Test kolorymetryczny do oznaczania ilościowego węglowodanów niestrukturalnych w tkankach roślinnych

Węglowodany strawne są niestrukturalnymi składnikami tkanki roślinnej i działają jako rezerwowe źródło energii dla wzrostu i metabolizmu roślin.

Aby określić ilościowo węglowodany niestrukturalne, weź zmierzoną ilość tkanki roślinnej w probówce. Dodać rozcieńczony kwas siarkowy do probówki i podgrzać próbkę. Po podgrzaniu kwas siarkowy hydrolizuje polisacharydy strawnych węglowodanów do odpowiednich podjednostek monosacharydowych.

Ostudzić próbkę. Odwirować probówkę w celu granulowania niestrawionego materiału roślinnego i uzyskać supernatant zawierający cukrów prostych.

Odessać supernatant do świeżej probówki i potraktować cukrów prostych roztworem fenolu, a następnie dodać kwas siarkowy. Wiruj probówkę, aby wymieszać zawartość i inkubować.

Podczas inkubacji kwas siarkowy odwadnia cukrów prostych do wytworzenia pochodnych furfuralu. Te pochodne furfuralu reagują z fenolem, tworząc roztwór żółtego złota.

Spektroskopowo określić absorbancję roztworu żółtego złota o długości 490 nanometrów, co odpowiada zawartości węglowodanów w próbce roślinnej.

Następnie weź różne stężenia roztworów glukozy i powtórz obróbkę kwasem fenolowo-siarkowym, aby uzyskać różną intensywność koloru, i wykreś