Podzielona na przedziały pierwotna hodowla neuronów mysich przy użyciu plastikowych chipów mikroprzepływowych

Weźmy plastikowy chip mikroprzepływowy składający się ze zbiorników i przedziałów somatycznych, a także zbiorników i komór aksonalnych, połączonych mikrorowkami.

Dodaj roztwór do wstępnej powłoki, aby nasycić komory i rowki, zapobiegając uwięzieniu pęcherzyków powietrza.

Zassać roztwór, pozostawiając główne komory wypełnione. Umyć buforem.

Pokryj studzienki syntetycznym polimerem, który ułatwia adhezję neuronów. Przemyć buforem i dodać pożywkę hodowlaną, aby zapobiec wyschnięciu wióra.

Aby wysiać zawiesinę neuronów hipokampa szczura, odessaj pożywkę.

Załadować zawiesinę do zbiorników somatycznych. Neurony wchodzą do przedziału somatycznego i przyczepiają się do niego.

Dodaj pożywkę do hodowli neuronów do studzienek i inkubuj. Czynniki wzrostu obecne w pożywce ułatwiają wzrost neuronów.

Stopniowo neurony rozszerzają swoje aksony, które wrastają do przedziału aksonalnego przez mikrorowki.

Wąskość rowków zapobiega przedostawaniu się ciał komórek nerwowych, zapewniając fizyczną separację regionów somatycznych i aksonalnych.

Na początek umieść sterylny wielokomorowy chip na szalce Petriego. Dodaj 100 mikrolitrów roztworu do powlekania wstępnego do lewego górnego dołka chipa i pozwól mu