JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:40 min. • August 29th, 2025
Zacznij od nerwu kulszowego odizolowanego od myszy.
Neurony w nerwie zostały transfekowane w celu ekspresji fluorescencyjnych białek cytoplazmatycznych.
Nerw został zmiażdżony w celu wywołania urazu, który został oznaczony szwem.
Uszkodzone segmenty aksonów w tym miejscu ulegają degeneracji, a zrekrutowane makrofagi usuwają szczątki.
Komórki Schwanna namnażają się, tworząc ścieżki prowadzące i wydzielają czynniki neurotroficzne, które sprzyjają odrastaniu aksonów. Aksony rozciągają się wzdłuż tych ścieżek, regenerując nerw.
Napraw nerw, aby zachować struktury komórkowe, a następnie usuń wszelkie przyczepione tkanki nieneuronalne.
Przemyć buforem, aby usunąć resztki utrwalaczy.
Umieść nerw na szkiełku mikroskopowym, nałóż podłoże mocujące i umieść szkiełko nakrywkowe.
Spłaszcz nerw, aby ustawić aksony w tej samej płaszczyźnie ogniskowej do obrazowania.
Za pomocą mikroskopu epifluorescencyjnego prześledź aksony od miejsca zgniecenia do ich dystalnych końców, aby
zmierzyć długość regeneracji.
Oddziel DRG razem z korzeniami nerwowymi i nerwem kulszowym, ostrożnie za pomocą mikronożyczek i mikrokleszczyków pod mikroskopem preparacyjnym.
Następnie przenieś nerw kulszowy bezpośrednio w 4% PFA przez n
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych