Kwantyfikacja powstawania falban błonowych za pomocą skaningowej mikroskopii elektronowej

Zewnętrzne stymulatory aktywują komórki i indukują trójwymiarowe okrągłe wypukłości błony lub tworzenie falban błony, niezbędne dla różnych aktywności komórkowych.

Aby uwidocznić tworzenie się falban błony, zacznij od płytki wielodołkowej zawierającej szkiełko nakrywkowe u podstawy. Wierzchołek szkiełka nakrywkowego ma hodowane makrofagi.

Potraktuj te makrofagi cząsteczkami stymulującymi, które aktywują komórki, ułatwiając reorganizację cytoszkieletu i tworzenie wypukłości błony. Pokryj komórki roztworem utrwalającym, sieciując białka i zachowując strukturę komórkową.

Traktuj utrwalone makrofagi zwiększonym stężeniem alkoholu w celu całkowitego odwodnienia. Wysusz te makrofagi za pomocą suszarki w punkcie krytycznym, eliminując wszelkie ślady wody w celu lepszego obrazowania.

Zamontuj szkiełko nakrywkowe na uchwycie próbki do skaningowej mikroskopii elektronowej lub SEM za pomocą taśmy przewodzącej. Napylanie Powlekaj szkiełko nakrywkowe zawierające makrofagi cienką warstwą metalu, zapewniając dobrą przewodność elektronową podczas obrazowania.

Umieść szkiełko nakrywkowe w komorze SEM. Skoncentruj wiązkę elektronów na szkiełku nakrywkowym. Wiązka elektronów uderza w membranę makrofa