Eksperymentalny mysi model czerniaka z przerzutami: platforma do badania potencjału przerzutowego komórek czerniaka w płucach

- Eksperymentalne modele przerzutów pomagają ocenić potencjał komórek nowotworowych do wynaczynienia i proliferacji w określonych miejscach po wstrzyknięciu donaczyniowym. Na początek należy przygotować jednokomórkową zawiesinę komórek czerniaka w pożądanym stężeniu przy użyciu odpowiedniej pożywki. Zawiesinę należy załadować do strzykawki.

Następnie unieruchom, unieruchamiaj mysz w komorze i zabezpiecz ją tak, aby jej ogon był dostępny. Obróć mysz o 90 stopni, aby wyświetlić jej żyłę boczną. Użyj lampy grzewczej, aby zwiększyć temperaturę otoczenia, aby rozszerzyć żyłę ogonową. Teraz wbij igłę w kierunku dystalnego końca ogona i wstrzyknij przygotowaną zawiesinę komórek czerniaka do rozszerzonej żyły.

Wstrzyknięte przerzutowe komórki nowotworowe migrują przez układ krążenia. W końcu niektóre z tych komórek wynaczyniają się z krążenia do odległych narządów, takich jak płuca. Te komórki nowotworowe przystosowują się do nowego mikrośrodowiska, aby namnażać się i tworzyć eksperymentalne ogniska przerzutowe.

W poniższym protokole zademonstrujemy wstrzyknięcie komórek czerniaka B16-BL6 do żyły ogonowej do modelu mysiego w celu zbadania ich potencjału przerzutowego.

- Po przygotowaniu wszystkich zawiesin komórek B16-BL6 wybierz mysz. Trzymając go za ogon, poprowadź zwierzę tyłem do przodu, do krępowania. Gdy tułów myszy znajdzie się w komorze głównej, a jej ogon na zewnątrz aparatu, przystąp do ciągnięcia zwierzęcia w kierunku końca krępowania.

Następnie włóż tłok ograniczający i kontynuuj naciskanie tłoka, aż mysz zostanie zabezpieczona. Gdy zwierzę znajdzie się na miejscu, obróć mysz o 90 stopni tak, aby jedna z bocznych żył ogonowych była skierowana do góry. Następnie użyj wacika nasączonego alkoholem, aby energicznie oczyścić stronę ogona myszy, w której żyła jest najbardziej widoczna.

Aby przygotować się do wstrzyknięcia, najpierw należy zebrać 300 mikrolitrów z 0,5 miliona komórek na mililitr zawiesiny do strzykawki. Następnie wysuń bąbelki ze strzykawki, odwracając ją, przesuwając na bok i naciskając tłok. Po usunięciu pęcherzyków należy wyrzucić hodowlę komórkową, aby uzyskać ostateczną objętość 250 mikrolitrów w strzykawce.

Kontynuuj rozciąganie ogona myszy ręką niedominującą. Przytrzymaj go tak, aby palec wskazujący uniósł bliższy koniec ogona, a kciuk wcisnął dystalną część. Ręką dominującą wbij igłę do żyły w kierunku dystalnego końca ogona, pod niewielkim kątem w dół. Następnie włóż igłę dalej, dostosowując ją tak, aby pasowała do kąta żyły ogonowej.

Po wprowadzeniu igły, około 1 centymetr do żyły ogonowej, rozpocząć naciskanie tłoka, trzymając strzykawkę stabilnie. Zatamować krwawienie, przytrzymując gazę przy miejscu wejścia. Po wyrzuceniu zawiesiny komórkowej należy wyjąć igłę z żyły i wyrzucić ją. Następnie wyjmij tłok z ogranicznika i umieść mysz w klatce odbiorczej.

• Experimental metastasis models - Tools to evaluate tumor cells' propensity to extravasate and proliferate following intravascular injection.
• Melanoma - A potent type of skin cancer that can spread to other organs like the lungs.
• B16-BL6 melanoma cells - Specific melanoma cells used in research for their metastatic potential.
• Tail vein injection - Technique to introduce substances directly into the bloodstream for experimental purposes.
• Metastatic foci - The sites where cancer cells adapt, proliferate and establish after traveling from the original tumor site.

• Melanoma metastasis - This describes how melanoma cells spread from the primary site to other parts of the body (e.g., lungs).
• Basics of tail vein injection - This procedure is a method of administering substances directly into the bloodstream (e.g., B16-BL6 melanoma cells).
• Metastatic foci formation process - This describes how injected cancer cells adapt to new environments, leading to metastasis.
• Link to mouse model - B16-BL6 melanoma cells are injected into a mouse model to study their metastatic potential.

• What is melanoma and how does it metastasize to the lungs?
• What is the purpose of tail vein injection in the metastatic model?
• How do melanoma cells form metastatic foci in distant organs?

• Targeted cancer treatments - Understanding metastasis could guide development of targeted therapies (e.g., for melanoma).
• Cancer research - The B16 mouse model aids in understanding cancer spread (e.g., melanoma metastasis).
• Medical advancements - Learning about metastasis contributes to treating other metastatic cancers (e.g., lung metastasis).
• Innovations in metastasis study - The study of metastasis helps in improving cancer diagnosis and prognosis methods.