JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 5:13 min. • July 8th, 2025
Aby wykryć interakcje ligand-analit za pomocą interferometrii biowarstwowej, BLI, należy rozpocząć od uwodnionego bioczujnika światłowodowego przymocowanego do uchwytu przyrządu BLI, ustawionego na żądany program.
Końcówka biosensora jest pokryta biokompatybilną warstwą unieruchomioną grupami kwasu niklowo-nitrylotryoctowego, Ni-NTA. Zanurz końcówkę biosensora w buforze.
Przyrząd emituje białe światło w kierunku bioczujnika, które odbija się od dwóch interfejsów: wewnętrznej warstwy referencyjnej lub optycznej oraz warstwy biokompatybilnej. Odbite wiązki interferują konstruktywnie lub destrukcyjnie przy różnych długościach fal świetlnych. Fotodetektor wykrywa powstały wzór interferencyjny
.Po wyjściowym pomiarze odpowiedzi interferometrycznej dodaj roztwór liganda znakowany histydyną. Znaczniki histydyny wiążą się z kationami niklu na biosensorze, unieruchamiając ligandy na końcówce.
W wyniku asocjacji emitowane białe światło odbija się od warstwy optycznej, a warstwa biokompatybilna zostaje unieruchomiona ligandami o zwiększonej grubości optycznej na końcówce. Zwiększa to odległość między warstwami odbijającymi, powodując przesunięcie wzoru interferencyjnego i przesunięcie długośc
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych