Fluor 633</td><td>Thermo Fisher</td><td>A21070</td><td>IHC assay</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3375</td><td>Danieau stock solution component</td></tr><tr><td>KpnI - HF (Enzyme + rCutSmart Buffer)</td><td>NEB</td><td>R3142</td><td>Plasmid linearization&nbsp;</td></tr><tr><td>Magnesium sulfate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>230391</td><td>E3 medium component/Danieau stock solution component</td></tr><tr><td>Millennium RNA Markers</td><td>Thermo Fisher</td><td>AM7150</td><td>Gel Elecrophoresis</td></tr><tr><td>Monarch Genomic DNA purification Kit</td><td>NEB</td><td>T3010L</td><td>Plasmid linearization&nbsp;</td></tr><tr><td>Mouse monoclonal p44/42 MAPK</td><td>Cell Signaling</td><td>4696S</td><td>IHC assay</td></tr><tr><td>mMACHINE SP6 Transcription Kit&nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td>AM1340</td><td>In vitro RNA transcription</td></tr><tr><td>Normal Goat serum (NGS)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G9023</td><td>IHC assay</td></tr><tr><td>Nuclease-free water Ambion</td><td>Thermo Fisher</td><td>AM9937</td><td>In vitro RNA transcription</td></tr><tr><td>PD0325901</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>PZ0162</td><td>MEK inhibitor</td></tr><tr><td>Phenol Red solution</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P0290</td><td>Microinjection mix component&nbsp;</td></tr><tr><td>Poly A Tailing Kit</td><td>Thermo Fisher</td><td>AM1350</td><td>In vitro RNA transcription</td></tr><tr><td>Potassium chloride bioxtra&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9333</td><td>E3 medium component/Danieau stock solution component/PBS stock solution component</td></tr><tr><td>Potassium dihydrogen phosphate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P0662</td><td>PBS stock solution component</td></tr><tr><td>Proteinase K</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P2308</td><td>IHC assay</td></tr><tr><td>Rabbit polyclonal phospho-p44/42 MAPK&nbsp;</td><td>Cell Signaling</td><td>4695S</td><td>IHC assay</td></tr><tr><td>SYBR safe DNA gel staining</td><td>Thermo Fisher</td><td>S33102</td><td>Gel Elecrophoresis</td></tr><tr><td>Sodium Chloride</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>31434-M</td><td>E3 medium component/Danieau stock solution component/PBS stock solution component</td></tr><tr><td>Sodium phosphate dibasic</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71643</td><td>PBS stock solution component</td></tr><tr><td>Trizma base</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T1503</td><td>TBE buffer component for gel preparation</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8787</td><td>PBSTr buffer component</td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alliance Mini HD9&nbsp;</td><td>Uvitec</td><td>-</td><td>Imaging system</td></tr><tr><td>Centrifuge 5430 R</td><td>Eppendorf</td><td>5428000205</td><td>Microcentrifuge</td></tr><tr><td>Eppendorf ThermoMixer C</td><td>Eppendorf</td><td>-</td><td>Embryo mounting&nbsp;</td></tr><tr><td>FemtoJet 4x</td><td>Eppendorf</td><td>-</td><td>Microinjection system</td></tr><tr><td>Infinite M Plex&nbsp;</td><td>Tecan</td><td>-</td><td>Multimode plate reader</td></tr><tr><td>Leica M205FA</td><td>Leica Microsystems</td><td>-</td><td>Fluorescence stereo microscope</td></tr><tr><td>Leica TCS-SP8X equipped with incubator (OkoLab)</td><td>Le

een efficiënt protocol om erk-activiteitsmodulatie te beoordelen in vroege zebravismodellen van het noonan-syndroom via live fret-microscopie en immunofluorescentie

An Efficient Protocol to Assess ERK Activity Modulation in Early Zebrafish Noonan Syndrome Models via Live FRET Microscopy and Immunofluorescence

Een efficiënt protocol om ERK-activiteitsmodulatie te beoordelen in vroege zebravismodellen van het Noonan-syndroom via live FRET-microscopie en immunofluorescentie

RASopathies are genetic syndromes caused by ERK hyperactivation and resulting in multisystemic diseases that can also lead to cancer predisposition. ...

an-efficient-protocol-to-assess-erk-activity-modulation-early

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

This video demonstrates a non-invasive assay to study electrophysiology of motor neurons in zebrafish embryos. Upon measuring tail coiling in the embryos as a result of spontaneous depolarization of the spinal cord motor neurons, a sodium channel blocker is applied to reduce the coiling frequency. Next, the embryos are immobilized in agarose and placed under a fluorescence microscope. The genetically engineered motor neurons express a voltage-sensing biosensor with a donor and an acceptor...

A Non-invasive Approach to Study the Electrophysiology of Motor Neurons in Zebrafish Embryos

De zebravis is nu een gevestigde en krachtige tool voor het modelleren van musculaire dystrofieën, aangeboren myopathieën en gerelateerde neuromusculaire ziekten. Tweekleurigheid en door aanraking veroorzaakt ontsnappingsgedrag zijn twee veelvoorkomende niet-invasieve tests die worden gebruikt om de mate van musculaire desorganisatie en bewegingsbeperking van zebravisembryo's tijdens de vroege ontwikkeling te bepalen.

Analyse van skeletspierdefecten bij larven van zebravis door middel van birisfringence- en touch-evoke escape response-assays

Hier beschreven is een protocol voor de semi-geautomatiseerde beeldvorming van weefsel-specifieke fluorescentie in zebravis embryo's.

Semi-geautomatiseerde beeldvorming van Tissue-specifieke fluorescentie in zebravis embryo&#39;s

We presenteren een methode voor de elektroretinografische (ERG) analyse van zebravislarven met behulp van micromanipulatie en elektroretinografietechnieken. Dit is een eenvoudige en duidelijke methode voor het testen van de visuele functie van zebravislarven in vivo.

Electroretinogram Analyse van de Visual Response in zebravis Larven

De hier beschreven protocollen maken de studie van de elektrische eigenschappen van prikkelbare cellen mogelijk in de meest niet-invasieve fysiologische omstandigheden door het gebruik van zebravis-embryo's in een in vivo systeem, samen met een op fluorescentie resonantie energieoverdracht (FRET) gebaseerde, genetisch gecodeerde spanningsindicator (GEVI) die selectief wordt tot expressie gebracht in het celtype van belang.

Biosensing Motor Neuron Membraan Potentieel in Live Zebrafish Embryo&#39;s

Hier presenteren we een protocol voor de ontwikkeling en de karakterisering van een zebravismodel van epilepsie als gevolg van de voorbijgaande remming van het DEPDC5-gen.

Gedrags- en fysiologische analyse in een zebravismodel van epilepsie

Dit manuscript beschrijft een eenvoudige methode om stress gedrag in volwassen zebravis te meten. De aanpak maakt gebruik van de aangeboren tendens dat zebravis de voorkeur aan de onderste helft van een tank, wanneer in een stressvolle toestand. Wij beschrijven ook methodes om de analyse met farmacologie te koppelen.

Gedrags benaderingen voor het bestuderen van aangeboren stress in zebravis

Optische helderheid is een groot voordeel voor celbiologisch en fysiologisch werk bij zebravissen. Robuuste methoden voor het meten van celgroei bij individuele dieren worden beschreven die nieuwe inzichten mogelijk maken in hoe de groei van skeletspieren en naburige weefsels worden geïntegreerd met de groei van het hele lichaam.

Real-time en herhaalde meting van skeletspiergroei in individuele levende zebravissen die worden blootgesteld aan veranderde elektrische activiteit

Zebravis gericht op reactieve elektrofielen en oxidanten (Z-REX) is een op chemische biologie gebaseerde methode voor het onderzoek van reactieve signalering van kleine moleculen. Deze techniek kan worden toegepast op levende vissen van verschillende ontwikkelingsstadia. Hier koppelen we standaardtests in zebravissen aan Z-REX voor signaalrouteanalyse.

Monitoring van on-target signaalreacties bij larvale zebravissen - Z-REX ontmaskert precieze mechanismen van elektrofiele geneesmiddelen en metabolieten

Optogenetische manipulatie van signaalroutes kan een krachtige strategie zijn om te onderzoeken hoe signalering wordt gedecodeerd bij ontwikkeling, regeneratie, homeostase en ziekte. Dit protocol biedt praktische richtlijnen voor het gebruik van licht-zuurstof-spanningsgevoelige domeingebaseerde Nodale en botmorfogene proteïne (BMP) signaleringsactivatoren in het vroege zebravisembryo.

Optogenetische signaleringsactivering in zebravisembryo's

Hier presenteren we een gedetailleerd protocol om neurale activiteit te onderzoeken in hersengebieden van transgene zebravissen die GCaMP-calciumindicatoren tot expressie brengen met behulp van confocale microscopie.

In vivo Confocale fluorescentiebeeldvorming van neurale activiteit geïnduceerd door sensorische stimulatie bij gedeeltelijk ingeperkte larvale zebravissen

Leer een FRET-imagingprotocol om ERK-activatie in zebravisembryo's te detecteren voor onderzoek naar RASopathieën en farmacologische modulatie. Deze methode ondersteunt variantvalidatie en preklinische geneesmiddelentesten.

Een efficiënt protocol om ERK-activiteitsmodulatie te beoordelen in vroege zebravismodellen van het Noonan-syndroom via live FRET-microscopie en immunofluorescentie (Video) | JoVE Journal

Een efficiënt protocol om ERK-activiteitsmodulatie te beoordelen in vroege zebravismodellen van het Noonan-syndroom via live FRET-microscopie en immunofluorescentie

Meer video's verkennen