JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:41 min. • February 26th, 2026
Weź zawiesina bakterii patogennych.
Dodaj zawiesinę do przylegającej kultury makrofagów pochodzących ze szpiku kostnego lub komórek BMDM i inkubuj.
Bakterie wykorzystują białka powierzchniowe do wiązania się z receptorami komórek gospodarza, ułatwiając ich przyleganie.
Przepłukaj buforem, aby usunąć nieobecne bakterie.
Dodaj świeże podłoże i inkubuj.
Przyczepione bakterie są następnie internalizowane przez komórkę gospodarza.
Dodaj antybiotyk, aby zabić bakterie nieinternalizowane.
Usuń medium i przemyj buforem.
Dodaj schłodzoną wodę, aby zlikwidować komórkę gospodarza, uwalniając zawartość komórkową, jądro i zinternalizowane bakterie.
Zbierz lizat komórkowy i poddaj wirówkę, aby wytrącić się z resztek komórkowych.
Zbierz supernatant zawierający bakterie. Przepuścić go przez urządzenie filtrujące, aby wychwycić nienaruszone bakterie.
Złóż papier filtracyjny i włóż go do tubki.
Szybkie zamrażanie w ciekłym azocie, aby zachować integralność komórek.
Przechowuj w chłodnych warunkach do dalszego użycia.
Używając 0,5 mililitra wymytej zawiesiny bakteryjnej, zainfekuj każdą płytkę makrofagową. Jeśli używasz wielu płytek, odstaw infekcje co 15 minut, aby umożliwić pobranie każdej płytki osobno na końcu
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych